維斯假絲酵母的保藏條件與注意事項(xiàng)及打管說(shuō)明！
小楊 / 2024-03-19 09:37:38
維斯假絲酵母是Candida屬的微生物，原產(chǎn)地為中國(guó)。MEA培養(yǎng)基，28℃，培養(yǎng)72 h，菌落奶油狀，乳白色，表面具有皺褶，邊緣不整齊；細(xì)胞橢圓形，芽殖，有假菌絲和真菌絲。主要用途為研究，具體用途為具有酯酶活性。線粒體基因組測(cè)序菌株。
一、菌種簡(jiǎn)介
規(guī)格：甘油/培養(yǎng)物
拉丁屬名：Candida Viswanathii
拉丁名稱：Candida viswanathii
原產(chǎn)國(guó)：美國(guó)
主要用途：由 ATCC20913獲得。產(chǎn)二羧酸、產(chǎn)有機(jī)酸。不能利用十二烷或月桂酸甲酯為唯一碳源生長(zhǎng)
培養(yǎng)基編號(hào)：144
原始編號(hào)：H5343
培養(yǎng)溫度(℃)：25-28℃
培養(yǎng)時(shí)間(天)：2天
來(lái)源歷史/保藏單位：ATCC
需氧類型：好氧
生物安全級(jí)別：一級(jí)
收藏時(shí)間：2009-08-01
模式菌株：否
用途：由 ATCC20913獲得。產(chǎn)二羧酸。不能利用十二烷或月桂酸甲酯為唯一碳源生長(zhǎng)
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn)）
二、培養(yǎng)基
*麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基
*YM 培養(yǎng)基（酵母粉 3.0 g ； 麥芽提取物 3.0 g ；葡萄糖 10.0 g ；蛋白胨 5.0 g； 瓊脂 20.0 g；蒸餾水 1000 ml ；pH 6.2 +/- 0.2 ）
三、保藏條件
斜面菌種和凍干菌種應(yīng)在 2-8°C 保存。西林瓶請(qǐng)放-20°C 保存。甘油請(qǐng)置于-80°C。
四、注意事項(xiàng)
1）凍干粉首次活化，干粉要全部用完，不能預(yù)留，用無(wú)菌吸管吸取 0.3ml 的培養(yǎng)液（即以上建議的培養(yǎng)基配方，不加瓊脂）或者無(wú)菌水，滴入凍干管中，輕輕振蕩至其溶解。吸取全部菌懸液，接種在培養(yǎng)基上（建議不超過(guò) 2 支平板或者斜面）；
2）經(jīng)過(guò)冷凍干燥保藏，菌種處于休眠狀態(tài)，復(fù)蘇培養(yǎng)時(shí)可能會(huì)延遲生長(zhǎng)，這時(shí)需較長(zhǎng)的培養(yǎng)時(shí)間； 若您收到的是已復(fù)蘇的培養(yǎng)物（非凍干菌），則可以直接用于您的實(shí)驗(yàn)，或根據(jù)需要轉(zhuǎn)接培養(yǎng)如有不明白之處，請(qǐng)務(wù)必先咨詢我單位技術(shù)人員，避免不必要的損失；
3）微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔干燥的地方，室溫放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致菌種衰退；
4）菌種操作應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行；轉(zhuǎn)種完畢，應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理；
5）應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時(shí)轉(zhuǎn)接，凍干菌種保藏時(shí)間通常為 2-25 年；
6）菌種使用過(guò)程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降，應(yīng)及時(shí)和
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7）如若有菌種復(fù)蘇不活或者污染等情況，請(qǐng)?jiān)谑盏骄N后 2 個(gè)月內(nèi)聯(lián)系，逾期不予受理；
8）打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行，生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時(shí)凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部，保護(hù)眼睛。
9）安瓿瓶開封：用浸過(guò) 75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量（2-3滴）無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開口處在火焰上過(guò)一遍，并保持在火焰旁操作。
10）甘油管使用：使用本甘油菌時(shí)可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或進(jìn)行液體培養(yǎng)即可。也可以完全融解后使用，但隨著凍融次數(shù)的增加，細(xì)菌的活力會(huì)逐漸下降。
五、凍干管打管說(shuō)明書
1、安瓿瓶開封：用浸過(guò) 75％酒精的脫脂棉檫試凍干管表面進(jìn)行消毒，將管頂端于酒精燈外焰上均勻加熱；立即滴 2-3 滴無(wú)菌水于加熱部位，使管壁破裂；再用鑷子或其他適宜工具敲下破裂處。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng)：用無(wú)菌吸管吸取 0.5ml 左右液體培養(yǎng)基(固體培養(yǎng)基去掉瓊脂即可)于凍干管中將凍干菌粉全部溶解。將溶解后的菌懸液轉(zhuǎn)移至盛有 4~5mL 液體培養(yǎng)基的試管中混勻，可將殘留在吸管中 1-2 滴菌懸液轉(zhuǎn)接至固體培養(yǎng)基上。將液體試管和斜面試管于推薦條件下靜置培養(yǎng)。以液體培養(yǎng)結(jié)果為準(zhǔn)。
3、注意事項(xiàng)：菌種活化前，請(qǐng)將安瓿管保存在 2-8℃的環(huán)境下，某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后處于休眠狀態(tài)，延遲期較長(zhǎng)，需要轉(zhuǎn)接至 2-3 代恢復(fù)活力。
4、復(fù)蘇后的菌種在傳 1-2 代后使用。
5、暫不啟開的安瓿管應(yīng)于 4℃中保藏（特殊除外）。
6、凍干管打開后需一次用完，不能留存。
7、打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行，生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作，打管時(shí)凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部，保護(hù)眼睛。
8、打管操作應(yīng)在燒杯或托盤上方進(jìn)行，用完凍干管應(yīng)滅菌處理后丟棄。
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