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細胞的天敵支原體
中國微生物菌種查詢網 / 2018-08-14 14:43:32

       中國微生物菌種查詢網支原體對細胞的影響,可以從兩方面考慮。一方面是對細胞的直接影響,細胞被支原體污染后,增殖緩慢,部分細胞變圓,從瓶壁上脫落,部分細胞雖然表面變化不十分明顯,實際上潛伏著多方面的危險。另一方面,支原體可以通過消耗培養(yǎng)基中的精氨酸,抑制細胞DNA、RNA的合成,降低細胞的抵抗力。因此,支原體污染對細胞的影響是非常廣泛和深遠的。造成細胞污染的支原體有很多,但主要有四種支原體:口腔支原體、精氨酸支原體、豬鼻支原體和萊氏無膽甾原體。由于支原體體積很小,直徑約在0.2-2.0um之間,可以通過濾膜而直接造成培養(yǎng)基或血清的污染。另外,被支原體污染的細胞培養(yǎng)基液體往往并不渾濁,細胞受損程度并不明顯,形態(tài)很少改變,這樣就更增加 了人們對其的防范難度。
由于支原體種類不同,應采取不同的方法進行檢測,常用的方法有如下幾種:
1、熒光染色法(DNA染色法):此法快捷、簡便、價廉,但其靈敏度有一定欠缺,易造成漏檢,若細胞片制備不當則結果難以判斷。
2、間接免疫熒光法和免疫印跡:簡便、快速、特異性強,如果應用單克隆抗體試劑,效果會更好。
3、觀察細胞的形態(tài)和生長特征:支原體污染比較嚴重時可出現生長減慢,有的培養(yǎng)基pH明顯變酸,并出現細胞病變,其病變特征與病毒感染相似,因此不能準確診斷。
4、PCR法檢測支原體:最為快速、靈敏,取樣量少,既可進行細胞檢測也可進行細胞上清的檢測,同時可以檢測8種支原體的污染,是目前常用的檢測手段。但其成本較高,條件要求嚴格,有時易出現假陽性。
5、分離培養(yǎng)法:大多數支原體可出現特有的典型菌落。該方法準確、可靠,但時間長。 但其實驗周期較長,所以常用于進行對懷疑細胞的最后甄別。
6、電子顯微鏡和免疫電子顯微鏡法:此法非常直觀、準確,但對使用環(huán)境要求高,操作復雜,實驗周期較長,敏感性不高,常作為樣品的最后定性檢測。



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