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防霉抗菌——聚多曲霉的形態(tài)描述與培養(yǎng)方法!
小楊 / 2023-10-10 09:15:35


聚多曲霉又名喜多式曲霉,屬于散囊菌目發(fā)菌科曲霉屬的一種真菌。可生長在土壤、糞、酒曲、食品、望遠(yuǎn)鏡筒內(nèi)壁及各種材料的基物上。

一、菌種簡介
平臺編號:Bio-65560
規(guī)格:凍干物
拉丁屬名:Aspergillus Sydowii
中文名稱:聚多曲霉
屬名:Aspergillus
種名加詞:sydowii
來源歷史:←上海市工業(yè)微生物研究所(M219) ←中國科學(xué)院微生物研究所
收藏時(shí)間:2005.11.25
原始編號:3.3943
資源歸類編碼:15151913102
模式菌株:非模式菌株
主要用途:研究;分析檢測
具體用途:防霉抗菌。
特征特性:菌落呈絨毛狀,深藍(lán)綠色,反面呈極深的紅色,滲出物豐富。分生孢子穗近球形,典型的輻射狀;分生孢子梗無色,光滑;頂囊近球形,表面全部可孕;產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)雙層;分生孢子球形,有明顯的小刺。    
生物危害程度:四類
致病對象:無
培養(yǎng)基:蔗糖 30.0g,NaNO3 3.0g,MgSO4·7H2O 0.5g,KCl 0.5g,F(xiàn)eSO4·4H2O 0.01g,K2HPO4 1.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH6.0~6.5。
培養(yǎng)溫度:28℃
資源保藏類型:培養(yǎng)物
保存方法:真空冷凍干燥法
實(shí)物狀態(tài):有實(shí)物
共享方式:公益性共享;資源純交易性共享;合作研究共享;資源交換性共享
用途:研究;分析檢測;防霉抗菌。
注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn))

二、形態(tài)描述
菌落在查氏瓊脂上25℃7天直徑約22mm, 10-12天25-40mm,質(zhì)地為絲絨狀至絮狀,致密;顏色呈灰藍(lán)色至暗藍(lán)色,初期稍淡,老后漸深,近于暗藍(lán)灰綠色(Dark Bluish Gray Green,R.XLII)。
白屈菜綠至蒿綠(Celandine Green-→ Artemesia Green,R.XLVII)或板瓦橄欖色(Slate Olive,R.XLVII),間或有淡褐色區(qū)域;有輻射形溝紋;通常具大量滲出液,褐色至暗褐色:無氣味或具輕微霉味;菌落反面呈淡褐或暗褐色至醬色,近于栗色(Maroon,R.I)或醬紅色(Bay,R.II),色素?cái)U(kuò)散于基質(zhì)中。分生孢子頭球形至輻射形,一般直徑為52-125μm,小分生孢子頭似青霉?fàn)睿适杷芍位蛏y;
分生孢子梗直接生于基質(zhì)或生于氣生菌絲,孢梗莖長度自幾十微米至500μm,一般140-210μm,直徑(3.5-)4-8μm,壁較厚,光滑;頂囊較小,近球形或稍呈橢圓形,直徑8-15(-20)μm,幾乎全部表面可育;產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)雙層:?;?.2-)6-7(-10.4)μm×2-3.5(-4)μm,瓶梗(4.2-)6-8(-10)μm×2-3μm,有的小分生孢子頭僅分生孢梗莖頂端稍膨大后生出產(chǎn)孢細(xì)胞,有時(shí)還可見氣生菌絲上直接生有瓶梗;分生孢子為球形或近球形,直徑2.5-3.5(-5)μm,壁明顯粗糙,具小刺。
菌落在查氏酵母膏瓊脂上25℃7天直徑15-30mm,10-14無可達(dá)40mm;質(zhì)地絲絨狀至厚絮狀;邊緣白色,2-3mm,內(nèi)部暗藍(lán)綠色,近于深藍(lán)灰綠(Deep Bluish Gray Green,R.XLII)或暗俄羅斯綠至暗藍(lán)灰綠(Dark Russian Green--Dark Bluish Gray Green,R.XLII);有時(shí)具較稀的輻射狀溝紋;滲出液深褐色,出現(xiàn)于中央的溝紋部分;菌落反面褐色至深褐色,色素稍擴(kuò)散于基質(zhì)。 

三、培養(yǎng)基
*查氏瓊脂(Czapek's Agar)
蔗糖 30.0g,NaNO3 3.0g,MgSO4?7H2O 0.5g,KCl 0.5g,F(xiàn)eSO4?4H2O 0.01g,K2HPO4 1.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH6.0~6.5。 

四、菌種的培養(yǎng)
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。

五、保藏條件
安瓿瓶凍干菌種和培養(yǎng)物應(yīng)在 2-8°C 保存。西林瓶菌種請置于-20℃冷凍。甘油保藏溫度為-80°C;請勿長期置于室溫。 

六、注意事項(xiàng)
1)凍干粉首次活化,干粉要全部用完,不能預(yù)留,用無菌吸管吸取 0.3ml 的培養(yǎng)液(即以上建議的培養(yǎng)基配方,不加瓊脂)或者無菌水,滴入凍干管中,輕輕振蕩至其溶解。吸取全部菌懸液,接種在培養(yǎng)基上(建議不超過 2 支平板或者斜面,若接種液體培養(yǎng)基,則試管液體不超過 5ml 為宜);
2)經(jīng)過冷凍干燥保藏,菌種處于休眠狀態(tài),復(fù)蘇培養(yǎng)時(shí)可能會延遲生長,這時(shí)需較長的培養(yǎng)時(shí)間; 若您收到的是已復(fù)蘇的培養(yǎng)物(非凍干菌),則可以直接用于您的實(shí)驗(yàn),或根據(jù)需要轉(zhuǎn)接培養(yǎng)如有不明白之處,請務(wù)必先咨詢我單位技術(shù)人員,避免不必要的損失;
3)微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔干燥的地方,室溫放置時(shí)間過長會導(dǎo)致菌種衰退;
4)菌種操作應(yīng)在無菌條件下進(jìn)行;轉(zhuǎn)種完畢,應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理;
5)應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時(shí)轉(zhuǎn)接,凍干菌種保藏時(shí)間通常為 2-25 年;
6)菌種使用過程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降或不活,請?jiān)谑盏胶?2 個月內(nèi)和微生物菌種查詢網(wǎng)聯(lián)系,逾期不予受理;
7)打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行,生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作,打管時(shí)凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部,保護(hù)眼睛。
8)安瓿瓶開封:用浸過 75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量(2-3滴)無菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開口處在火焰上過一遍,并保持在火焰旁操作。
9)甘油管使用:使用本甘油菌時(shí)可以不用完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或進(jìn)行液體培養(yǎng)即可。也可以完全融解后使用,但隨著凍融次數(shù)的增加,細(xì)菌的活力會逐漸下降。

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