ATCC 29337玫瑰小單孢菌的培養(yǎng)方法與注意事項(xiàng)！
小楊 / 2024-01-11 09:28:34
玫瑰小單孢菌，表面凸起帶不規(guī)則環(huán)，邊緣不整齊。無氣絲?；z纖細(xì)。孢子柄有分枝，每個(gè)分枝頂端帶一個(gè)孢子，密集成叢。孢子球形、橢圓形，0.71×1.43微米，表面帶輪齒狀疣，主要用于研究，教學(xué)。
一、菌種簡(jiǎn)介
規(guī)格：凍干/培養(yǎng)物
拉丁屬名：Micromonospora Rosaria
用途：JCM原裝進(jìn)口
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn)）
二、詳細(xì)描述
Micromonospora rosaria Horan and Brodsky 1986
Taxonomy in NCBI database: Bacteria; Actinobacteria; Actinobacteria; Micromonosporales; Micromonosporaceae.
3159T <-- KCC A-0159 <-- Tanabe Seiyaku Co., Ltd., Japan; MCRL 0778 <-- NRRL 3718 <-- Schering Corp.; SCC 957 (=67694).
Accessioned in 1983.
=
ATCC 29337 =ATCC 55708 =BCRC 12625 =DSM 803 =HUT 6589 =IFM 1288 =IFO 13697 =IMSNU 21301 =IMSNU 22070 =KCTC 9553 =MTCC 1052 =NBRC 13697 =NCIMB 12896 =NRRL 3718.
Type strain [2289].
Medium: 104; Temperature: 28°C; Rehydration fluid: 656.
Source: Soil, San Jacinto, TX, USA [821].
Biochemistry/Physiology: [821,2289].
Numerical taxonomy: [2867].
Cell wall: meso- & 3OH-A2pm, Gly; N-glycolyl Mur; Xyl, Ara, Gal [993,2289].
Quinone: MK-10(H4) [916].
G+C (mol%): 75 [2289], 72.9 (HPLC) [5900], 73.4 (genome sequence) [12227].
DNA-DNA relatedness: [4682].
Phylogeny: 16S rRNA gene (X92631) [4119], gyrB (AB014163) [4682].
Genome sequence: LRQV00000000.
Production: Rosaramicin (rosamicin) [821,2289].
NCBI Taxonomy ID: 47874.
Publication(s) using this strain [B04003, B05135]. Related information on delivery / use of the strainBiosafety level 1
Terms and conditions Not imposed
Export control (1) No
Distribution control in Japan (2) No
Genetically modified microorganism No
Technical information -
(1) in complying with the Foreign Exchange and Foreign Trade Control Law of Japan
(2) in complying with the Plant Protection Law of Japan
三、培養(yǎng)方法
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長(zhǎng)基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級(jí)種）、原種（二級(jí)種）和栽培種（三級(jí)種）三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長(zhǎng)時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對(duì)于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長(zhǎng)、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。
四、保藏條件
安瓿瓶?jī)龈删N和培養(yǎng)物應(yīng)在 2-8°C 保存。西林瓶菌種請(qǐng)置于-20℃冷凍。甘油保藏溫度為-80°C;請(qǐng)勿長(zhǎng)期置于室溫。
五、注意事項(xiàng)
1）凍干粉首次活化，干粉要全部用完，不能預(yù)留，用無菌吸管吸取 0.3ml 的培養(yǎng)液（即以上建議的培養(yǎng)基配方，不加瓊脂）或者無菌水，滴入凍干管中，輕輕振蕩至其溶解。吸取全部菌懸液，接種在培養(yǎng)基上（建議不超過 2 支平板或者斜面，若接種液體培養(yǎng)基，則試管液體不超過 5ml 為宜）；
2）經(jīng)過冷凍干燥保藏，菌種處于休眠狀態(tài)，復(fù)蘇培養(yǎng)時(shí)可能會(huì)延遲生長(zhǎng)，這時(shí)需較長(zhǎng)的培養(yǎng)時(shí)間； 若您收到的是已復(fù)蘇的培養(yǎng)物（非凍干菌），則可以直接用于您的實(shí)驗(yàn)，或根據(jù)需要轉(zhuǎn)接培養(yǎng)如有不明白之處，請(qǐng)務(wù)必先咨詢我單位技術(shù)人員，避免不必要的損失；
3）微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔干燥的地方，室溫放置時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致菌種衰退；
4）菌種操作應(yīng)在無菌條件下進(jìn)行；轉(zhuǎn)種完畢，應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理；
5）應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時(shí)轉(zhuǎn)接，凍干菌種保藏時(shí)間通常為 2-25 年；
6）菌種使用過程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降或不活，請(qǐng)?jiān)谑盏胶?2 個(gè)月內(nèi)和
微生物菌種查詢網(wǎng)聯(lián)系，逾期不予受理；
7）打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行，生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時(shí)凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部，保護(hù)眼睛。
8）安瓿瓶開封：用浸過 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開口處在火焰上過一遍，并保持在火焰旁操作。
9）甘油管使用：使用本甘油菌時(shí)可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或進(jìn)行液體培養(yǎng)即可。也可以完全融解后使用，但隨著凍融次數(shù)的增加，細(xì)菌的活力會(huì)逐漸下降。
微生物菌種查詢網(wǎng)作為中國微生物菌種中心引航者，單位代為引進(jìn)美國ATCC微生物菌種保藏中心，德國DSMZ菌種保藏中心，荷蘭CBS菌種保藏中心，日本JCM微生物菌種保藏中心，包括其中的ATCC微生物細(xì)菌與噬菌體（18382）；細(xì)胞系和雜交瘤（4997）；真菌和酵母（58183）；原代細(xì)胞（146）；原生動(dòng)物和藻類（2428）；干細(xì)胞（102）；載體，克隆與分子（18006）；病毒（3594）；核酸 - DNA / RNA（1350），引進(jìn)進(jìn)口微生物菌種貨期短，質(zhì)量保證，UPS國際快遞運(yùn)輸。
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