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幾種不常見細(xì)菌的快速鑒別方法!
中國微生物菌種查詢網(wǎng) / 2019-03-05 10:03:25

一、不常見革蘭陰性菌
1. 布氏桿菌屬
      布氏桿菌屬是一類革蘭陰性細(xì)小桿菌,牛、羊、豬等動物最易感染。人類接觸帶菌動物或食用病畜及其乳制品,均可被感染。布氏桿菌病廣泛分布世界各地,我國部分地區(qū)曾有流行。布氏桿菌屬分為羊、牛、豬、鼠、綿羊及犬布氏桿菌6個(gè)種,20個(gè)生物型。中國流行的主要是羊、牛、豬三種布氏桿菌,其中以羊布氏桿菌病最為多見。
布氏桿菌屬細(xì)菌為非抗酸性,無芽胞,無莢膜,無鞭毛,呈球桿狀(見圖1)。血瓊脂(BAP)上為透明或半透明、光滑且有光澤菌落。此細(xì)菌不在麥康凱瓊脂上生長。布氏桿菌屬細(xì)菌尿素陽性,觸酶、氧化酶陽性,而吲哚陰性。由于該菌屬細(xì)菌具有強(qiáng)的傳染性,因此一旦懷疑應(yīng)送往LRN B級參考實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確認(rèn)。
2. 空腸彎曲菌        
       空腸彎曲菌是一種人畜共患病病原菌,可以引起人和動物發(fā)生多種疾病,并且是一種食物源性病原菌,認(rèn)為是引起全世界人類細(xì)菌性腹瀉的主要原因。其致病因素包括粘附、侵襲、產(chǎn)生毒素和分子模擬機(jī)制等四個(gè)方面,通過分子模擬機(jī)制可以引起最嚴(yán)重的并發(fā)癥一格林一巴利綜合征??漳c彎曲菌可以通過產(chǎn)生細(xì)胞緊張性腸毒素、細(xì)胞毒素和細(xì)胞致死性膨脹毒素而致病??漳c彎曲菌對紅霉素、新霉素、慶大霉素、四環(huán)素、氯霉素、卡那霉素等抗生素敏感,但近年發(fā)現(xiàn)了不少耐藥菌株及多重耐藥性菌株。
       空腸彎曲菌菌體輕度彎曲似逗點(diǎn)狀。菌體一端或兩端有鞭毛,運(yùn)動活潑,在暗視野鏡下觀察似飛蠅。有莢膜,不形成芽胞。微需氧菌,在含2.5~5%氧和10% CO2的環(huán)境中生長最好,在正常大氣或無氧環(huán)境中均不能生長,最適溫度為37~42℃。本菌在普通培養(yǎng)基上難以生長,在凝固血清和血瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)36小時(shí)可見無色半透明毛玻璃樣小菌落,單個(gè)菌落呈中心凸起,周邊不規(guī)則,無溶血現(xiàn)象??漳c彎曲生化反應(yīng)不活潑,不發(fā)酵糖類,不分解尿素??蛇€原硝酸鹽,氧化酶和觸酶為陽性。能產(chǎn)生微量或不產(chǎn)生硫化氫,甲基紅和v-p試驗(yàn)陰性,枸椽酸鹽培養(yǎng)基中不生長,在彎曲菌中馬尿酸呈陽性反應(yīng)具有重要鑒定價(jià)值。
3.“HACEK”群細(xì)菌
