胞外多聚物鞘氨醇單胞菌的培養(yǎng)條件與打管說明！
小楊 / 2024-03-16 09:57:53
胞外多聚物鞘氨醇單胞菌是Sphingomonas屬的微生物，原產(chǎn)地為中國。革蘭氏陰性、無芽孢的直桿狀。單極毛運(yùn)動(dòng)。接觸酶陽性、菌落為黃色，但不是黃單胞菌素。專性需氧。主要用途為分類學(xué)研究，具體用途為模式菌株。
一、菌種簡介
規(guī)格：凍干物
拉丁屬名：Sphingomonas Sanxanigenens
拉丁名稱：Sphingomonas sanxanigenens
來源歷史：←國內(nèi)收集
收藏時(shí)間：1998/11/13
原始編號(hào)：NY981114
資源歸類編碼：15131139103
模式菌株：非模式菌株
主要用途：研究；生產(chǎn)
特征特性：菌體呈球狀至桿狀，單個(gè)、成對(duì)或呈短鏈狀排列，革蘭氏陰性。
具體用途：生產(chǎn)黃原膠。
生物危害程度：四類
培養(yǎng)基編號(hào)：CM0002
培養(yǎng)基名稱：營養(yǎng)肉汁瓊脂
培養(yǎng)基成分：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。
培養(yǎng)溫度：30℃
需氧類型：好氧
保存方法：真空冷凍干燥法
共享方式：公益性共享；資源純交易性共享；合作研究共享；資源交換性共享
用途：研究；生產(chǎn)；生產(chǎn)黃原膠。
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn)）
二、儲(chǔ)存條件
凍干菌種和試管斜面請(qǐng)置于 2-8℃冷藏。西林瓶菌種請(qǐng)置于-20℃冷凍。甘油請(qǐng)置于-80℃
三、培養(yǎng)條件
1、培養(yǎng)基編號(hào)：營養(yǎng)肉湯瓊脂（Nutrient Agar）
2、培養(yǎng)基成分： 蛋白胨 5.0 g牛肉浸粉 3.0 g NaCl 5.0 g 瓊脂 15.0 g 蒸餾水 1000.0 mL pH 7.0培養(yǎng)芽胞桿菌時(shí)加入 5 mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽胞。以上成分 121℃，滅菌 15 min。液體培養(yǎng)基不添加瓊脂。推薦使用成品培養(yǎng)基。
3、需氧類型：好氧
4、培養(yǎng)溫度：30 ℃
四、注意事項(xiàng)
1、菌種常規(guī)培養(yǎng)時(shí)間：細(xì)菌 1-2 天，酵母 3 天，霉菌 5-7 天，大型真菌 7-10 天。
2、試管斜面菌種請(qǐng)盡快轉(zhuǎn)接，不建議長期存放。
3、初次使用時(shí)請(qǐng)按照本說明書推薦條件進(jìn)行復(fù)活培養(yǎng)，如使用其它類型培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件造成菌種不活等損失，我單位不負(fù)責(zé)任。
4、使用者應(yīng)保證菌種的安全存儲(chǔ)和操作，帶菌廢棄物應(yīng)高壓滅菌處理后丟棄。
5、菌種使用過程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降，應(yīng)及時(shí)和
微生物菌種查詢網(wǎng)聯(lián)系或更換新的菌種。
五、打管說明書
1、安瓿瓶開封：用浸過 75％酒精的脫脂棉檫試凍干管表面進(jìn)行消毒，將管頂端于酒精燈外焰上均勻加熱；立即滴 2-3 滴無菌水于加熱部位，使管壁破裂；再用鑷子或其他適宜工具敲下破裂處。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng)：用無菌吸管吸取 0.5ml 左右液體培養(yǎng)基(固體培養(yǎng)基去掉瓊脂即可)于凍干管中將凍干菌粉全部溶解。將溶解后的菌懸液轉(zhuǎn)移至盛有 4~5mL 液體培養(yǎng)基的試管中混勻，可將殘留在吸管中 1-2 滴菌懸液轉(zhuǎn)接至固體培養(yǎng)基上。將液體試管和斜面試管于推薦條件下靜置培養(yǎng)。以液體培養(yǎng)結(jié)果為準(zhǔn)。
3、注意事項(xiàng)：菌種活化前，請(qǐng)將安瓿管保存在 2-8℃的環(huán)境下，某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后處于休眠狀態(tài)，延遲期較長，需要轉(zhuǎn)接至 2-3 代恢復(fù)活力。
4、復(fù)蘇后的菌種在傳 1-2 代后使用。
5、暫不啟開的安瓿管應(yīng)于 4℃中保藏（特殊除外）。
6、凍干管打開后需一次用完，不能留存。
7、打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行，生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時(shí)凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部，保護(hù)眼睛。
8、打管操作應(yīng)在燒杯或托盤上方進(jìn)行，用完凍干管應(yīng)滅菌處理后丟棄。
9、如若有菌種復(fù)蘇不活或者污染等情況，請(qǐng)?jiān)谑盏胶?2 個(gè)月內(nèi)聯(lián)系，逾期不予受理。
10、甘油管使用：使用本甘油菌時(shí)可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或進(jìn)行液體培養(yǎng)即可。也可以完全融解后使用，但隨著凍融次數(shù)的增加，細(xì)菌的活力會(huì)逐漸下降。
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