微生物實(shí)驗(yàn)中鑒定藥敏分析系統(tǒng)如何進(jìn)行內(nèi)部質(zhì)量控制？
小楊 / 2025-11-11 09:55:49
百歐博偉生物：微生物鑒定藥敏分析系統(tǒng)的內(nèi)部質(zhì)量控制（IQC）是確保檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定可靠的核心環(huán)節(jié)，通過對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株、試劑、儀器及操作流程的定期驗(yàn)證，及時(shí)發(fā)現(xiàn)并糾正系統(tǒng)偏差。具體實(shí)施方法如下：
一、制定明確的質(zhì)控計(jì)劃
根據(jù)儀器說明書、臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)及實(shí)驗(yàn)室需求，制定標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控計(jì)劃，明確：
質(zhì)控頻率：如每日、每周、每月或每批次試劑更換后；
質(zhì)控對(duì)象：包括鑒定系統(tǒng)、藥敏系統(tǒng)、關(guān)鍵試劑（如鑒定卡、藥敏板）等；
質(zhì)控菌株：選擇國(guó)際公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)菌株；
可接受范圍：依據(jù)權(quán)威標(biāo)準(zhǔn)設(shè)定結(jié)果合格閾值；
失控處理流程：明確當(dāng)質(zhì)控結(jié)果超出范圍時(shí)的排查和糾正步驟。
二、標(biāo)準(zhǔn)菌株的選擇與應(yīng)用
標(biāo)準(zhǔn)菌株是內(nèi)部質(zhì)控的“金標(biāo)準(zhǔn)”，需具備遺傳穩(wěn)定性好、生化反應(yīng)和耐藥表型明確的特點(diǎn)，常用菌株包括：
微生物類型 常用標(biāo)準(zhǔn)菌株（ATCC 編號(hào)） 質(zhì)控目的
革蘭陰性菌
大腸埃希菌 25922 驗(yàn)證需氧菌鑒定準(zhǔn)確性、常規(guī)藥敏試驗(yàn)
使用要求：
標(biāo)準(zhǔn)菌株需從正規(guī)渠道獲取（如 ATCC、CMCC），低溫冷凍保存（-70℃或凍干），避免反復(fù)傳代導(dǎo)致表型變異；
每次質(zhì)控前需復(fù)蘇菌株，經(jīng)純培養(yǎng)（18-24 小時(shí)，對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期）后使用，確保菌落形態(tài)和活性穩(wěn)定。
三、鑒定系統(tǒng)的內(nèi)部質(zhì)控
通過標(biāo)準(zhǔn)菌株驗(yàn)證系統(tǒng)對(duì)微生物種屬的識(shí)別能力，具體步驟：
菌懸液制備：將標(biāo)準(zhǔn)菌株制成 0.5 麥?zhǔn)蠞舛鹊木鷳乙海ǚ蟽x器要求）；
加載鑒定卡：按操作規(guī)范將菌懸液接種至鑒定卡，放入系統(tǒng)孵育；
結(jié)果判讀：
要求鑒定結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)菌株的種屬一致（如
大腸埃希菌 25922 需明確鑒定為Escherichia coli）；
系統(tǒng)給出的鑒定可信度需≥95%（部分苛養(yǎng)菌可適當(dāng)放寬至 90%）；
若鑒定錯(cuò)誤或可信度不足，需排查原因（如菌懸液濃度異常、鑒定卡失效、儀器數(shù)據(jù)庫未更新）。
四、藥敏系統(tǒng)的內(nèi)部質(zhì)控