       HACEK是指一組革蘭陰性桿菌:嗜血桿菌屬(H)、放線桿菌屬(A)、人心桿菌屬(C)、艾肯菌屬(E)、金氏桿菌屬(K)。這組微生物的共同特征是易導(dǎo)致心內(nèi)膜感染,約占全部感染性心內(nèi)膜炎的5-10%,它們是導(dǎo)致正常人群(非靜脈藥物濫用者)心內(nèi)膜炎的常見原因之一。所有這些微生物都是口咽部正常菌群的一部分,生長緩慢、喜好富二氧化碳環(huán)境。除心臟瓣膜感染,HACEK菌還導(dǎo)致其他感染:菌血癥、各類膿腫、腹膜炎、中耳炎、結(jié)膜炎、肺炎、化膿性關(guān)節(jié)炎、骨髓炎、尿路感染、傷口感染、腦膿腫、牙周感染。
       嗜血桿菌屬因在生長過程中需含有生長因子X(氯化高鐵血紅素)和(或)V(輔酶Ⅰ)的血液瓊脂而得名。本屬細(xì)菌為革蘭陰性小桿菌,無動力,具有明顯的多型性,不形成芽胞,需氧或兼性厭氧。流感嗜血桿菌是嗜血桿菌屬最重要的病原菌,鏡下呈球桿狀、長桿狀、少數(shù)為絲狀。粘液型菌株有莢膜,毒力較強(qiáng)。菌落一般為光滑型,若與金黃色葡萄球菌在BAP上共同孵育,則在葡萄球菌菌落周圍生長的流感嗜血桿菌菌落較大,這叫做“衛(wèi)星現(xiàn)象”。原因是金黃色葡萄球菌能合成較多的V因子,促進(jìn)流感嗜血桿菌的生長。
       放線桿菌屬為革蘭陰性桿菌,有時(shí)呈球形、橢圓形(見圖3)。兼性厭氧菌,無動力,無莢膜,在含血清或血液的培養(yǎng)基上生長良好,37℃培養(yǎng)2~3天后形成直徑約1mm的菌落。在肉湯培養(yǎng)液中生長呈顆粒狀。對人或動物致病的有伴放線放線桿菌、林氏放線桿菌和馬駒放線桿菌。伴放線放線桿菌因常見于人類的某些放線菌病的病灶中而得名。但也可單獨(dú)致病,如一些亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎是由本菌引起的。本屬細(xì)菌能還原硝酸鹽,不產(chǎn)生吲哚,尿素陽性。
人心桿菌是心桿菌屬內(nèi)唯一的種,是人的鼻腔和咽喉部的正常菌群,可引起心內(nèi)膜炎、尿路感染、腦膿腫和牙周炎等疾病。大部分菌株可從血液中分離而來,有的菌株也可從腦脊液中分離而來。人心桿菌為無鞭毛、無莢膜、無芽孢,并具有多形性的革蘭陰性桿菌(見圖4)。革蘭染色不易被脫色,單個(gè)存在或成對排列,有時(shí)形成短鏈或呈葡萄狀排列。該菌為兼性厭氧菌,某些菌株在初代分離時(shí)需要CO2,在生長過程中要有一定濕度,在干燥環(huán)境中不生長;在35~37 ℃均可生長,但在22 ℃或42 ℃均不生長。該菌在BAP上不溶血,經(jīng)24h 培養(yǎng)后菌落很小,48h 后可達(dá)1mm,菌落為圓形、凸起、光滑、有光澤而邊緣整齊,某些菌株的菌落可長入培養(yǎng)基中,使培養(yǎng)基表面瓊脂凹陷。麥康凱瓊脂上不生長。人心桿菌氧化酶陽性,觸酶陰性,吲哚陽性,不還原硝酸鹽。
嚙蝕艾肯菌是革蘭陰性多形性球桿菌(見圖5),有一種漂白劑的氣味,兼性厭氧,是口腔和許多其他粘膜表面的正常菌群。嚙蝕艾肯菌是人咬傷后發(fā)生的蜂窩織炎的病原體,它也是已發(fā)現(xiàn)靜脈藥物濫用者軟組織感染和心內(nèi)膜炎主要病原體。它也能導(dǎo)致各種各樣的肺部感染(如膿胸、肺炎、敗血癥栓子),類似嚴(yán)格偏性厭氣菌。
