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國家標(biāo)準(zhǔn)中,利用總大腸菌群作為糞便污染的指標(biāo).總大腸菌群是指一群需氧及兼性厭氧的,37℃生長(zhǎng)時(shí)能使乳糖發(fā)酵,在24h內(nèi)產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無芽胞桿菌.水樣中總大腸菌群數(shù)的含量,表明水被糞便污染的程度,而且間接地表明有腸道致病菌存在的可能.
國家標(biāo)準(zhǔn)提供了多管發(fā)酵法及濾膜法檢測(cè)總大腸菌群的方法.
多管發(fā)酵法檢測(cè)總大腸菌群,分為三步:初發(fā)酵試驗(yàn),平板分離,復(fù)發(fā)酵證實(shí)試驗(yàn).初發(fā)酵試驗(yàn),采用乳糖蛋白胨培養(yǎng)液37℃培養(yǎng)24h,觀察產(chǎn)酸產(chǎn)氣情況.對(duì)陽性管培養(yǎng)物,接種于品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基或伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基,觀察菌落特征,并進(jìn)行革蘭氏染色和鏡檢.對(duì)典型和可疑菌落,接種于乳糖蛋白胨培養(yǎng)液,進(jìn)行復(fù)發(fā)酵證實(shí)試驗(yàn),并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)所附檢數(shù)表報(bào)告結(jié)果.
其中,對(duì)生活飲用水,初發(fā)酵試驗(yàn)接種水樣總量300ml,即100ml接種2管,10ml接種10管,采用兩個(gè)稀釋度,12支發(fā)酵管.對(duì)水源水,初發(fā)酵試驗(yàn)接種水樣總量55.5ml,即10ml接種5管,1ml接種5管,0.1ml接種10管,共采用三個(gè)稀釋度,15支發(fā)酵管.兩種接種方法,所用的檢數(shù)表是不同的.
濾膜法檢測(cè)總大腸菌群,就是利用微孔濾膜,過濾一定量水樣,將水樣中含有的細(xì)菌截留在濾膜上,然后將濾膜帖放在選擇性培養(yǎng)基上(如品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基),經(jīng)培養(yǎng)和證實(shí)試驗(yàn)后,直接計(jì)數(shù)濾膜上生長(zhǎng)的典型大腸菌群菌落,并計(jì)算出每升水樣中含有的總大腸菌群數(shù).