總腸道菌群檢測的樣本采集方式及標準化操作要求!
小楊 / 2025-12-03 09:58:38
百歐博偉生物:總腸道菌群檢測的樣本采集以糞便樣本為核心(是腸道菌群最直接的來源),部分特殊場景會輔以腸道黏膜樣本,不同采集方式有明確的標準化操作要求,具體如下:
一、核心采集方式:糞便樣本采集
糞便樣本采集是臨床和常規(guī)檢測中最常用的方式,根據(jù)檢測目的、樣本保存條件分為以下細分類型:
1、新鮮即時采集法
操作:使用無菌一次性糞便采集管(含采樣勺),采集排便后新鮮糞便的中段部分(避免接觸馬桶水、廁紙等污染物),采樣量根據(jù)檢測技術(shù)調(diào)整:16S rRNA 測序需≥10g,宏基因組測序需 15-20g,代謝產(chǎn)物檢測需 5-8g。
保存與運輸:采集后立即旋緊采集管(部分采集管含 DNA 保護劑/保存液),室溫下可保存 24 小時(含保護劑),無保護劑時需 4℃冷藏且 2 小時內(nèi)送檢;長期保存需 - 80℃凍存,冷鏈運輸溫度波動控制在 ±2℃內(nèi),運輸時長不超過 6 小時。
適用場景:常規(guī)菌群組成、功能基因檢測,代謝產(chǎn)物定量分析。
2、居家采樣法(標準化套裝)
操作:使用商品化無菌采樣套裝(含采樣管、保存液、密封袋、冷鏈冰袋),按說明書采集糞便樣本(采樣量≥5g),采樣后將樣本管密封放入密封袋,再置于冰袋中。
保存與運輸:套裝含專用保存液時,室溫可穩(wěn)定保存 72 小時,冷藏可保存 7 天;運輸時需通過冷鏈快遞,全程溫度監(jiān)控,確保送達實驗室時樣本未解凍、未污染。
適用場景:大規(guī)模人群篩查、居家健康監(jiān)測,是目前最普及的采樣方式。
3、多次采樣法
操作:針對菌群動態(tài)監(jiān)測需求,連續(xù) 3 天每日采集 1 次糞便樣本(每次≥5g),分別標注采樣時間,單獨保存/運輸。
保存與運輸:同新鮮即時采集法,需嚴格區(qū)分各次樣本,避免混淆。
適用場景:評估益生菌/抗生素干預(yù)后的菌群變化、慢性腸病患者的長期監(jiān)測。
二、特殊采集方式:腸道黏膜樣本采集
僅用于臨床深度診療場景,需通過內(nèi)鏡操作完成,屬于侵入性采樣:
1、結(jié)腸鏡活檢采樣
操作:在結(jié)腸鏡檢查過程中,使用活檢鉗從結(jié)腸黏膜取 2-3 塊黏膜組織(每塊≥1mm³),立即放入無菌凍存管,加入 RNA/DNA 保護液。
保存與運輸:-80℃凍存,干冰運輸,運輸時長不超過 24 小時。
適用場景:炎癥性腸病的精準分型、腸道黏膜相關(guān)菌群與疾病關(guān)聯(lián)研究。
2、小腸黏膜采樣
操作:通過小腸鏡或膠囊內(nèi)鏡輔助活檢,采集小腸黏膜組織(采樣量≥0.5mm³),處理方式同結(jié)腸鏡活檢樣本。
適用場景:小腸菌群失衡相關(guān)疾病的診斷。
3、采樣關(guān)鍵注意事項
采樣前 3-7 天需暫停服用抗生素、益生菌、益生元制劑,避免干擾菌群組成;若因臨床需求無法停藥,需在采樣記錄表中明確標注用藥名稱、劑量、停藥時間。
采樣過程中全程無菌操作,避免手、衣物、環(huán)境等污染樣本;采樣管需清晰標注姓名、采樣時間、采樣部位。
女性經(jīng)期、腹瀉/便秘急性期需暫緩采樣,待狀態(tài)穩(wěn)定后再采集,確保樣本能反映真實菌群狀態(tài)。
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