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貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞的傳代方法
中國微生物菌種查詢網(wǎng) / 2013-05-13 05:43:04

 細(xì)胞傳代


貼壁細(xì)胞:

對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml完全培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入完全培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。

懸浮細(xì)胞:

一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入完全培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。


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