蠟樣芽胞桿菌選擇性瓊脂基礎(chǔ)的原理與使用方法及注意事項！
小楊 / 2026-01-14 09:32:08
蠟樣芽胞桿菌選擇性瓊脂基礎(chǔ)是食品微生物檢測中分離和鑒定
蠟樣芽胞桿菌的專用培養(yǎng)基，符合GB 4789.14-2014《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗 蠟樣芽胞桿菌檢驗》 等行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。
一、培養(yǎng)基原理
該培養(yǎng)基的選擇性和鑒別性由基礎(chǔ)成分、選擇性試劑、鑒別性底物共同實現(xiàn)，核心原理如下：
1、選擇性抑制機制
培養(yǎng)基中添加 多粘菌素 B 或 多粘菌素 E，這類抗生素能作用于革蘭氏陰性菌的細胞膜，破壞其結(jié)構(gòu)完整性，從而抑制絕大多數(shù)革蘭氏陰性雜菌的生長；而
蠟樣芽胞桿菌作為革蘭氏陽性菌，對多粘菌素具有抗性，可在培養(yǎng)基上正常生長。
2、鑒別性底物反應(yīng)
甘露醇（碳源）：
蠟樣芽胞桿菌不發(fā)酵甘露醇，其菌落周圍不會產(chǎn)生酸性物質(zhì)；而其他能發(fā)酵甘露醇的雜菌（如
葡萄球菌）會使培養(yǎng)基中的酸堿指示劑變色。
卵黃（卵磷脂底物）：
蠟樣芽胞桿菌可產(chǎn)生卵磷脂酶，該酶能分解卵黃中的卵磷脂，生成不溶性的甘油酯和脂肪酸，在菌落周圍形成特征性的沉淀環(huán)。
酸堿指示劑（酚紅）：酚紅的變色范圍為 pH 6.8（黃）~ 8.4（紅）。不發(fā)酵甘露醇的菌株，菌落周圍培養(yǎng)基保持中性或弱堿性，呈紅色；發(fā)酵甘露醇的菌株會產(chǎn)酸，使菌落周圍培養(yǎng)基變?yōu)辄S色。
二、實驗現(xiàn)象
將待檢樣品（如食品勻漿稀釋液）接種于 MYP 瓊脂平板，經(jīng) 30℃ ± 1℃ 培養(yǎng) 24 h ~ 48 h 后，觀察菌落形態(tài)及周圍培養(yǎng)基變化，典型實驗現(xiàn)象如下：
1、蠟樣芽胞桿菌的典型菌落
菌落形態(tài)：呈乳白色至淡粉紅色，不透明，表面粗糙，邊緣不整齊，類似毛玻璃或蠟狀，直徑約 2 mm ~ 5 mm。
特征性沉淀環(huán)：菌落周圍會出現(xiàn)一圈 寬約 2 mm ~ 5 mm 的乳白色渾濁環(huán)（卵磷脂酶分解卵黃的產(chǎn)物），此為蠟樣芽胞桿菌的關(guān)鍵鑒別特征。
培養(yǎng)基顏色：菌落周圍的培養(yǎng)基無黃色變化，保持酚紅的紅色（因不發(fā)酵甘露醇）。
2、雜菌的菌落現(xiàn)象
革蘭氏陰性菌：因受多粘菌素抑制，無法生長或僅形成微小菌落。
可發(fā)酵甘露醇的革蘭氏陽性雜菌（如
葡萄球菌）：菌落周圍培養(yǎng)基變?yōu)辄S色，且多數(shù)不產(chǎn)生卵磷脂酶，無乳白色渾濁環(huán)。
不發(fā)酵甘露醇但無卵磷脂酶的雜菌：菌落周圍培養(yǎng)基為紅色，但無渾濁環(huán)，可與蠟樣芽胞桿菌區(qū)分。
三、注意事項
卵黃液需臨用前添加，且避免高溫滅菌，以防破壞卵磷脂成分；多粘菌素需用無菌水溶解后，在培養(yǎng)基冷卻至 50℃ 左右時加入。
培養(yǎng)時間需嚴(yán)格控制在 24 h ~ 48 h，超過 48 h 可能導(dǎo)致雜菌過度生長，干擾結(jié)果判斷。
僅通過 MYP 瓊脂的菌落形態(tài)無法完全確證
蠟樣芽胞桿菌，需進一步結(jié)合生化試驗或分子生物學(xué)方法進行鑒定。
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