        大多數(shù)嚙蝕艾肯菌性心內(nèi)膜炎患者有潛在的生物瓣膜病變。與其他HACEK菌不同,大多數(shù)嚙蝕艾肯菌性心內(nèi)膜炎與靜脈藥物濫用有關(guān)。嚙蝕艾肯菌在培養(yǎng)基上凹陷生長,吲哚陰性,鳥氨酸陽性。
金氏桿菌屬是革蘭陰性球桿菌,有3個(gè)種:
金氏金氏桿菌、產(chǎn)吲哚金氏桿菌、去硝化金氏桿菌,只有金氏金氏桿菌引起心內(nèi)膜炎。與其他HACEK菌不同,金氏桿菌感染進(jìn)展相當(dāng)迅速。金氏金氏桿菌在BAP呈大的、光滑、不透明、白色或米色、β-溶血菌落,與腸桿菌科細(xì)菌相似,但在麥康凱瓊脂上不生長。金氏金氏桿菌觸酶陰性,氧化酶陽性,通常分離自無菌組織和體液。
4. 土拉熱弗朗西斯氏菌
       土拉熱弗朗西斯氏菌簡稱土拉弗氏菌,是引起土拉弗氏菌病(野兔熱)的病原菌。人類感染此病多因接觸患病動物而致,或攝食污染食物和吸入污染空氣所致。土拉桿菌是革蘭陰性多形性細(xì)菌,鏡下呈球狀、桿狀、豆?fàn)詈徒z狀等,無芽胞、無動力、有莢膜。該菌營養(yǎng)要求較高,在普通瓊脂培養(yǎng)基和肉湯中均不生長,只在加入
胱氨酸、半胱氨酸、血液或卵黃的培養(yǎng)基中生長,形成圓形、光滑、灰色、凸起、有粘性的菌落,在雞胚絨尿膜上也能生長,在卵黃囊中生長尤為茂盛,最適生長溫度35℃ ~37℃ 。若從動物或人體初次分離,一般需要3—5天。常用培養(yǎng)基主要有半胱氨酸葡萄糖血液瓊脂平板(Francis培養(yǎng)基)、卵黃瓊脂平板和半胱氨酸巧克力瓊脂。土拉熱弗朗西斯氏菌氧化酶陰性,觸酶陰性或弱陽性,β-內(nèi)酰胺酶陽性。由于該菌具有強(qiáng)傳染性,必須在生物安全柜中處理,一旦懷疑需送往LRN參考實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確認(rèn)。
5. 卡他莫拉菌
        卡他莫拉菌為革蘭陰性雙球菌。過去一直認(rèn)為卡他莫拉菌是對人體無致病性的上呼吸道正常寄居菌,但是,近20多年的研究發(fā)現(xiàn),該菌不僅可以引起兒童和老年人的上呼吸道感染,而且還是引起成人下呼吸道感染的重要病原菌,是兒童上頜竇炎、中耳炎、肺炎以及成人的慢性下呼吸道感染的第3位最常見致病菌,僅次于流感嗜血桿菌和肺炎鏈球菌。卡他莫拉菌在BAP上不溶血,整個(gè)菌落可推動,氧化酶、觸酶陽性,丁酸鹽、吲哚酚醋酸鹽陽性。
6. 奈瑟菌屬
       奈瑟菌屬細(xì)菌為革蘭陰性球菌,單個(gè)或成雙排列,無芽孢、無鞭毛、有菌毛,觸酶、氧化酶陽性,包括腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等9種,其中有臨床意義的致病菌為腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌。BAP上呈透亮不溶血菌落,氧化酶、γ-谷氨酰氨肽酶陽性為腦膜炎奈瑟菌。BAP上呈淺灰色不溶血菌落,氧化酶、β-半乳糖苷酶陽性為乳糖奈瑟菌。淋病奈瑟菌在巧克力瓊脂上呈小的、有光澤的菌落,通常在BAP、MH和胰大豆瓊脂上生長,氧化酶陽性,觸酶強(qiáng)陽性(30%過氧化氫),而γ-谷氨酰氨肽酶、β-半乳糖苷酶陰性。

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