一、目的要求
了解合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基的配制原理。
學(xué)習(xí)和掌握麥芽汁培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基、豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基和察氏培養(yǎng)基的配制方法。
二、基本原理
麥芽汁培養(yǎng)基和馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基被廣泛用于培養(yǎng)酵母菌和霉菌。馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基有時(shí)也可用于培養(yǎng)放線菌。豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基也是培養(yǎng)酵母菌及霉菌的一種優(yōu)良培養(yǎng)基。察氏培養(yǎng)基主要用于培養(yǎng)霉菌觀察形態(tài)用。麥芽汁培養(yǎng)基為天然培養(yǎng)基，馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基和豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基二者均為半合成培養(yǎng)基，而察氏培養(yǎng)基則為合成培養(yǎng)基。培養(yǎng)基配方中出現(xiàn)的自然pH系指培養(yǎng)基不經(jīng)酸、堿調(diào)節(jié)而自然呈現(xiàn)的pH。
三、實(shí)驗(yàn)材料
(一)藥品
葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HP04、KCl、MgSO4·7H2O，F(xiàn)eS04、瓊脂。
(二)儀器
天平、高壓蒸汽滅菌鍋。
(三)玻璃器皿
移液管、試管、錐形瓶、燒杯、量筒、培養(yǎng)皿、玻璃漏斗等。
(四)其他物品
藥匙、pH試紙、稱量紙、記號(hào)筆、棉花、紗布、線繩、塑料試管蓋、牛皮紙、報(bào)紙、新鮮麥芽汁、黃豆芽、馬鈴薯等。
四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
(一)麥芽汁培養(yǎng)基的配制
1．培養(yǎng)基成分
新鮮麥芽汁一般為10-15波林。
2．配制方法
(1)用水將大麥或小麥洗凈，用水浸泡6-12h，置于15℃陰涼處發(fā)芽，上蓋紗布，每日早、中、晚淋水一次，待麥芽伸長(zhǎng)至麥粒的兩倍時(shí)，讓其停止發(fā)芽，曬干或烘干，研磨成麥芽粉，貯存?zhèn)溆谩?nbsp;
(2)取一份麥芽粉加四份水，在65℃水浴鍋中保溫3-4h，使其自行糖化，直至糖化完全(檢查方法是取0.5ml的糖化液，加2滴碘液，如無(wú)藍(lán)色出現(xiàn)，即表示糖化完全)。
(3) 糖化液用4-6層紗布過(guò)濾，濾液如仍混濁，可用雞蛋清澄清(用一個(gè)雞蛋清，加水20 m1，調(diào)勻至生泡沫，倒入糖化液中，攪拌煮沸，再過(guò)濾)。
(4)用波美比重計(jì)檢測(cè)糖化液中糖濃度，將濾液用水稀釋到10-15波林，調(diào)pH至6．4。如當(dāng)?shù)赜衅【茝S，可用未經(jīng)發(fā)酵，未加酒花的新鮮麥芽汁，加水稀釋到10-15波林后使用。
(5)如配固體麥芽汁培養(yǎng)基時(shí)，加入2％瓊脂，加熱融化，補(bǔ)充失水。
(6)分裝、加塞、包扎。
(7)高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。
（二)馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的配制
1、培養(yǎng)基成分
馬鈴薯 20g
葡萄糖 2 g
瓊脂 1.5-2g
水 100ml
自然pH
2．配制方法
(1)配制20％馬鈴薯浸汁 取去皮馬鈴薯200g，切成小塊，加水1000m1。80℃浸泡lh，用紗布過(guò)濾，然后補(bǔ)足失水至所需體積。100 Pa滅菌20 min。即成20％馬鈴薯浸汁，貯存?zhèn)溆谩?nbsp;
（2)配制時(shí)，按每100 m1馬鈴薯浸汁加入2g葡萄糖，加熱煮沸后加入2g瓊脂，繼續(xù)加熱融化并補(bǔ)足失水。
(3)分裝、加塞、包扎。
(4)高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。
(三)豆芽汁葡萄糟培養(yǎng)基的配制
1．培養(yǎng)基成分
黃豆芽 10g
葡萄糖 5g
瓊脂 1.5-2g
水 100ml
自然pH
2．配制方法
(1)稱新鮮黃豆芽10g，置于燒杯中，再加入100 m1水，小火煮沸30 min，用紗布過(guò)濾，補(bǔ)足失水，即制成10％豆芽汁。
（2)配制時(shí)，按每100 m1 10％豆芽汁加入5g葡萄糖，煮沸后加入2 g瓊脂，繼續(xù)加熱融化，補(bǔ)足失水。
(3)分裝、加塞、包扎。
(4)高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。
(四)察氏(czapck)培養(yǎng)基的配制
1．培養(yǎng)基成分
蔗糖 3g
NaN03 0.3g
K2HP04 0.1g
KCl 0.05g
MgSO4·7H2O 0.05 g
FeS04 0.001 g
瓊脂 1.5-2g
蒸餾水 100ml
自然pH
2．配制方法
（1）稱量及溶化 量取所需水量約2／3左右加入到燒杯中，分別稱取蔗糖、NaNO3 、K2HP04 、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100 ml培養(yǎng)基加入1ml 0.1％的FeS04溶液。
（2）定容 候藥品全部溶解后，將溶液倒入量筒中，加水至所需體積。
（3）加瓊脂 加入所需量瓊脂，加熱融化，補(bǔ)足失水。
（4）分裝、加塞、包扎。
（5）高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。
五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容
記錄你所配制培養(yǎng)基的名稱及成分。
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