球孢鏈霉菌的知識(shí)概述及實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與操作流程！
小楊 / 2024-01-30 09:27:36
一、菌種簡(jiǎn)介
規(guī)格：凍干物
拉丁屬名：Streptomyces Globisporus(Krassilnikov) Waksman
拉丁名稱：Streptomyces globisporus(Krassilnikov) Waksman
來(lái)源歷史：CGMCC
收藏時(shí)間：2020-09-16 00:00:00.0
原始編號(hào)：69.0
原產(chǎn)國(guó)：中國(guó)
模式菌株：否
主要用途：產(chǎn)異放線菌酮
生物安全級(jí)別：一級(jí)
其它保藏中心編號(hào)：CGMCC4.744
培養(yǎng)基編號(hào)： 12
培養(yǎng)溫度：28℃
培養(yǎng)時(shí)間：3-5d
需氧類型：好氧
保存方法：冷凍干燥管保藏
用途：研究
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn)）
二、知識(shí)概述
高氏合成1號(hào)瓊脂：氣絲粉狀，秸草色或微綠黃色。基絲無(wú)色。無(wú)可溶色素。高氏有機(jī)2號(hào)瓊脂：氣絲不多，粉狀，乳脂色，罕綠黃色?；z無(wú)色或微黃色?？扇苌芈晕ⅫS色。馬鈴薯塊：氣絲豐茂，綠黃色?；z好，無(wú)色或微褐色?？扇苌?zé)o或略微褐色。明膠液化相當(dāng)快，無(wú)色素。牛奶7—14天胨化，無(wú)或淺黃色素。淀粉水解弱。纖維素上大部分不生長(zhǎng)。硝酸鹽還原。抑制革蘭氏陽(yáng)性和陰性細(xì)菌、酵母、絲狀真菌。少數(shù)菌株只抑制革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌。
三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
1、稱量→溶化→調(diào)pH→過(guò)濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無(wú)菌檢查
2、干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物
3、高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無(wú)菌檢查
4、過(guò)濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無(wú)菌檢查→清洗滅菌
四、操作流程
菌株復(fù)蘇:(按三區(qū)劃線法將留菌管內(nèi)的原始菌株進(jìn)行復(fù)蘇)
1)所有菌株,顯色培養(yǎng)基分4區(qū),每區(qū)一株,標(biāo)明菌株號(hào)、菌種名常用縮寫如下:
cal: 白念珠菌 cgl:光滑念珠菌 cpa: 近平滑念珠菌 ctr: 熱帶念珠菌 ckr: 克柔念珠菌 cne: 新型隱球菌,其他菌種標(biāo)記全名
2)隱球菌除傳顯色培養(yǎng)基以外,另傳1/2塊血平皿上述菌株統(tǒng)一37oC孵育48h
菌種鑒定:(48h后觀察結(jié)果)
五、保藏方法
1、傳代培養(yǎng)保藏法
又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧細(xì)菌用),培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。
2、液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進(jìn)入,以減弱代謝作用。
3、載體保藏法
是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進(jìn)行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。
4、寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動(dòng)物、昆蟲、雞胚內(nèi)感染并傳代,此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。
5、冷凍保藏法
可分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速凍結(jié)(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6、冷凍干燥保藏法
先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥)。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來(lái)制備細(xì)胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害。保護(hù)性溶質(zhì)可通過(guò)氫和離子鍵對(duì)水和細(xì)胞所產(chǎn)生的親和力來(lái)穩(wěn)定細(xì)胞成分的構(gòu)型。保護(hù)劑有牛乳、血清、糖類、甘油、二甲亞砜等。
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