微生物學(xué)檢測(cè)常見樣本的具體質(zhì)量判斷標(biāo)準(zhǔn)和通用原則!
小楊 / 2025-09-11 10:17:32
百歐博偉生物:判斷微生物學(xué)檢測(cè)樣本的質(zhì)量是否合格,需結(jié)合樣本類型、采集規(guī)范、外觀特征、污染指標(biāo)及初步檢測(cè)結(jié)果等多方面綜合評(píng)估,核心是確保樣本“真實(shí)反映目標(biāo)部位微生物狀態(tài)”且“無明顯外源性污染”。以下是常見樣本的質(zhì)量判斷標(biāo)準(zhǔn)和通用原則:
一、通用判斷原則
1、采集規(guī)范性
樣本是否按標(biāo)準(zhǔn)流程采集(如無菌操作、正確部位、合適時(shí)機(jī))。例如:血液培養(yǎng)需在發(fā)熱初期、使用抗生素前采集,且嚴(yán)格皮膚消毒;尿液需清潔中段尿,避免會(huì)陰部污染。
樣本容器是否符合要求(如無菌容器、抗凝劑類型正確,避免使用含抑菌成分的容器)。
采集量是否充足(如血液培養(yǎng)成人每瓶 8-10mL,腦脊液≥1mL,痰液≥3mL),不足可能導(dǎo)致假陰性。
2、運(yùn)輸與保存及時(shí)性
樣本是否在規(guī)定時(shí)間內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室(如尿液需 2 小時(shí)內(nèi)冷藏或培養(yǎng),厭氧菌需厭氧環(huán)境運(yùn)輸)。
保存條件是否適宜(如糞便樣本冷藏,病毒樣本冷凍),運(yùn)輸過程中是否有溫度失控、容器破損等情況。
3、外觀與性狀
觀察樣本是否有明顯異常(如痰液是否為膿性、帶血;尿液是否渾濁、有絮狀物;腦脊液是否渾濁、凝固),異常外觀可能提示感染,但也需排除污染。
排除明顯外源性污染跡象(如痰液中混有大量食物殘?jiān)?,尿液中混入陰毛、糞便)。
二、常見樣本的具體質(zhì)量判斷標(biāo)準(zhǔn)
1、痰液樣本
合格標(biāo)準(zhǔn):
顯微鏡鏡檢(革蘭染色):每個(gè)低倍視野(LPF)中白細(xì)胞(WBC)≥25 個(gè),上皮細(xì)胞(EP)≤10 個(gè)(提示為深部痰,減少口腔污染)。
外觀:膿性、黏液膿性,而非唾液(清亮、泡沫多)或口水(含大量上皮細(xì)胞)。
不合格情況:
上皮細(xì)胞>25 個(gè) / LPF(提示混入大量口腔正常菌群);
樣本量<1mL 或?yàn)橥僖骸?/div>
2、尿液樣本
合格標(biāo)準(zhǔn):
清潔中段尿:離心后鏡檢,白細(xì)胞<5 個(gè) / 高倍視野(HPF),上皮細(xì)胞<10 個(gè) / HPF(女性可稍高,但需無大量鱗狀上皮細(xì)胞)。
外觀:無明顯雜質(zhì)、糞便污染,渾濁尿需結(jié)合臨床判斷(可能為感染,也可能是污染)。
不合格情況:
大量鱗狀上皮細(xì)胞(提示會(huì)陰部污染);
樣本為前段尿或后段尿(未按清潔中段尿采集);
容器未滅菌或有泄漏。
3、血液樣本
合格標(biāo)準(zhǔn):
采集過程嚴(yán)格無菌(皮膚消毒直徑≥5cm,酒精或碘伏消毒后待干);
每瓶血量符合要求(成人 8-10mL,兒童 1-3mL);
同一患者至少采集 2 套(不同部位),提高陽性可信度。
不合格情況:
僅采集 1 套樣本,污染與真陽性難區(qū)分;
采血量不足(兒童<0.5mL);
培養(yǎng)瓶破損或標(biāo)簽?zāi):?/div>
4、腦脊液樣本
合格標(biāo)準(zhǔn):
無菌采集(腰椎穿刺),至少 2-3mL,分裝至多個(gè)無菌管;
外觀:正常為清亮,化膿性感染時(shí)渾濁,結(jié)核性可能呈毛玻璃樣,需及時(shí)送檢(1 小時(shí)內(nèi))。
不合格情況:
樣本量<1mL;
延遲送檢(超過 2 小時(shí)且未冷藏);
明顯血性(需排除穿刺損傷,但血性樣本仍可培養(yǎng))。
5、糞便樣本
合格標(biāo)準(zhǔn):
采集新鮮(<2 小時(shí))的黏液、膿血部分(約黃豆大?。?;
無尿液、水或消毒劑污染。
不合格情況:
干燥或超過 24 小時(shí)未冷藏的樣本;
混入大量尿液或衛(wèi)生紙。
6、傷口 / 膿液樣本
合格標(biāo)準(zhǔn):
從深部膿腫或傷口基底采集(避免表面皮膚污染),使用無菌拭子或注射器抽取膿液;
若為拭子,需采集足夠量(拭子濕潤(rùn)),雙份拭子(一份培養(yǎng),一份涂片)。
不合格情況:
僅采集傷口表面滲出物或結(jié)痂;
拭子干燥或被皮膚正常菌群污染(涂片見大量鱗狀上皮細(xì)胞)。
三、實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步驗(yàn)證
涂片鏡檢:通過革蘭染色觀察細(xì)胞比例、有無目標(biāo)微生物(如腦脊液中見革蘭陰性雙球菌提示
腦膜炎奈瑟菌),同時(shí)判斷是否有大量雜菌(如痰液中見大量
口腔鏈球菌)。
培養(yǎng)結(jié)果輔助判斷:若樣本培養(yǎng)出多種皮膚 / 口腔正常菌群(如
凝固酶陰性葡萄球菌、
草綠色鏈球菌),且無單一優(yōu)勢(shì)菌,可能提示污染;反之,單一優(yōu)勢(shì)菌(如尿液中純培養(yǎng)
大腸桿菌≥10?CFU/mL)則支持樣本合格。
四、總結(jié)
樣本質(zhì)量合格的核心是:采集規(guī)范、量足、及時(shí)運(yùn)輸、無明顯污染,且涂片 / 培養(yǎng)結(jié)果與臨床感染部位一致。對(duì)于不合格樣本,需及時(shí)與臨床溝通,建議重新采集,避免因樣本問題導(dǎo)致誤診或漏診。
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