改良Hodge試驗（modified Hodge test，MHT）方法和結(jié)果判定
中國微生物菌種查詢網(wǎng) / 2019-01-30 08:56:07
腸桿菌科細(xì)菌在臨床感染標(biāo)本的分離率呈現(xiàn)逐年攀升的趨勢，產(chǎn)碳青霉烯酶腸桿菌的檢出，表明作為治療多重耐藥的腸桿菌科細(xì)菌的最后一道防線的碳青霉烯酶類抗菌藥物也出現(xiàn)了耐藥情況，這無疑給多重耐藥腸桿菌科細(xì)菌的治療和感染管理提出了更高的挑戰(zhàn)。為了更加有針對性地治療和預(yù)防多重耐藥腸桿菌科細(xì)菌，臨床上對于多重耐藥腸桿菌科細(xì)菌的耐藥基因表型的初步檢測顯得尤為重要。改良Hodge試驗（modified Hodge test，MHT）是美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會（CLSI）在2009年推薦的檢測腸桿菌科細(xì)菌碳青霉烯酶表型的常規(guī)方法。MHT法操作簡便，不需要大型儀器，在一般檢驗科的臨床微生物室都可以開展，因此被廣泛用于產(chǎn)碳青霉烯酶腸桿菌科細(xì)菌的表型檢測。
一、實驗方法
1、以大腸桿菌ATCC 25922作為指示菌，用無菌生理鹽水將大腸桿菌ATCC 25922菌懸液調(diào)至0.5麥?zhǔn)蠞岫?，再用生理鹽水稀釋10倍。
2、將稀釋后的大腸桿菌ATCC 25922菌液均勻涂布于MH瓊脂平板上，將平板干燥3-10分鐘。
3、將美羅培南或亞胺培南或厄他培南藥敏紙片（10ug/片）置于MH瓊脂平板中心位置。
4、使用接種環(huán)挑取待測菌株或質(zhì)控菌株，以平板中心的藥敏紙片為起點，沿離心方向劃線，長度為20-25mm。
5、將平板放置于35±2°C培養(yǎng)16-20h。
二、結(jié)果判定
1、質(zhì)控菌株結(jié)果成立的情況。
2、改良Hodge試驗結(jié)果陽性：在被測菌株線與大腸桿菌ATCC 25922抑菌圈交匯處，出現(xiàn)大腸桿菌生長增強(qiáng)現(xiàn)象，即改良Hodge試驗結(jié)果陽性，受試菌株產(chǎn)碳青霉烯酶。
3、改良Hodge試驗結(jié)果陰性：在被測菌株線與大腸桿菌ATCC 25922抑菌圈交匯處，未出現(xiàn)大腸桿菌生長增強(qiáng)現(xiàn)象，即改良Hodge試驗結(jié)果陰性，受試菌株不產(chǎn)碳青霉烯酶。
注：某些受試菌株可能具有抑制大腸桿菌ATCC 25922菌生長的特性。若出現(xiàn)這種情況，在受試菌株劃線兩側(cè)可見清晰的抑制生長區(qū)。不能根據(jù)改良Hodge試驗結(jié)果對這類受試菌株是否產(chǎn)碳青霉烯酶作出判定。
結(jié)果判讀圖例：
