平板制備過程中如何避免產(chǎn)生氣泡？具體該怎么操作呢？
小楊 / 2026-02-11 10:48:53
百歐博偉生物：平板倒瓊脂時氣泡主要來自：倒太快、晃動過猛、培養(yǎng)基溫度太低、瓶壁/皿底帶氣、攪拌溶入空氣。下面是一套實操有效、實驗室通用的防氣泡方法，照著做基本能做到零氣泡。
一、滅菌 & 降溫階段（從源頭減少氣泡）
1、配制時輕柔攪拌，不要劇烈晃
溶解用磁力攪拌或玻璃棒輕攪，避免高速攪入大量空氣。
不要反復劇烈搖晃三角瓶。
2、滅菌后不要劇烈搖勻
滅菌結(jié)束取出后，只輕輕旋轉(zhuǎn)混勻，不要上下猛搖。
有沉淀的培養(yǎng)基（血平板除外）：等溫度降到 50℃左右再輕混。
3、控制好倒板溫度（最關(guān)鍵）
最佳溫度：45～50℃（手摸溫熱不燙）。
溫度太低 → 瓊脂半凝，倒的時候易裹氣、表面不平。
溫度太高 → 冷凝水多，但也更容易產(chǎn)生氣泡。
二、倒平板操作（核心防氣泡）
1、倒液動作：慢、穩(wěn)、貼壁
培養(yǎng)皿蓋只掀開一條縫，不要全開。
三角瓶口靠近皿底、貼壁緩慢流下，不要懸空猛倒。
流速要慢：像細線一樣流入，不要沖擊液面。
2、杜絕“沖擊式倒板”
不要直接沖到皿中央，會瞬間卷進空氣形成氣泡。
正確：沿皿內(nèi)壁緩慢流入，讓瓊脂自然鋪滿底部。
3、晃動方式：水平輕旋，不顛、不抖
瓊脂倒完后：水平桌面輕輕畫小圈旋轉(zhuǎn)，讓其自然攤平。
禁止：上下顛、左右猛晃、拍打桌面 —— 必出氣泡。
禁止：拿起培養(yǎng)皿在空中晃。
三、已經(jīng)產(chǎn)生小氣泡怎么救（現(xiàn)場處理）
1、小火快速燎一下（酒精燈火焰）
氣泡剛出現(xiàn)、瓊脂還流動時：
開蓋，酒精燈外焰快速掃過表面 1 次，氣泡立刻破。
注意：快掃，不要燒太久，避免燙壞培養(yǎng)基或烤干表面。
2、用無菌接種環(huán)/針頭輕輕戳破
小氣泡：無菌針輕輕點破即可，不影響使用。
四、容易被忽略的細節(jié)（很多人踩坑）
培養(yǎng)皿提前干燥：潮濕皿底更容易粘氣泡。
三角瓶倒之前：瓶口輕輕靠一下無菌濾紙，去掉掛滴，避免滴入產(chǎn)生氣泡。
不要在強風直吹處倒板（超凈臺風口太大），液面波動易裹氣。
含血清、抗生素等添加物的平板：加完后輕輕混勻，不要渦旋。
五、極簡總結(jié)
溫度控制在 45～50℃
貼壁慢倒，不沖擊、不懸空
只水平輕旋，不晃、不顛
有氣泡立刻火焰快掃或無菌針戳破
全程輕柔，不劇烈攪拌、不猛搖三角瓶
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