三孢布拉氏霉，屬于毛霉目、笄霉科，拉丁名是Blakeslea trispora。三孢布拉氏霉菌絲體生長(zhǎng)迅速，能生長(zhǎng)成粗壯的長(zhǎng)菌絲，為長(zhǎng)管單細(xì)胞，無(wú)隔膜，具有多個(gè)細(xì)胞核，不能產(chǎn)生假根，為單細(xì)胞低等真菌。主要用于產(chǎn)β-胡蘿卜素。
一、菌種簡(jiǎn)介
平臺(tái)編號(hào)：Bio-103289
規(guī)格：凍干物
拉丁屬名： Blakeslea Trispora
菌種名稱：三孢布拉氏霉
拉丁文名：Blakeslea trispora
培養(yǎng)基編號(hào)：157
培養(yǎng)溫度：24-28℃
培養(yǎng)時(shí)間：7-9 天
其他編號(hào)：ATCC14059
用途：產(chǎn)β-胡蘿卜素
相關(guān)的培養(yǎng)基詳細(xì)信息如下：
培養(yǎng)基編號(hào)：157
名稱：ATCC Medium: 340 Rabbit Food Agar
可用于培養(yǎng)菌種：
備注：兔子飼料(顆粒) 25.0 g
瓊脂 15.0 g
蒸餾水 1000 ml
兔子飼料加水煮開，浸泡３０分鐘后，用沙布過(guò)濾后加瓊脂滅菌。
用途：產(chǎn)Β-胡蘿卜素 產(chǎn)Β-胡蘿卜素（一公一母）
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn)）
二、培養(yǎng)基
YpSs 培養(yǎng)基
酵母提取物 4.0g 可溶性淀粉 15.0 克 K2HPO4 1.0g
MgSO4.7H2O 0.5g 瓊脂 15.0g 蒸餾水 1.0L
三、保藏條件
斜面菌種和凍干菌種應(yīng)在 2-8°C 保存,西林瓶請(qǐng)置于-20°C 保存。請(qǐng)勿長(zhǎng)期置于室溫。
四、培養(yǎng)方法
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長(zhǎng)基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級(jí)種）、原種（二級(jí)種）和栽培種（三級(jí)種）三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過(guò)程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無(wú)菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長(zhǎng)時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對(duì)于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長(zhǎng)、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無(wú)機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無(wú)雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。
五、注意事項(xiàng)
1）凍干首次活化，干粉要全部用完，不能預(yù)留，用無(wú)菌吸管吸取 0.3ml 的培養(yǎng)液（即以上建議的培養(yǎng)基配方，不加瓊脂）或者無(wú)菌水，滴入凍干管中，輕輕振蕩至其溶解。吸取全部菌懸液，接種在培養(yǎng)基上（建議不超過(guò) 2 支斜面或平板）；經(jīng)過(guò)冷凍干燥保藏，菌種處于休眠狀態(tài)，復(fù)蘇培養(yǎng)時(shí)可能會(huì)延遲生長(zhǎng)，這時(shí)需較長(zhǎng)的培養(yǎng)時(shí)間；若您收到的是已復(fù)蘇的培養(yǎng)物（非凍干菌），則可以直接用于您的實(shí)驗(yàn)，或根據(jù)需要轉(zhuǎn)接培養(yǎng)；如有不明白之處，請(qǐng)務(wù)必先咨詢我單位技術(shù)人員，避免不必要的損失；
2）微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔干燥的地方，室溫放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致菌種衰退；
3）菌種操作應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行；轉(zhuǎn)種完畢，應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理；
4）應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時(shí)轉(zhuǎn)接，凍干菌種保藏時(shí)間通常為 2-25 年；
5）菌種使用過(guò)程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降，應(yīng)及時(shí)和微生物菌種查詢網(wǎng)聯(lián)系。
6）如若有菌種復(fù)蘇不活或者污染等情況，請(qǐng)?jiān)谑盏胶?2 個(gè)月內(nèi)聯(lián)系，逾期不予受理；
7）打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行，生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時(shí)凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部，保護(hù)眼睛。
8）西林瓶開封：用 75%酒精棉擦拭西林瓶外部，在安全柜內(nèi)使用尖嘴鉗去除塑料蓋及鋁蓋，注意不要同時(shí)打開膠塞。緩慢開啟膠塞，用 75%酒精棉消毒瓶口部分，使用無(wú)菌吸管注入0.5ml 適宜的液體培養(yǎng)基復(fù)溶凍干粉末。
9）安瓿瓶開封：用浸過(guò) 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開口處在火焰上過(guò)一遍，并保持在火焰旁操作。
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