乙酸鈣不動桿菌的實驗室檢測與鑒定及臨床防控與安全!
小楊 / 2025-12-01 09:27:47
乙酸鈣不動桿菌是不動桿菌屬(Acinetobacter)的模式種,為革蘭氏陰性、非發(fā)酵、需氧的球桿菌,廣泛分布于自然環(huán)境與臨床場景,是微生物學(xué)和臨床微生物領(lǐng)域的重點研究對象,以下從多維度梳理其核心信息:
一、基礎(chǔ)生物學(xué)特性
1、形態(tài)與染色
革蘭氏染色陰性,無芽孢、無鞭毛(多數(shù)菌株),偶有纖毛;鏡下呈球桿狀,常成對或短鏈排列,易被誤判為奈瑟菌屬。
需氧生長,最適溫度 30~37℃,pH 6.5~8.0,在普通培養(yǎng)基(如
血瓊脂、
麥康凱瓊脂)上生長良好,菌落呈灰白色、光滑、不透明,無溶血現(xiàn)象。
2、生化特征
氧化酶陰性,觸酶陽性,硝酸鹽還原陰性,能利用檸檬酸鹽、乙酸鹽作為唯一碳源(“乙酸鈣”命名來源);
不發(fā)酵葡萄糖等糖類(非發(fā)酵菌特征),脲酶多為陰性,精氨酸雙水解酶陽性(部分菌株)。
3、耐藥性基礎(chǔ)
固有耐藥:對青霉素 G、第一代頭孢菌素、紅霉素等天然耐藥;
獲得性耐藥:可通過質(zhì)粒、轉(zhuǎn)座子獲得 β- 內(nèi)酰胺酶、氨基糖苷類修飾酶等,導(dǎo)致對碳青霉烯類、喹諾酮類耐藥(臨床分離株常見)。
二、分布與致病性
1、自然分布
廣泛存在于土壤、水、空氣、植物表面,以及醫(yī)院環(huán)境,是典型的“環(huán)境定植菌”。
2、臨床致病性
條件致病菌:健康人群定植率低,免疫低下者易引發(fā)感染;
感染類型:肺炎(最常見,尤其是呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎)、敗血癥、傷口感染、腦膜炎等,嚴(yán)重時可導(dǎo)致多器官衰竭。
醫(yī)院內(nèi)傳播:可通過接觸傳播,易引發(fā)院內(nèi)暴發(fā)流行。
三、實驗室檢測與鑒定
1、分離培養(yǎng)
標(biāo)本處理:臨床標(biāo)本接種血瓊脂和麥康凱瓊脂,37℃培養(yǎng) 18~24h;
初步篩選:氧化酶陰性 + 革蘭氏陰性球桿菌 + 麥康凱瓊脂上生長(乳糖不發(fā)酵),可初步判定為不動桿菌屬。
2、精準(zhǔn)鑒定
生化鑒定:通過 API 20NE、VITEK 2 等自動化系統(tǒng)檢測碳源利用、酶活性等特征;
分子鑒定:16S rRNA 基因測序、gyrB 基因測序(區(qū)分不動桿菌屬內(nèi)物種,如與鮑曼不動桿菌的鑒別);
基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜(MALDI-TOF MS):快速鑒定,準(zhǔn)確率>95%。
3、藥敏試驗
遵循 CLSI 或 EUCAST 標(biāo)準(zhǔn),采用紙片擴(kuò)散法、微量肉湯稀釋法檢測對哌拉西林、頭孢他啶、亞胺培南、阿米卡星等藥物的敏感性;
重點監(jiān)測碳青霉烯類耐藥性(需檢測 OXA 酶、金屬 β- 內(nèi)酰胺酶等)。
四、培養(yǎng)與保藏要點(實驗操作層面)
1、培養(yǎng)基選擇
基礎(chǔ)培養(yǎng):血瓊脂(含 5% 羊血)或營養(yǎng)瓊脂,用于常規(guī)分離;
選擇性培養(yǎng):麥康凱瓊脂(抑制革蘭氏陽性菌)、不動桿菌選擇性培養(yǎng)基(含頭孢噻肟 + 萬古霉素),用于污染標(biāo)本的分離。
2、培養(yǎng)注意事項
標(biāo)本需及時接種(室溫放置不超過 2h),避免干燥;
臨床標(biāo)本若懷疑該菌感染,需同時做定量培養(yǎng)(如痰標(biāo)本>10^6 CFU/mL 才有臨床意義,區(qū)分定植與感染)。
3、菌種保藏
短期保藏:斜面培養(yǎng)基 4℃保存,每月傳代 1 次;
長期保藏:甘油凍存(15% 甘油 + 肉湯培養(yǎng)物)-80℃保存,或凍干保藏(脫脂牛奶為保護(hù)劑),復(fù)蘇后需驗證純度和活性。
五、臨床防控與實驗安全
1、臨床防控
感染控制:加強(qiáng)手衛(wèi)生、醫(yī)療器械消毒,隔離耐藥菌株感染患者;
抗菌治療:根據(jù)藥敏結(jié)果選擇藥物,敏感株可選用舒巴坦、亞胺培南、米諾環(huán)素等,多重耐藥株可聯(lián)合用藥。
2、實驗室安全
生物安全等級:BSL-2(臨床分離株),操作時佩戴手套、口罩,避免氣溶膠產(chǎn)生;
廢棄物處理:培養(yǎng)物、耗材需高壓滅菌(121℃,30min)后丟棄。
北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司的
微生物菌種查詢網(wǎng)提供微生物菌種保藏、測序、購買等服務(wù),是中國微生物菌種保藏中心的服務(wù)平臺,并且是集微生物菌種、菌種,ATCC菌種、細(xì)胞、培養(yǎng)基為一體的大型微生物查詢類網(wǎng)站,自設(shè)設(shè)備及技術(shù)的微生物菌種保藏中心!歡迎廣大客戶來詢!
下載附件
上一篇:厭氧菌分離培養(yǎng)的操作流程與步驟及質(zhì)量控制與安全!
下一篇:鼠檸檬酸桿菌的常見問題與質(zhì)量控制及實驗室操作規(guī)范!