表面微生物檢測的方法之接觸碟法、棉簽擦拭法及表面沖洗法！
小楊 / 2026-02-13 09:21:08
百歐博偉生物：潔凈區(qū)表面微生物檢測，最常用、最規(guī)范的就三類：接觸碟法、棉簽擦拭法、表面沖洗/涂抹法。下面按“怎么用、優(yōu)缺點、適用場景、操作要點”一次性講全，方便你直接選方法、寫 SOP。
一、接觸碟法（Rodac/Contact Plate）—— 最主流、最推薦
適用：平整、硬質(zhì)、無明顯液體的表面（臺面、設(shè)備外殼、墻面、傳遞窗、門把手等）。
1、操作要點
用凸起瓊脂的接觸碟（常用面積：25 cm²），表面干燥、無冷凝水。
采樣：
輕輕壓在待測表面，均勻用力按壓 10–15 秒，不滑動、不旋轉(zhuǎn)。
每個點 1 碟，做好標(biāo)識（位置、日期、班次）。
培養(yǎng)：
細(xì)菌：TSA 30–35℃，48–72h
霉菌/酵母：SDA 20–25℃，5–7d
計數(shù)：記錄CFU/25 cm²。
2、優(yōu)點
操作快、標(biāo)準(zhǔn)化程度高
面積固定，結(jié)果易對比、易寫進(jìn)限度
適合日常監(jiān)測、趨勢分析
3、缺點
只能測平整表面，縫隙、死角測不到
消毒劑殘留可能抑制生長，建議用含中和劑的接觸碟
二、棉簽擦拭法（Swab Method）—— 不規(guī)則表面/死角必用
適用：凹凸、縫隙、螺紋、閥門、管道接口、設(shè)備死角、軟質(zhì)表面等接觸碟無法貼合的地方。
1、操作要點
準(zhǔn)備：無菌棉簽 + 無菌洗脫液（生理鹽水/PBS/含中和劑緩沖液）。
采樣：
棉簽蘸洗脫液，擠去多余液體；
在固定面積（如 10 cm×10 cm=100 cm²）內(nèi)橫豎交叉擦拭，邊擦邊轉(zhuǎn)棉簽；
同一位置往返 2–3 次，確保全覆蓋。
洗脫：
棉簽頭剪入定量洗脫液試管（如 10 mL），充分振蕩/渦旋；
取適量體積傾注或涂布到 TSA、SDA。
培養(yǎng)與計數(shù)：同接觸碟，結(jié)果表示為 CFU/100 cm² 或 CFU/m²。
2、優(yōu)點
能測復(fù)雜形狀、縫隙、死角
可用于驗證清潔 SOP “最難清潔部位”
3、缺點
操作步驟多，人為誤差大
回收率通常低于接觸碟，必須做回收率驗證
面積需嚴(yán)格限定，否則結(jié)果不可比
三、表面沖洗/涂抹法（Rinse/Sponge Method）—— 大面積/可沖洗表面
適用：地面、墻面、大型設(shè)備外表面、可拆洗部件等大面積表面。
1、操作要點
用定量無菌緩沖液（如 100–500 mL）沖洗/涂抹規(guī)定面積；
回收全部液體，過濾或濃縮后培養(yǎng)；
結(jié)果表示為 CFU/面積 或 CFU/體積。
2、優(yōu)點
適合大面積、可沖洗表面的整體評估
可用于清潔驗證、終淋水微生物檢測
3、缺點
操作復(fù)雜、耗時長
回收率波動大，一般不作為日常監(jiān)測首選
四、三種方法對比（直接選法用這張表）
方法 適用表面 結(jié)果表示 優(yōu)點 缺點 推薦場景
接觸碟法 平整硬質(zhì)表面 CFU/25 cm² 快、標(biāo)準(zhǔn)、易對比 不適合縫隙/死角 日常環(huán)境監(jiān)測、GMP 常規(guī)監(jiān)控
棉簽擦拭法 不規(guī)則/縫隙/死角 CFU/100 cm² 等 覆蓋死角、驗證清潔 SOP 回收率低、操作復(fù)雜 清潔驗證、關(guān)鍵設(shè)備死角監(jiān)測
沖洗/涂抹法 大面積/可沖洗表面 CFU/面積或 CFU/體積 整體評估、適合終淋水 復(fù)雜、回收率波動大 清潔驗證、地面/墻面整體評估
五、方法選擇的通用原則（寫 SOP 直接用）
優(yōu)先用接觸碟：平整、關(guān)鍵、高頻監(jiān)測點。
棉簽法補(bǔ)死角：接觸碟覆蓋不到的縫隙、螺紋、閥門、難清潔部位。
沖洗法做驗證：大面積、可沖洗表面的清潔驗證/再驗證。
必須考慮中和劑：消毒劑殘留會導(dǎo)致假陰性，培養(yǎng)基/洗脫液中建議加卵磷脂、吐溫 80 等中和劑。
方法要驗證：接觸碟/棉簽法都應(yīng)做回收率驗證（用標(biāo)準(zhǔn)菌株：金葡、大腸、枯草、白念等），確保方法有效。
六、一句話總結(jié)
日常監(jiān)測：接觸碟為主
死角/清潔驗證：棉簽法必配
大面積/沖洗表面：沖洗/涂抹法補(bǔ)充
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