刺糖多孢菌是Saccharopolyspora屬的微生物,原產(chǎn)地為中國。非模式菌株。基內(nèi)菌絲在菌中央斷裂為不規(guī)則桿狀體,氣生菌絲上有圈環(huán)狀或松散螺旋形的短孢子鏈,用于土壤微生物資源調(diào)查及分類學(xué)研究。主要用途為分類;教學(xué),具體用途為土壤微生物資源調(diào)查及分類學(xué)研究。
一、菌種簡介
平臺編號:Bio-136770
規(guī)格:凍干粉
拉丁屬名:Saccharopolyspora Spinosa
中文名稱:刺糖多孢菌
屬名:Saccharopolyspora
種名或亞種名:spinosa
來源歷史:四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院
收藏時間:1998-11-10
原始編號:980332
原產(chǎn)國:中國
模式菌株:非模式菌株
主要用途:分類;研究;教學(xué)
特征特性:非模式菌株?;鶅?nèi)菌絲在菌中央斷裂為不規(guī)則桿狀體,氣生菌絲上有圈環(huán)狀或松散螺旋形的短孢子鏈,用于土壤微生物資源調(diào)查及分類學(xué)研究。
具體用途:土壤微生物資源調(diào)查及分類學(xué)研究
生物安全等級:四類
致病對象:無
致病名稱:傳播途徑與感染方式
分離基物:土壤
采集地區(qū):云南昆明
培養(yǎng)基編號:0039
培養(yǎng)溫度:28℃
用途:土壤微生物資源調(diào)查及分類學(xué)研究土壤
注意事項:僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫為準)
二、培養(yǎng)方法
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、產(chǎn)品僅用于科研挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)4天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至0%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在0%~20%。
三、實驗內(nèi)容
1、稱量→溶化→調(diào)pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查
2、干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物
3、高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查
4、過濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌
四、保藏方法
1、斜面低溫保藏法
產(chǎn)品僅用于科研將菌種接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上,待菌種生長*后,置于4℃左右的冰箱中保藏,每隔一定時間(保藏期)再轉(zhuǎn)接至新的斜面培養(yǎng)基上,生長后繼續(xù)保藏,如此連續(xù)不斷。此法簡便易行,容易推廣,存活率高,故科研和生產(chǎn)上對經(jīng)常使用的菌種大多采用這種保藏方法。
2、石蠟油封藏法
此法是在無菌條件下,將滅過菌并已蒸發(fā)掉水分的液體石蠟倒入培養(yǎng)成熟的菌種斜面(或半固體穿刺培養(yǎng)物)上,石蠟油層高出斜面頂端lcm,使培養(yǎng)物與空氣隔絕,加膠塞并用固體石蠟封口后,垂直放在室溫或4℃冰箱內(nèi)保藏。由于液體石蠟阻隔了空氣,使菌體處于缺氧狀態(tài)下,而且又防止了水分揮發(fā),使培養(yǎng)物不會干裂,因而能使保藏期達~2年,或更長。但此法不適合厭氧性細菌。
3、砂土管保藏法
適用于產(chǎn)孢子的放線菌、霉菌及形成芽孢的細菌,對于一些對干燥敏感的細菌如奈氏球菌、弧菌和假單胞桿菌及酵母則不適用。砂土管法兼具低溫、干燥、隔氧和無營養(yǎng)物等諸條件,故保藏期較長、效果較好,且微生物移接方便,經(jīng)濟簡便。它比石蠟油封藏法的保藏期長,約~0年。
4、麩皮保藏法
此法以麩皮作為載體,吸附接入的孢子,然后在低溫干燥條件下保存。適用于產(chǎn)孢子的霉菌和某些放線菌,保藏期在年以上。因操作簡單,經(jīng)濟實惠,工廠較多采用。
5、冷凍真空干燥保藏法
簡稱凍干法,通常采用保護劑制備擬保藏菌種的細胞懸液或孢子懸液于安瓿管中,再在低溫下快速將含菌樣凍結(jié),并減壓抽真空,使水升華將樣品脫水干燥,形成*干燥的固體菌塊。并在真空條件下立即融封,造成無氧真空環(huán)境,置于低溫下,使微生物處于休眠狀態(tài),而得以保藏。常用的保護劑有脫脂牛奶、血清、淀粉、葡聚糖等高分子物質(zhì)。
6、液氮超低溫保藏法
以甘油、二甲基亞砜等作為保護劑,在液氮超低溫(-96℃)下保藏。其主要原理是菌種細胞從常溫過渡到低溫,并在降到低溫之前,使細胞內(nèi)的自由水通過細胞膜外滲出來,以免膜內(nèi)因自由水凝結(jié)成冰晶而使細胞損傷。此法操作簡便、高效、保藏期一般可達到5年以上,是目前被公認的效的菌種保藏技術(shù)之一。
五、注意事項
1、菌種常規(guī)培養(yǎng)時間:細菌 1-2 天,酵母 3 天,霉菌 5-7 天,大型真菌 7-10 天。
2、菌種恢復(fù)培養(yǎng)前,建議將收到的菌種安瓿保存在 6-10°C 的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后處于休眠狀態(tài),延遲期較長,如在說明建議的培養(yǎng)時間還未長起來,請繼續(xù)在相應(yīng)的環(huán)境下多培養(yǎng) 24 小時或者更長時間,直至菌種培養(yǎng)完成,有的菌種需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長,一般來說菌種培養(yǎng)穩(wěn)定后才能用于您的后續(xù)實驗。
3、初次使用時請嚴格按照本說明書推薦條件和操作步驟進行復(fù)活培養(yǎng),如使用其它類型培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件造成菌種不活等損失,我單位不負責任。
4、恢復(fù)培養(yǎng)厭氧菌時,在操作過程中應(yīng)嚴格控制厭氧條件:制作培養(yǎng)基時,應(yīng)使用厭氧螺口試管,并利用高純氮氣去除試管和培養(yǎng)基中的氧氣,使用者應(yīng)保證菌種的安全存儲和操作,帶菌廢棄物應(yīng)高壓滅菌處理后丟棄。
5、與菌種相關(guān)的其它信息請參閱微生物菌種查詢網(wǎng)網(wǎng)站(www.family998.com)。
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