微生物檢測中常見稀釋液的類型與選擇原則及適用場景！
小楊 / 2025-09-11 09:39:42
百歐博偉生物：在微生物檢測中，稀釋液的選擇需根據(jù)檢測對象（微生物類型）、樣品性質(zhì)以及檢測目的來確定，核心目標(biāo)是：①保持微生物活性；②避免樣品中干擾物質(zhì)（如防腐劑、抗生素、高鹽 / 高糖等）影響微生物生長；③保證稀釋過程的均一性和準(zhǔn)確性。以下是常見的稀釋液類型及選擇原則：
一、常用稀釋液類型及適用場景
1、生理鹽水（0.85% NaCl 溶液）
最常用的稀釋液，適用于大多數(shù)非苛養(yǎng)菌（如
大腸桿菌、
葡萄球菌等）。
優(yōu)點：滲透壓與微生物細胞接近，可防止細胞因滲透作用破裂或皺縮，維持細胞活性。
局限性：對含高濃度有機物、防腐劑或抑菌成分的樣品，稀釋效果可能不佳（無法中和抑菌作用）。
2、磷酸鹽緩沖液（PBS）
由磷酸鈉、氯化鈉等組成，具有穩(wěn)定的 pH 緩沖能力（通常 pH 7.2~7.4）。
適用場景：
樣品本身 pH 波動較大（如酸性食品、堿性廢水），需維持稀釋體系 pH 穩(wěn)定時；
用于需要長期保存稀釋樣品（短時間內(nèi)）或?qū)?pH 敏感的微生物（如某些乳酸菌）。
胰蛋白胨生理鹽水（TPS，0.1% 胰蛋白胨 + 0.85% NaCl）
在生理鹽水中添加少量胰蛋白胨（提供營養(yǎng)），可輕微修復(fù)受損微生物，延長其存活時間。
適用場景：樣品中微生物可能因環(huán)境脅迫（如干燥、低溫）受損時（如土壤、干燥食品中的微生物）。
3、中和性稀釋液
針對含抑菌物質(zhì)的樣品，需添加中和劑消除干擾，常見類型：
卵磷脂 - 吐溫 80 溶液：中和表面活性劑（如化妝品、洗滌劑中的去污劑）對細菌的抑制作用；
硫代硫酸鈉溶液：中和樣品中的氯（如消毒后的水體、餐具樣品）；
亞硫酸鈉溶液：中和甲醛等醛類防腐劑（如某些加工食品）；
皰肉培養(yǎng)基稀釋液：用于含抗生素或抑菌成分的樣品（如藥物殘留的樣品）。
4、其他特殊稀釋液
蒸餾水 / 去離子水：僅適用于對滲透壓不敏感的微生物（如
芽孢桿菌的芽孢），或樣品本身含高濃度鹽需低滲稀釋時，慎用（可能導(dǎo)致大多數(shù)細菌細胞破裂）。
營養(yǎng)肉湯稀釋液：含少量營養(yǎng)成分，適用于苛養(yǎng)菌（如
鏈球菌、
嗜血桿菌）的稀釋，但需注意避免過度繁殖（僅用于短時間稀釋）。
二、選擇稀釋液的核心原則
1、匹配微生物類型：
苛養(yǎng)菌（如
乳酸菌、
雙歧桿菌）需溫和的稀釋液（如 PBS 或含少量營養(yǎng)的稀釋液），避免滲透壓劇烈變化；
芽孢、真菌孢子可耐受較寬滲透壓，生理鹽水或蒸餾水均可，但真菌更適合用含少量葡萄糖的稀釋液（如 0.5% 葡萄糖生理鹽水）。
2、消除樣品干擾：
樣品含抑菌物質(zhì)（防腐劑、消毒劑、高鹽 / 高糖、抗生素）時，必須使用中和性稀釋液（如含中和劑的 PBS 或生理鹽水），否則會導(dǎo)致微生物計數(shù)偏低。
例：檢測含氯消毒后的餐具表面微生物，需用含硫代硫酸鈉的稀釋液中和余氯。
3、維持體系穩(wěn)定性：
樣品 pH 異常（如泡菜 pH 3~4，堿性廢水 pH 10 以上）時，優(yōu)先選緩沖能力強的稀釋液（如 PBS），避免微生物因 pH 過高 / 過低死亡。
4、遵循標(biāo)準(zhǔn)方法：
國標(biāo)或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中通常明確規(guī)定稀釋液類型（如食品微生物檢測標(biāo)準(zhǔn)），需嚴(yán)格按標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行（如食品檢測常用生理鹽水或 TPS，水體檢測常用 PBS）。
三、注意事項
稀釋液需滅菌（高壓蒸汽滅菌 121℃、15~20 分鐘），避免引入雜菌污染。
稀釋過程中需保持稀釋液溫度與樣品接近（如室溫），避免溫差導(dǎo)致微生物應(yīng)激死亡。
對未知樣品，可優(yōu)先選擇生理鹽水或 PBS 作為基礎(chǔ)稀釋液，若懷疑有抑菌成分，需通過預(yù)實驗驗證（如添加中和劑后菌落數(shù)是否顯著增加）。
通過以上原則，可根據(jù)實際樣品和微生物特性選擇最合適的稀釋液，確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
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