驗(yàn)證系統(tǒng)對(duì)藥物敏感性判定的準(zhǔn)確性，核心是確保 MIC（最低抑菌濃度）或抑菌環(huán)直徑在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)，步驟：
藥敏試驗(yàn)操作：用標(biāo)準(zhǔn)菌株的 0.5 麥?zhǔn)暇鷳乙航臃N藥敏板（或紙片擴(kuò)散法的 MH 瓊脂），按儀器要求孵育；
結(jié)果對(duì)比：
藥敏結(jié)果需符合 CLSI、EUCAST 等標(biāo)準(zhǔn)的折點(diǎn)（如
大腸埃希菌 25923 對(duì)氨芐西林的 MIC 應(yīng)≤8μg/mL，判定為“敏感”）；
若為紙片擴(kuò)散法，抑菌環(huán)直徑需在標(biāo)準(zhǔn)區(qū)間內(nèi)（如
金黃色葡萄球菌 25923 對(duì)青霉素的抑菌環(huán)直徑應(yīng)≥29mm）；
耐藥機(jī)制驗(yàn)證：對(duì)特殊耐藥株，需確認(rèn)系統(tǒng)能正確識(shí)別其耐藥表型。
五、試劑與耗材的質(zhì)控
鑒定卡/藥敏板：
每批次新試劑啟用前，用標(biāo)準(zhǔn)菌株測(cè)試 1-2 株，驗(yàn)證其活性（如生化底物是否有效、抗菌藥物是否穩(wěn)定）；
記錄試劑批號(hào)、有效期、儲(chǔ)存條件，避免使用過期或變質(zhì)試劑（如藥敏板中抗菌藥物結(jié)晶、鑒定卡長(zhǎng)菌）。
培養(yǎng)基與稀釋液：
自制或商用培養(yǎng)基需驗(yàn)證無菌性（孵育后無雜菌生長(zhǎng)）、促生長(zhǎng)能力（標(biāo)準(zhǔn)菌株生長(zhǎng)良好）和一致性（如 MH 瓊脂的 pH、厚度符合要求）。
六、儀器性能的日常監(jiān)控
孵育溫度：每日監(jiān)測(cè)系統(tǒng)孵育模塊的實(shí)際溫度，確保與設(shè)定溫度一致（誤差≤±1℃），避免溫度偏差影響微生物生長(zhǎng)或反應(yīng)速率；
加樣準(zhǔn)確性：定期用標(biāo)準(zhǔn)溶液驗(yàn)證加樣體積（誤差需≤±5%），防止加樣過多/過少導(dǎo)致結(jié)果偏差；
光路與讀數(shù)系統(tǒng)：用標(biāo)準(zhǔn)濁度管或比色皿校準(zhǔn)比濁儀、吸光度檢測(cè)器，確保對(duì)菌液濃度或反應(yīng)產(chǎn)物的檢測(cè)精度。
七、失控處理與記錄
失控判定：當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)菌株的鑒定結(jié)果錯(cuò)誤、藥敏結(jié)果超出標(biāo)準(zhǔn)范圍，或儀器參數(shù)異常時(shí)，判定為“失控”；
排查流程：
優(yōu)先檢查操作是否規(guī)范（如菌懸液濃度、接種步驟）；
驗(yàn)證試劑是否有效（如更換新批次鑒定卡重試）；
校準(zhǔn)儀器關(guān)鍵模塊（如溫度、光路）；
若為系統(tǒng)軟件問題，聯(lián)系廠商更新數(shù)據(jù)庫或判讀規(guī)則。
記錄與追溯：
建立質(zhì)控日志，詳細(xì)記錄每次質(zhì)控的菌株、試劑批號(hào)、結(jié)果、操作人員及失控處理過程；
定期回顧質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)，分析趨勢(shì)性偏差，制定預(yù)防措施。
八、總結(jié)
內(nèi)部質(zhì)量控制的核心是通過標(biāo)準(zhǔn)菌株驗(yàn)證 + 全流程監(jiān)控，確保微生物鑒定藥敏分析系統(tǒng)在鑒定準(zhǔn)確性、藥敏判讀一致性、儀器穩(wěn)定性等方面符合臨床要求。只有持續(xù)執(zhí)行規(guī)范化的質(zhì)控流程，才能為病原學(xué)診斷和抗菌藥物合理使用提供可靠依據(jù)。
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