BIOBW生物流式細胞術(shù)的質(zhì)量控制！
中國微生物菌種查詢網(wǎng) / 2019-01-22 08:59:31
中國微生物菌種查詢網(wǎng) 流式細胞術(shù)（flow cytometry,FCM）越來越廣泛的應(yīng)用在臨床檢驗中。由于臨床檢驗本身的性質(zhì)，它要求臨床檢驗的管理者和操作人員必須把好常規(guī)操作已經(jīng)結(jié)果分析的質(zhì)量關(guān)。同時還必須懂得如何判斷分是在控還是失控。作為臨床檢驗工作，其工作的質(zhì)量標準就是使檢驗的結(jié)果最佳地符合病人有無病變的實際情況。
為此，從臨床醫(yī)師開出化驗單，直至拿到檢驗報告的整個過程都在質(zhì)量控制的范疇之中，即所謂全程質(zhì)量控制。它包括質(zhì)量保證、質(zhì)量控制和質(zhì)量評估。質(zhì)量保證，指圍繞所有的步驟，監(jiān)測和評估實驗室規(guī)章制度與操作流程的效力。主要利用質(zhì)量控制和質(zhì)量評估。
質(zhì)量控制指建立一套完善的實驗室監(jiān)控方法，保證結(jié)果的可靠性，提高準確度、精密度、重復(fù)性和室間結(jié)果的可比性。對于一個實驗，應(yīng)建立一套包括各種可變因素（儀器設(shè)備、樣本處理、試劑、操作過程、數(shù)據(jù)分析等）的操作規(guī)程。
質(zhì)量評估是由一個區(qū)域性的、國家的或國際性的機構(gòu)，組織通過一系列的方法來比較實驗室內(nèi)或不同實驗室之間的結(jié)果而建立的一套評價系統(tǒng)。其主要目的是建立室間和儀器設(shè)備之間的可比性。當一個標準品或參考標準存在時，質(zhì)量評估通常被稱為熟練度測試。因此，嚴格的質(zhì)量控制是先進的臨床檢驗分析技術(shù)真正發(fā)揮作用的保證。
FCM作為一項先進的檢測技術(shù)，對質(zhì)量控制自然也不例外。目前，F(xiàn)CM應(yīng)用于臨床檢驗的項目主要集中在幾個方面：1，免疫表型分析，包括外周血淋巴細胞表型分析、白血病/淋巴瘤免疫分型、血小板膜糖蛋白分析、HLA-B27檢測、陣發(fā)性血紅蛋白尿（PNH）的檢測等等。2，細胞DNA、RNA檢測及細胞周期分析，包括DNA倍體檢測、細胞周期分析、網(wǎng)織紅細胞檢測、網(wǎng)織血小板檢測等等。3，定量分析，包括愛滋病劃分中外周血CD4的絕對定量、OKT3治療監(jiān)測中CD3的絕對定量干細胞移植中的CD34的定量等等。FCM實驗的質(zhì)量控制自然也包括儀器設(shè)備、樣本處理、試劑、操作過程、數(shù)據(jù)分析等整個實驗過程的質(zhì)控。
一、流式細胞儀的校準
流式細胞儀的校準包括流路的穩(wěn)定性、光路的穩(wěn)定性、多色標記熒光顏色補償、光電倍增管轉(zhuǎn)換的線性和穩(wěn)定性。對儀器的校準主要是利用標準微球進行監(jiān)測。聚苯乙烯可以被做成各種大小的微球，也可被熒光標記或者擁有定量免疫球蛋白的結(jié)合位點。這種制成固定熒光強度、大小和光散射性的聚苯乙烯微球，已成為流式質(zhì)控中的一個常用的標準品。BECKMAN COULTER公司擁有儀器校準所需全部標準微球（見表一）。另外，在顏色補償方面，BECKMAN COULTER公司的流式細胞儀除了可以用標準補償試劑來完成外，還可以直接利用生物樣品進行自動顏色補償，這使多色標記變得非常容易。BECKMAN COULTER公司的流式細胞儀所帶的全程質(zhì)控軟件，使日常儀器性能的質(zhì)控以及質(zhì)量控制評估都可自動完成。