一、菌種簡(jiǎn)介
平臺(tái)編號(hào)：Bio-74724
規(guī)格：Frozen
拉丁屬名：Clostridium Septicum
菌株名稱：敗血梭狀芽孢桿菌；敗毒梭菌
用途：ATCC原裝進(jìn)口
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn)）
二、詳細(xì)描述
Clostridium septicum 拉丁名 (Mace) Ford
(ATCC? 12464?) 菌株編號(hào)
Strain Designations 菌株別名 Pasteur III (NCTC 547)
Application 用途 QC strain for VITEK 2 Compact ANC card
Biosafety Level 生物安全等級(jí) 2
Biosafety classification is based on U.S. Public Health Service Guidelines, it is the responsibility of the customer to ensure that their facilities comply with biosafety regulations for their own country.
Product Format 提供形式 frozen
Storage Conditions 保藏條件
Frozen 冷凍物 : -80℃ or colder
Freeze-Dried 凍干物 : 2℃ to 8℃
Live Culture 活菌 : See Propagation Section
Preceptrol? yes
Type Strain 模式菌株 yes
Medium 培養(yǎng)基 ATCC? Medium 2107: Modified Reinforced Clostridial Agar/Broth Medium (pre-reduced)
ATCC? Medium 260: Trypticase soy agar/broth with defibrinated sheep blood
Growth Conditions 生長(zhǎng)條件
Temperature 培養(yǎng)溫度 : 37℃
Atmosphere 需氧情況: Anaerobic gas mixture, 80% N2-10% CO2-10% H2
Name of Depositor 寄存人 NCTC
Chain of Custody 來(lái)源國(guó)家 ATCC <-- NCTC <-- M Robertson type 1
References 參考文獻(xiàn) Skerman VB, et al. Approved lists of bacterial names. Int J Syst Bacteriol 30: 225-420, 1980.
VITEK 2 ANC Streamlined QC Set. bioMerieux. VITEK 2 ANC Comprehensive QC Set. bioMerieux.
Cross References Nucleotide (GenBank) : AX109989 Sequence 722 from Patent WO0123604.
Nucleotide (GenBank) : AX110096 Sequence 829 from Patent WO0123604.
Nucleotide (GenBank) : U59278 Clostridium septicum 16S ribosomal RNA gene, partial sequence.
三、產(chǎn)品特點(diǎn)
1、即開(kāi)即用,用戶只需要提供 DNA 模板。
2、引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,專(zhuān)一性強(qiáng),只擴(kuò)增鮑樣病毒,與其他植物沒(méi)有交叉反應(yīng)。
3、提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4、PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
5、本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
四、操作步驟
1、樣品準(zhǔn)備：取1毫升細(xì)胞培養(yǎng)上清(貼壁和懸浮細(xì)胞都可以,*已培養(yǎng)48小時(shí)以上),在16000g離心5分鐘,小心棄去上清,避免丟失沉淀(沉淀量有可能很少,目視看不到)。將沉淀用無(wú)菌PBS重懸,在16000g離心5分鐘,同樣小心棄去上清,如此反復(fù)用無(wú)菌PBS洗三次。*將獲得的沉淀用100微升超純水重懸,置于100℃水浴中孵育5分鐘。如此制備好的樣品可在4℃保存1到2個(gè)月。
2、PCR反應(yīng)的準(zhǔn)備：待各組份融化后先瞬時(shí)離心,然后輕彈混勻。按下表在已滅菌的PCR管中配制反應(yīng)體系,每次實(shí)驗(yàn)需加一個(gè)陰性和一個(gè)陽(yáng)性對(duì)照,測(cè)試反應(yīng)管可以有多個(gè)。配制過(guò)程中應(yīng)注意無(wú)菌,戴口罩,并注意避免操作產(chǎn)生的氣溶膠造成樣品間的交叉污染,推薦在有風(fēng)壓的設(shè)備如超凈臺(tái)或生物安全柜中進(jìn)行操作。建議配制完畢后瞬時(shí)離心以使液體沉至管底。
五、注意事項(xiàng)
1、建議使用新鮮采取的動(dòng)物組織,若為長(zhǎng)期冷凍組織,應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致模板的降解,影響PCR效率。
2、試劑Buffer AL若低溫保存,易產(chǎn)生沉淀。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時(shí)間,也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,以溶解沉淀,混勻后再使用。
3、電泳檢測(cè)時(shí),切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則,電泳時(shí)會(huì)在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4、建議擴(kuò)增片段長(zhǎng)度1 kb以內(nèi),以便擴(kuò)增效率佳。
5、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
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