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鹽桿菌屬的保藏條件與培養(yǎng)方法及注意事項(xiàng)!
小楊 / 2023-11-17 08:39:48


鹽桿菌屬,嗜鹽桿狀古細(xì)菌。革蘭氏陰性,嗜鹽桿狀古細(xì)菌。大小為0.6~1.0 μm×1~6 μm,單個(gè)或多形態(tài)(特別是在貧瘠的培養(yǎng)基中)。以二分分裂繁殖。

一、產(chǎn)品信息
平臺(tái)編號(hào):Bio-097375
規(guī)格:凍干物
拉丁屬名:Halobacterium Sp
菌株名稱:鹽桿菌屬
收藏時(shí)間:2012/7/26
原始編號(hào):NRC-1
原產(chǎn)國:中國
資源歸類編碼:15111111101
模式菌株:非模式菌株
主要用途:分類;研究;教學(xué)
特征特性:非模式菌株。在最適條件下生長時(shí),細(xì)胞呈桿狀,0/5-1/2μm×6/1μm。在老的液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基上生長時(shí),常出現(xiàn)多形性:彎曲和膨大的桿狀、棒錘形、球形,未發(fā)有休眠期,革蘭氏染色陰性,以叢生鞭毛運(yùn)動(dòng),細(xì)胞以縊縮分裂方式繁殖/大多數(shù)菌株嚴(yán)格好氧。
培養(yǎng)基編號(hào):HALO-2
培養(yǎng)溫度:37℃
注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn))

二、菌種簡介
單個(gè)或多形態(tài)(特別是在貧瘠的培養(yǎng)基中)。以二分分裂繁殖。極生叢毛運(yùn)動(dòng)或不運(yùn)動(dòng)。革蘭氏染色陰性。細(xì)胞壁主要由脂蛋白構(gòu)成,不含有胞壁酸和二氨基庚二酸。細(xì)胞莢膜含有約20%的類脂。有機(jī)營養(yǎng)型,專性需氧,呼吸代謝,從不發(fā)酵。在高濃度(12%以上)的NaCl溶液中才能生長,且保持桿狀。若NaCl濃度不足則呈多形態(tài),從氨基酸取得能源。菌體內(nèi)含類胡菌卜素,其主要色素為菌紅素,使菌落呈淡紫色到鮮紅色或朱紅色,菌落小于2 mm,圓形,凸起,完整,半透明。氧化酶和接觸酶陽性。通常不液化明膠。在30~50℃生長好;最適生長溫度范圍為35~40℃。pH的生長范圍5.5~8.0,最適pH為7.2~7.4。絕大多數(shù)菌株對(duì)多黏菌素敏感(300單位)。DNA中G+C的mol數(shù)為0.66~0.68或0.57~0.60。模式種為鹽制品鹽桿菌(H.salinarium),是飽和或近飽和的NaCl環(huán)境中的極端嗜鹽菌。主要存在于死海、鹽湖、鹽田及有鹽分的食品如鹽腌制品上。

三、保藏條件
安瓿瓶和斜面菌種在 2-8°C 保存。 

四、培養(yǎng)基
halo-2 培養(yǎng)基
NaCL 250.0g MgCl? ·6H? O 30.0g 酵母浸膏 2.0g
乳清蛋白水解物 2.50g 水 1000.0ml Adjust ph to 7.2-7.4

五、微生物菌種培養(yǎng)方法
1、孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 產(chǎn)品僅限用于科研霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
2、種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶兩級(jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱為四級(jí)發(fā)酵。

六、注意事項(xiàng)
1)凍干粉以 200ul-500ul 無菌水或者推薦培養(yǎng)基的液態(tài)溶解,最適接種量為 2 支斜面(18*180試管)或者 2 支 5ml 液體(請(qǐng)不要在平板上,更不要在錐形瓶中復(fù)蘇菌種)待菌種活化成功后才能擴(kuò)大培養(yǎng)。如有不明白之處,請(qǐng)務(wù)必先咨詢我單位技術(shù)人員,避免不必要的損失;
2)微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔干燥的地方,室溫放置時(shí)間過長會(huì)導(dǎo)致菌種衰退;
3)菌種操作應(yīng)在無菌條件下進(jìn)行;轉(zhuǎn)種完畢,應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理;
4)應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時(shí)轉(zhuǎn)接,凍干菌種保藏時(shí)間通常為 2-25 年;
5)請(qǐng)充分了解所購菌種的情況,尤其是該菌種的用途和生物安全信息,并且掌握必需的微生物操作技術(shù),已具備必要的設(shè)備條件;如若有菌種復(fù)蘇不活或者污染等情況,請(qǐng)?jiān)谑盏骄姾?2 個(gè)月內(nèi)聯(lián)系,逾期不予受理。

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