溶血鏈球菌呈球形或橢圓形，直徑0.6-1.0μm，呈鏈狀排列，長(zhǎng)短不一，從4-8個(gè)至20-30個(gè)菌細(xì)胞組成不等，鏈的長(zhǎng)短與細(xì)菌的種類及生長(zhǎng)環(huán)境有關(guān)。關(guān)于國(guó)家食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)， 在GB/T 4789.11-2003中對(duì)ATCC菌種溶血性鏈球菌的檢驗(yàn)范圍包括：
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中溶血性鏈球菌的檢驗(yàn)方法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于各類食品和食物中毒樣品中溶血性鏈球菌的檢驗(yàn)。
食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)染色法、培養(yǎng)基和試劑。
一、設(shè)備和材料
1. 恒溫培養(yǎng)箱：36℃士1℃。
2.恒溫水浴鍋：36℃土1℃。
3.冰箱：O℃——4℃。
4.顯微鏡：10*～l00*。
5.均質(zhì)器或滅菌乳缽。
6.離心機(jī)：4000r/min。
7.架盤藥物天平：0g——5009，精確至0.5g。
8.滅菌錐形瓶：100mL。
9.滅菌培養(yǎng)皿：直徑90mm。
10.滅菌試管：10mm*100mm、l6mm*160mm。
11.滅菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、5mL、10mL（具0.1mL刻度）。
12.滅菌棉簽、鑷子等。
二、培養(yǎng)基和試劑
4.1葡萄糖肉浸液肉湯：按GB/T4789.28一2003中4.1規(guī)定。在肉浸液肉湯內(nèi)加人1％葡萄糖。
4.2肉浸液肉湯：按GB/T4789.28一2003中4.1規(guī)定。
4.3匹克氏肉湯：按GB/T4789.28一2003中4.62規(guī)定。
4.4血瓊脂平板：按GB/T4789.28一2003中4.6規(guī)定。
4.5人血漿。4.6 0.25%氯化鈣。
4.7 0.85％滅菌生理鹽水。
4.8桿菌膚藥敏紙片（含0.04單位）。
三、檢驗(yàn)程序：檢驗(yàn)程序見(jiàn)圖（略）
四、操作步驟
1.樣品處理按無(wú)菌操作稱取食品檢樣25g（ml)，加人225mL滅菌生理鹽水，研成勻漿制成混懸液。
2.培養(yǎng)將上述混懸液吸取5ml，接種于50ml工葡萄糖肉浸液肉湯，或直接劃線接種于血平板。如檢樣污染嚴(yán)重，可同時(shí)按上述量接種匹克氏肉湯，經(jīng)36℃ 土l℃ 培養(yǎng)24h接種血平板，置36℃ 士1℃ 培養(yǎng)24h,挑起乙型血圓形突起的細(xì)小菌落，在血平板上分純，然后觀察溶血情況及革蘭氏染色，并進(jìn)行鏈激酶試驗(yàn)及桿菌膚敏感試驗(yàn)。
3.形態(tài)與染色本菌里球形或卵圓形，直徑0.5um ——1um鏈排列，鏈長(zhǎng)短不一，頰者4個(gè)～8個(gè)細(xì)胞組成，長(zhǎng)者20個(gè)一30個(gè)，鏈的長(zhǎng)短常與細(xì)菌的種類及生長(zhǎng)環(huán)境有關(guān)；液體培養(yǎng)中易呈長(zhǎng)鏈；在固體培養(yǎng)基中常呈短鏈，不形成芽抱，無(wú)鞭毛，不能運(yùn)動(dòng)。
4.培養(yǎng)特性該菌營(yíng)養(yǎng)要求較高，在普通培養(yǎng)纂上生長(zhǎng)不良，在加有血液、血清培養(yǎng)荃中生長(zhǎng)較好。溶血性鏈球菌在血清肉湯中生長(zhǎng)時(shí)管底呈絮狀或顆粒狀沉淀。血平板上菌落為灰白色，半透明或不透明，表面光滑，有乳光，直徑約0.5mm～0.75mm，為圓形突起的細(xì)小菌落，乙型溶血鏈球菌周圍有2mm—4mm。界限分明、無(wú)色透明的溶血圈。
5.鏈激酶試驗(yàn)致病性乙型溶血性鏈球菌能產(chǎn)生鏈激酶（即溶纖維蛋白酶），此酶能激活正常人體血液中的血漿蛋白酶原，使成血漿蛋白酶，而后溶解纖維蛋白。吸取草酸鉀血漿0.2ml，加0.8ml滅菌生理鹽水，混勻，再加人18h～24卜、36℃ 士1℃ 培的鏈球菌培養(yǎng)物0.5 m及0.25％氯化鈣0.25ml（如氯化鈣已潮解，可適當(dāng)加大至0.3%——0.35 %)振蕩搖勻，置于36℃ 士1℃ 水中10min，血漿混合物自行凝固（凝固程度至試管倒置，內(nèi)容物不流動(dòng)），然后觀察凝固塊重新完全溶解的時(shí)間，完全溶解為陽(yáng)性，如24h后不溶解即為陰性。
草酸鉀人血漿配制：草酸鉀0.01g放人滅菌小試管中，再加人5ml血，混勻，經(jīng)離心沉淀，吸取上清液即為草酸鉀人血漿。
6.桿菌肚敏感試驗(yàn)挑取乙型溶血性鏈球菌液，涂布子血平板上，用滅菌鑷子夾取每片含有。．04單位的桿菌膚紙片，放于上述平板上，于36℃ 士1℃ 培養(yǎng)18h—24h，如有抑菌帶出現(xiàn)即為陽(yáng)性，同時(shí)用已知陽(yáng)性菌株作為對(duì)照。
溶血性鏈球菌在自然界中分布較廣，存在于水、空氣、塵埃、糞便及健康人和動(dòng)物的口腔、鼻腔、咽喉中，可通過(guò)直接接觸、空氣飛沫傳播或通過(guò)皮膚、粘膜傷口感染，被污染的食品如奶、肉、蛋及其制品也會(huì)對(duì)人類進(jìn)行感染。上呼吸道感染患者、人畜化膿性感染部位常成為食品污染的污染源。