霍亂雙糖鐵瓊脂（CTIA）實驗原理與現(xiàn)象及結(jié)果判定！
小楊 / 2026-01-04 09:53:04
霍亂雙糖鐵瓊脂（Cholera Triple Sugar Iron Agar，CTIA）是用于霍亂弧菌篩選和初步鑒定的選擇性培養(yǎng)基，其核心設(shè)計基于霍亂弧菌的碳源利用特性和產(chǎn)堿/產(chǎn)酸代謝特點(diǎn)。
一、實驗原理
碳源組成培養(yǎng)基中含有兩種糖類：葡萄糖（低濃度，0.1%）和蔗糖（高濃度，1%），同時含有蛋白胨作為氮源。霍亂弧菌可發(fā)酵蔗糖，但部分非致病性弧菌可能僅發(fā)酵葡萄糖或不發(fā)酵蔗糖，以此實現(xiàn)鑒別。
pH 指示劑培養(yǎng)基中加入酚紅作為 pH 指示劑，其變色范圍為 pH 6.8（黃）~ pH 8.4（紅）。
細(xì)菌發(fā)酵糖類產(chǎn)酸時，培養(yǎng)基 pH 下降，酚紅由紅色變?yōu)辄S色；
細(xì)菌分解蛋白胨產(chǎn)堿時，培養(yǎng)基 pH 上升，酚紅保持紅色或變?yōu)楦畹募t色。
硫代硫酸鈉與檸檬酸鐵銨培養(yǎng)基中添加硫代硫酸鈉（底物）和檸檬酸鐵銨（指示劑），用于檢測細(xì)菌是否產(chǎn)生硫化氫（H?S）：細(xì)菌產(chǎn)生的 H?S 與檸檬酸鐵銨中的 Fe³?結(jié)合，生成黑色的硫化亞鐵沉淀。
選擇性抑制劑部分 CTIA 配方中會加入亞碲酸鉀等抑制劑，可抑制革蘭氏陽性菌和部分非致病性革蘭氏陰性菌，提高霍亂弧菌的檢出率。
二、典型實驗現(xiàn)象及結(jié)果判定
實驗方法為：用接種針挑取純培養(yǎng)的菌落，穿刺接種到 CTIA 培養(yǎng)基深層，同時在培養(yǎng)基斜面劃線，37℃培養(yǎng) 18~24h 后觀察結(jié)果。
菌株類型 斜面顏色 底層顏色 硫化氫（H?S） 產(chǎn)氣情況 典型代表菌株
霍亂弧菌 黃色 黃色 陰性（無黑色） 陽性（有氣泡/裂隙） O1 群、O139 群霍亂弧菌
非發(fā)酵蔗糖弧菌 紅色 黃色 陰性 陰性或弱陽性 部分副溶血弧菌
產(chǎn)硫化氫菌株 紅色/黃色 黃色 陽性（黑色沉淀） 不定 沙門氏菌屬
關(guān)鍵現(xiàn)象解讀
霍亂弧菌的特征表現(xiàn)因霍亂弧菌可同時發(fā)酵葡萄糖和蔗糖，產(chǎn)酸量多，因此斜面和底層均呈黃色；代謝過程中產(chǎn)生氣體，培養(yǎng)基底層或斜面可見氣泡、裂隙；霍亂弧菌不產(chǎn)生硫化氫，培養(yǎng)基無黑色沉淀。
非目標(biāo)菌株的區(qū)分
僅發(fā)酵葡萄糖的菌株：葡萄糖耗盡后，細(xì)菌在斜面分解蛋白胨產(chǎn)堿，使斜面變紅，底層因葡萄糖發(fā)酵產(chǎn)酸保持黃色（即紅斜面、黃底層）。
產(chǎn)硫化氫菌株：培養(yǎng)基內(nèi)出現(xiàn)黑色沉淀，可直接與霍亂弧菌區(qū)分。
三、注意事項
接種時需保證穿刺到底部，且斜面劃線均勻，避免因接種操作不當(dāng)導(dǎo)致結(jié)果誤判。
培養(yǎng)時間不宜超過 24h，否則斜面易因蛋白胨過度分解而變?yōu)榧t色，干擾結(jié)果判定。
CTIA 僅為初步鑒定培養(yǎng)基，最終確診霍亂弧菌需結(jié)合血清學(xué)試驗、生化試驗及分子生物學(xué)方法。
北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司擁有對菌種、細(xì)胞、培養(yǎng)基、配套試劑等產(chǎn)品需求者的極優(yōu)質(zhì)服務(wù)，對購買項目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到最終售后的確保項目準(zhǔn)確到位，都有相關(guān)人士進(jìn)行維護(hù),確保您在
微生物菌種查詢網(wǎng)中獲得最優(yōu)質(zhì)服務(wù)！也正因為此，北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司與國內(nèi)外多家研制單位、生物制藥、第三方檢測機(jī)構(gòu)和科研院所院校、化工企業(yè)有著良好、長期和穩(wěn)定的合作關(guān)系！
下載附件
上一篇：蠟樣芽胞桿菌溶血試驗與溶菌酶耐性試驗的操作步驟！
下一篇：生物實驗室日常工作中微生物菌種銷毀的規(guī)范流程與方法！