細(xì)胞培養(yǎng)流程中消化液、培養(yǎng)基、細(xì)胞因子的種類與作用！
小楊 / 2025-07-03 09:56:39
百歐博偉生物：胰蛋白酶精準(zhǔn)水解堿性氨基酸，膠原酶強力消化膠原而不傷細(xì)胞。合理搭配消化液、培養(yǎng)基與細(xì)胞因子，為細(xì)胞實驗提供可靠保障，激活生長潛能。
一、消化液
1、種類：
胰蛋白酶：
來源：主要來源于牛、豬等動物的胰臟，也可通過重組大腸桿菌表達生產(chǎn)。
作用機制：特異性水解堿性氨基酸（如精氨酸和賴氨酸）的羧基參與的肽鍵，使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解，從而使細(xì)胞分散。
適用范圍：適用于消化細(xì)胞間質(zhì)較少的軟組織，但對纖維組織和硬癌組織效果較差。在組織解離時，常與其他酶（如膠原酶）聯(lián)合使用。
使用注意事項：在pH=8.0、37℃時效果最佳；Ca²?、Mg²?和血清會降低其活力，因此常用無Ca²?、Mg²?的溶液配制，消化結(jié)束后用血清終止反應(yīng)。
Accutase消化液：
來源：非動物源性的細(xì)胞消化酶。
作用機制：包含多種蛋白酶和其他酶類，通過水解細(xì)胞間和細(xì)胞與培養(yǎng)器皿表面的多種蛋白質(zhì)成分來分離細(xì)胞。
特點：作用機制復(fù)雜，能在不損傷細(xì)胞表面抗原和細(xì)胞活力的情況下有效地消化細(xì)胞。
膠原酶：
來源：主要從溶組織梭狀細(xì)胞芽孢桿菌提取制備。
作用機制：主要水解結(jié)締組織中膠原蛋白成分。
分類：分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ等不同類型，需根據(jù)所要分離消化的組織類型選擇。
適用范圍：適于消化分離纖維性組織、上皮和較硬的癌組織。
特點：對膠原的消化作用強，僅對細(xì)胞間質(zhì)有消化作用而對細(xì)胞損害不大。
2、作用：
組織塊解離：在細(xì)胞培養(yǎng)前，消化液用于將組織塊解離成單個細(xì)胞或細(xì)胞團，以便進行后續(xù)培養(yǎng)。
傳代培養(yǎng)：在細(xì)胞傳代過程中，消化液用于使貼壁細(xì)胞脫離培養(yǎng)器皿表面，形成細(xì)胞懸液，便于分裝到新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。
二、培養(yǎng)基
1、種類：
Medium：
特點：廣泛應(yīng)用于哺乳動物、特殊造血細(xì)胞、正?；驉盒栽錾陌准?xì)胞、雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)。
主要用途：主要用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。
MEM：
成分：僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。
特點：成分簡單，可廣泛適應(yīng)各種已建成細(xì)胞系和不同地方的哺乳動物細(xì)胞類型的培養(yǎng)。
DMEM-高糖：
特點：可用于許多哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)，更適合高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。
適用范圍：適用于附著性較差，但又不希望其脫離原來生長點的克隆培養(yǎng)，也可用于雜交瘤中骨髓瘤細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)。
DMEM-低糖：
特點：可用于許多哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)。
適用范圍：低糖適于依賴性貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)。
DMEM/F12：
特點：適于克隆密度的培養(yǎng)。
適用范圍：該培養(yǎng)基適用于血清含量較低條件下哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)。
Ham’s F-12培養(yǎng)基：
特點：可以在加入很少血清的情況下應(yīng)用。
適用范圍：特別適合單細(xì)胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng)，是無血清培養(yǎng)中常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)液。
2、作用：
提供營養(yǎng)：為細(xì)胞生長提供必要的氨基酸、維生素、無機鹽和碳源（如葡萄糖）等營養(yǎng)物質(zhì)。
調(diào)節(jié)環(huán)境：調(diào)節(jié)培養(yǎng)物的pH值和滲透壓，維持細(xì)胞生長的穩(wěn)定環(huán)境。
支持生長：含有生長因子和激素等成分，支持細(xì)胞的正常生長和增殖。
三、細(xì)胞因子
1、種類：
白介素 (IL)：
種類：如IL-2、IL-3、IL-4、IL-6、IL-7、IL-8等。
功能：參與免疫調(diào)節(jié)、炎癥反應(yīng)和細(xì)胞分化。
趨化因子：
種類：如CXCL1、CXCL2、CXCL3、CXCL8等。
功能：引導(dǎo)細(xì)胞定向遷移，參與免疫和炎癥反應(yīng)。
干擾素：
種類：如IFN-gama、IFN-a1a、IFN-a1b等。
功能：具有抗病毒、抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫功能。
腫瘤壞死因子 (TNF)：
種類：如TNF-α、TNF-β等。
功能：誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、參與炎癥。
集落刺激因子 (CSF)：
種類：如GM-CSF、G-CSF、M-CSF等。
功能：刺激造血干細(xì)胞增殖和分化。
神經(jīng)營養(yǎng)因子：
種類：如NRG1-β2、GDNF、OSM等。
功能：促進神經(jīng)細(xì)胞生長、存活和修復(fù)。
生長因子：
種類：如FGF、TGF-β、VEGF、PDGF等。
功能：刺激細(xì)胞生長、增殖和分化過程。
2、作用：
調(diào)控細(xì)胞行為：通過結(jié)合特定的細(xì)胞表面受體，激活細(xì)胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，從而調(diào)控細(xì)胞的增殖、分化、代謝和凋亡等生物學(xué)過程。
促進細(xì)胞生長：刺激細(xì)胞分裂和增殖，增加細(xì)胞數(shù)量。
維持細(xì)胞活性：減少細(xì)胞凋亡，提高細(xì)胞存活率。
促進細(xì)胞貼壁與遷移：有助于細(xì)胞在培養(yǎng)皿上的貼壁和遷移，便于細(xì)胞的培養(yǎng)和擴增。
綜上所述，消化液、培養(yǎng)基和細(xì)胞因子在細(xì)胞培養(yǎng)的全流程中各自發(fā)揮著不可或缺的作用。通過合理選擇和使用這些試劑，可以有效地促進細(xì)胞的正常生長和增殖，為細(xì)胞實驗和生物醫(yī)學(xué)研究提供可靠的保障。
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