改良Hodge試驗（modified Hodge test，MHT）方法和結果判定
中國微生物菌種查詢網(wǎng) / 2019-01-30 08:56:07
腸桿菌科細菌在臨床感染標本的分離率呈現(xiàn)逐年攀升的趨勢，產(chǎn)碳青霉烯酶腸桿菌的檢出，表明作為治療多重耐藥的腸桿菌科細菌的最后一道防線的碳青霉烯酶類抗菌藥物也出現(xiàn)了耐藥情況，這無疑給多重耐藥腸桿菌科細菌的治療和感染管理提出了更高的挑戰(zhàn)。為了更加有針對性地治療和預防多重耐藥腸桿菌科細菌，臨床上對于多重耐藥腸桿菌科細菌的耐藥基因表型的初步檢測顯得尤為重要。改良Hodge試驗（modified Hodge test，MHT）是美國臨床實驗室標準化協(xié)會（CLSI）在2009年推薦的檢測腸桿菌科細菌碳青霉烯酶表型的常規(guī)方法。MHT法操作簡便，不需要大型儀器，在一般檢驗科的臨床微生物室都可以開展，因此被廣泛用于產(chǎn)碳青霉烯酶腸桿菌科細菌的表型檢測。
一、實驗方法
1、以大腸桿菌ATCC 25922作為指示菌，用無菌生理鹽水將大腸桿菌ATCC 25922菌懸液調(diào)至0.5麥氏濁度，再用生理鹽水稀釋10倍。
2、將稀釋后的大腸桿菌ATCC 25922菌液均勻涂布于MH瓊脂平板上，將平板干燥3-10分鐘。
3、將美羅培南或亞胺培南或厄他培南藥敏紙片（10ug/片）置于MH瓊脂平板中心位置。
4、使用接種環(huán)挑取待測菌株或質(zhì)控菌株，以平板中心的藥敏紙片為起點，沿離心方向劃線，長度為20-25mm。
5、將平板放置于35±2°C培養(yǎng)16-20h。
二、結果判定
1、質(zhì)控菌株結果成立的情況。
2、改良Hodge試驗結果陽性：在被測菌株線與大腸桿菌ATCC 25922抑菌圈交匯處，出現(xiàn)大腸桿菌生長增強現(xiàn)象，即改良Hodge試驗結果陽性，受試菌株產(chǎn)碳青霉烯酶。
3、改良Hodge試驗結果陰性：在被測菌株線與大腸桿菌ATCC 25922抑菌圈交匯處，未出現(xiàn)大腸桿菌生長增強現(xiàn)象，即改良Hodge試驗結果陰性，受試菌株不產(chǎn)碳青霉烯酶。
注：某些受試菌株可能具有抑制大腸桿菌ATCC 25922菌生長的特性。若出現(xiàn)這種情況，在受試菌株劃線兩側(cè)可見清晰的抑制生長區(qū)。不能根據(jù)改良Hodge試驗結果對這類受試菌株是否產(chǎn)碳青霉烯酶作出判定。
結果判讀圖例：
