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SNU668人胃癌細(xì)胞的培養(yǎng)與檢測(cè)及注意事項(xiàng)!
小楊 / 2023-12-07 09:39:31


一、細(xì)胞簡(jiǎn)介
平臺(tái)編號(hào):Bio-129530
規(guī)格:1×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞信息:SNU668
細(xì)胞名稱:SNU668人胃癌細(xì)胞
別名:SNU668; NCI-SNU-668
規(guī)格:T25
形態(tài)特征:上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性:貼壁
疾病:胃印戒細(xì)胞腺癌
培養(yǎng)條件:RPMI-1640 10%胎牛血清
基礎(chǔ)培養(yǎng)基:DMEM
血清:南美級(jí)別胎牛血清 配套完全培養(yǎng)基
傳代比例:1:2-1:4傳代(培養(yǎng)面積比)
傳代方式:消化2-3分鐘
換液頻率:2~3天換液1次
凍存液配方:RPMI 1640+10%FBS+10%DMSO
難度等級(jí):+
培養(yǎng)要點(diǎn):暫無(wú)
特征特性:該細(xì)胞源于一位63歲的黃種人男性患者。是低分化印戒細(xì)胞癌。
用途:細(xì)胞系
注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn))

二、培養(yǎng)方式
1、培養(yǎng)基:SNU668 專用培養(yǎng)基【PRMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%】
2、培養(yǎng)環(huán)境:37℃、5%CO2
3、傳代培養(yǎng):當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到 80%以上時(shí),可以進(jìn)行傳代,傳代比例 1:2~1:4,1~2 天傳代一次。
(1)用巴氏滴管吸出細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基;
(2)加入 1ml 的 PBS,輕輕晃動(dòng)潤(rùn)洗細(xì)胞,然后將 PBS 吸出;
(3)加入 1ml 的胰酶,輕輕晃動(dòng)浸潤(rùn)細(xì)胞,然后放在培養(yǎng)箱內(nèi)消化 1~3 分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間);
(4)在顯微鏡下觀察,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞變圓,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞便開始脫落,這時(shí)可以終止消化;
(5)加入 4ml 含血清的完全培養(yǎng)基,用移液器吹打細(xì)胞,使細(xì)胞脫落并形成單細(xì)胞懸液;
(6)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到 15ml 的離心管,1000rpm 離心 5min;
(7)離心完成后吸出上清丟棄,再用移液管取 10ml 完全培養(yǎng)基將細(xì)胞重懸,輕輕吹打混勻;
(8)將細(xì)胞懸液分裝到兩個(gè)新的 T25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶中,放在 37℃的 CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
4、細(xì)胞凍存:使用本公司無(wú)血清凍存液可直接將細(xì)胞凍存在-80℃(無(wú)需使用程序降溫盒),細(xì)胞在-80℃可保存 3 年,長(zhǎng)期保存建議使用液氮罐。
5、冷凍復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入 5mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 5 分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 4-6mL 完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入 6cm 皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

三、質(zhì)量檢測(cè)
1、STR 鑒定:正確
2、細(xì)菌檢測(cè):陰性
3、支原體檢測(cè):陰性

四、售后服務(wù)
1、收到細(xì)胞后請(qǐng)及時(shí)查看瓶身有無(wú)破損,是否漏液等現(xiàn)象;
2、用 75%的酒精噴灑培養(yǎng)瓶之后,放在培養(yǎng)箱中靜置 2-4 小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后用顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)并拍照記錄,40 倍和 100 倍照片各一張(細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中存在少量的漂浮或者死亡屬于正?,F(xiàn)象);
3、原瓶中的培養(yǎng)基在細(xì)胞傳代之后不建議繼續(xù)使用,請(qǐng)配制新的完全培養(yǎng)基或者購(gòu)買本公司的專用培養(yǎng)基;
4、建議定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行拍照記錄;收到細(xì)胞后 7 天內(nèi),對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)有任何問(wèn)題,可申請(qǐng)售后。
5、強(qiáng)烈建議:在第一次細(xì)胞傳代時(shí),使用附贈(zèng)或者購(gòu)買本公司配置的細(xì)胞培養(yǎng)瓶將細(xì)胞按照 1:2 進(jìn)行傳代,可以對(duì)比測(cè)試自配的培養(yǎng)基是否可以養(yǎng)好細(xì)胞。如果有以上任何問(wèn)題,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系本公司。

五、注意事項(xiàng)
1、本產(chǎn)品僅限于科研用途,若用于臨床診斷、治療等其它用途,本公司概不負(fù)責(zé)!
2、若使用本產(chǎn)品發(fā)表科學(xué)論文,請(qǐng)標(biāo)注:SNU668 由北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司(BIOBW)提供。

北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司的微生物菌種查詢網(wǎng)提供微生物菌種保藏、測(cè)序、購(gòu)買等服務(wù),是中國(guó)微生物菌種保藏中心的服務(wù)平臺(tái),并且是集微生物菌種、菌種,ATCC菌種、細(xì)胞、培養(yǎng)基為一體的大型微生物查詢類網(wǎng)站,自設(shè)設(shè)備及技術(shù)的微生物菌種保藏中心!歡迎廣大客戶來(lái)詢!

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