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甲基營養(yǎng)型芽胞桿菌的儲存與培養(yǎng)及打管說明!
小楊 / 2023-10-18 10:04:53


甲基營養(yǎng)型芽胞桿菌是Bacillus屬的微生物,原產(chǎn)地為中國。G+,菌體桿狀,單個或“V”字型排列。菌落近圓形,表面光滑,邊緣整齊,淺黃色。液體培養(yǎng)中度混濁,有沉落物。主要用途為研究,具體用途為產(chǎn)谷氨酸。

一、菌種簡介
平臺編號:Bio-58279
規(guī)格:凍干物
拉丁屬名:Bacillus Methylotrophicus
中文名稱:甲基營養(yǎng)型芽胞桿菌
拉丁名稱:Bacillus methylotrophicus
模式菌株:否
其它保藏中心編號:=AS 2.1203
來源歷史:←四川省食品發(fā)酵工業(yè)研究設(shè)計院(1.198)←無錫酶制劑廠←中科院微生物研究所
收藏時間:2005/12/20
原產(chǎn)國:中國
特征特性:菌落不規(guī)則,奶油色或褐色,菌表起皺,3-6mm(30℃培養(yǎng)3天)。細胞桿狀,單個或成對,很少成鏈;鞭毛側(cè)生,G+,產(chǎn)芽胞,形成抗熱內(nèi)生孢子,微堿,有機化能,兼性厭氧;還原石蕊牛奶,迅速消化酪素而凝快少;無精氨酸雙水解酶,溶血作用可變,不產(chǎn)生卵磷脂酶,產(chǎn)生多肽抗菌素。產(chǎn)脂肪酶。產(chǎn)去乙酰頭孢菌素乙酰木聚糖酯酶(cephalosporin deacetylating acetyl xylan ester
參考用途:生產(chǎn)脂肪酶。
生物危害程度:四類
致病對象:無
培養(yǎng)基編號:CM0050
培養(yǎng)基名稱:營養(yǎng)肉汁加葡萄糖培養(yǎng)基(Nutrient Broth and Glucose Medium)
CM0050:蛋白胨 30.0g,葡萄糖 1.0g,牛肉膏 5.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15g,蒸餾水 1.0L,pH7.2。
培養(yǎng)溫度:30 ℃
需氧類型:好氧
用途:研究;生產(chǎn);生產(chǎn)脂肪酶。
注意事項:僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫為準)

二、儲存條件
凍干菌種和試管斜面請置于 2-8℃冷藏。西林瓶菌種請置于-20℃冷凍。甘油請置于-80℃

三、培養(yǎng)條件
1、培養(yǎng)基編號: 營養(yǎng)肉汁加葡萄糖培養(yǎng)基(Nutrient Broth and Glucose Medium)
2、培養(yǎng)基成分:蛋白胨 30.0g,葡萄糖 1.0g,牛肉膏 5.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15g,蒸餾水 1.0L,pH7.2。
3、需氧類型:好氧
4、培養(yǎng)溫度:30℃

四、注意事項
1、菌種常規(guī)培養(yǎng)時間:細菌 1-2 天,酵母 3 天,霉菌 5-7 天,大型真菌 7-10 天。
2、試管斜面菌種請盡快轉(zhuǎn)接,不建議長期存放。
3、初次使用時請按照本說明書推薦條件進行復(fù)活培養(yǎng),如使用其它類型培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件造成菌種不活等損失,我單位不負責(zé)任。
4、使用者應(yīng)保證菌種的安全存儲和操作,帶菌廢棄物應(yīng)高壓滅菌處理后丟棄。
5、菌種使用過程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降,應(yīng)及時和微生物菌種查詢網(wǎng)聯(lián)系或更換新的菌種。

五、打管說明書
1、安瓿瓶開封:用浸過 75%酒精的脫脂棉檫試凍干管表面進行消毒,將管頂端于酒精燈外焰上均勻加熱;立即滴 2-3 滴無菌水于加熱部位,使管壁破裂;再用鑷子或其他適宜工具敲下破裂處。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無菌吸管吸取 0.5ml 左右液體培養(yǎng)基(固體培養(yǎng)基去掉瓊脂即可)于凍干管中將凍干菌粉全部溶解。將溶解后的菌懸液轉(zhuǎn)移至盛有 4~5mL 液體培養(yǎng)基的試管中混勻,可將殘留在吸管中 1-2 滴菌懸液轉(zhuǎn)接至固體培養(yǎng)基上。將液體試管和斜面試管于推薦條件下靜置培養(yǎng)。以液體培養(yǎng)結(jié)果為準。
3、注意事項:菌種活化前,請將安瓿管保存在 2-8℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后處于休眠狀態(tài),延遲期較長,需要轉(zhuǎn)接至 2-3 代恢復(fù)活力。
4、復(fù)蘇后的菌種在傳 1-2 代后使用。
5、暫不啟開的安瓿管應(yīng)于 4℃中保藏(特殊除外)。
6、凍干管打開后需一次用完,不能留存。
7、打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護設(shè)備中進行,生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作,打管時凍干管應(yīng)遠離面部,保護眼睛。
8、打管操作應(yīng)在燒杯或托盤上方進行,用完凍干管應(yīng)滅菌處理后丟棄。
9、如若有菌種復(fù)蘇不活或者污染等情況,請在收到后 2 個月內(nèi)聯(lián)系,逾期不予受理。

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