耐鈾解支鏈淀粉芽胞桿菌是Pullulanibacillus屬的微生物,原產(chǎn)地為葡萄牙。主要用途為研究。
一、菌種簡(jiǎn)介
平臺(tái)編號(hào):Bio-57010
提供形式:凍干物
拉丁屬名:Pullulanibacillus Uraniitolerans
中文名稱:耐鈾解支鏈淀粉芽胞桿菌
拉丁名稱:Pullulanibacillus uraniitolerans
其它保藏中心編號(hào):=DSM 19429=LGM 24205
來源歷史:←DSMZ←M. da Costa, Univ. Coimbra, Portugal←S. Pereira;UG-2
收藏時(shí)間:2013/8/4
原始編號(hào):UG-2
原產(chǎn)國:葡萄牙
資源歸類編碼:15131300000
模式菌株:模式菌株
主要用途:研究
特征特性:耐酸。Genebank登錄號(hào);AM931441
生物危害程度:四類
培養(yǎng)基編號(hào):CM0437
培養(yǎng)基名稱:脂環(huán)酸芽孢桿菌培養(yǎng)基(Alicyclobacillus medium)
培養(yǎng)基成分:A溶液:CaCl2 2H2O 0.25g,MgSO4 7H2O 0.5g,(NH4)2SO4 0.2g,KH2PO4 3.0g,酵母膏 2.0g,葡萄糖 5.0g,蒸餾水 0.5(固體培養(yǎng)基)/1.0(液體培養(yǎng)基)L,pH4.0。B溶液:ZnSO4 7H2O 0.1g,MnCl2 4H2O 0.03g,H3BO3 0.3g,CoCl2 6H2O 0.2g,CuCl2 2H2O 0.01g,NiCl2 6H2O 0.02g,Na2MoO4 2H2O 0.03g,蒸餾水 1.0L。C溶液:瓊脂15.0g,蒸餾水 0.5L。[注] 以上溶液?jiǎn)为?dú)滅菌,A與1ml B溶液混合制成液體培養(yǎng)基,A,1ml B溶液,C混合制成固體培養(yǎng)基。
培養(yǎng)溫度:35℃
需氧類型:好氧
分離基物:鈾礦排出物
保存方法:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
共享方式:公益性共享;資源純交易性共享;合作研究共享;資源交換性共享
用途:研究;
注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn))
二、產(chǎn)品特點(diǎn)
1、菌種功能明確、品種穩(wěn)定、應(yīng)用效果顯著;
2、本品芽孢含量高,穩(wěn)定性好、耐高溫和擠壓;
3、繁殖能力快、定植能力強(qiáng)、易存活、耐受低pH值環(huán)境;
4、復(fù)活迅速,可在短期內(nèi)成為優(yōu)勢(shì)種群;
5、本品安全高效、無抗藥性、不污染環(huán)境;
6、對(duì)多數(shù)抗生素不敏感,可與低濃度抗革蘭氏陰性菌抗生素同時(shí)使用。
三、培養(yǎng)方法
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級(jí)種)、原種(二級(jí)種)和栽培種(三級(jí)種)三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對(duì)于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
1、稱量→溶化→調(diào)pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查
2、干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物
3、高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查
4、過濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌
五、保藏方法
1、傳代培養(yǎng)保藏法
又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧細(xì)菌用),培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。
2、液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當(dāng)延長保藏時(shí)間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進(jìn)入,以減弱代謝作用。
3、載體保藏法
是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進(jìn)行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。
4、寄主保藏法
用于目尚不能在人工培養(yǎng)基上生長的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動(dòng)物、昆蟲、雞胚內(nèi)感染并傳代,此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。
5、冷凍保藏法
可分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速凍結(jié)(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6、冷凍干燥保藏法
先使微生物在低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥)。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來制備細(xì)胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害。
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