培養(yǎng)基與培養(yǎng)時(shí)間對(duì)檢測(cè)水體中細(xì)菌總數(shù)的影響！
小楊 / 2019-11-06 09:44:09
我們采用4種不同培養(yǎng)基對(duì)水體中細(xì)菌進(jìn)行培養(yǎng)，比較不同培養(yǎng)基與不同培養(yǎng)時(shí)間對(duì)水體中細(xì)菌總數(shù)檢測(cè)結(jié)果的影響，現(xiàn)報(bào)告如下。
一、材料與方法
⒈培養(yǎng)基：營(yíng)養(yǎng)瓊脂、肉浸湯瓊脂、蛋白胨葡萄糖瓊脂、857培養(yǎng)基。
⒉樣品來(lái)源：1998年1O月隨機(jī)采取本市便河居民點(diǎn)生活用自來(lái)水，便河河水及本院池塘塘水各9份。
⒊方法：自來(lái)水采樣：先將采樣點(diǎn)自來(lái)水龍頭完全開(kāi)放，放水5分鐘后調(diào)水流量，常規(guī)無(wú)菌采集水樣500ml，并加入無(wú)菌的3％硫代硫酸鈉溶液0．5ml以除去殘余氯；河水與塘水采樣：先將密封狀態(tài)的無(wú)菌采樣瓶完全浸入水中后，掀開(kāi)瓶塞，取樣約500ml。按照“GB4789．2—94微生物學(xué)部分”進(jìn)行細(xì)菌總數(shù)檢測(cè)。每次以無(wú)菌方法分別吸取lml充分混勻的水樣于滅菌空平皿中，每份水樣各加8個(gè)，每2個(gè)為1組，隨即分別加入15ml滅菌并置45℃預(yù)溫的營(yíng)養(yǎng)瓊脂、肉浸湯瓊脂、蛋白胨葡萄糖瓊脂、857瓊脂并充分混勻，凝固后，置37~C培養(yǎng)24h、48h、72h、96h并分別記錄各培養(yǎng)基中菌落形成單位(CFU)均數(shù)。采用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
二、結(jié)果
⒈4種方法培養(yǎng)后CFU均數(shù)結(jié)果：24h內(nèi)4種培養(yǎng)基的CFU均數(shù)最低，隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)而增高
⒉不同時(shí)間培養(yǎng)后4種培養(yǎng)基的CFU均數(shù)的結(jié)果顯示：培養(yǎng)48h與72h、72h與96h組間CFU均數(shù)差異無(wú)顯著性；培養(yǎng)24h與48h，24h與72h、24h與96h、48h與96h各組間、CFU均數(shù)的差異有高度顯著性(P<0．01)。
2．3 4種培養(yǎng)基的CFU均數(shù)間兩兩比較：除營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基與蛋白胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基之間CY'U均數(shù)的差異無(wú)顯著性外，肉浸湯瓊脂培養(yǎng)基與營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、肉浸湯瓊脂培養(yǎng)基與蛋白胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、肉浸湯瓊脂培養(yǎng)基與857培養(yǎng)基、營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基與857培養(yǎng)基、蛋白胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基與857培養(yǎng)基、CFU均數(shù)的差異均有高度顯著性(P<0．01)。
三、討論
⒈本組4種培養(yǎng)基接種標(biāo)本后，l～4天內(nèi)CFU均數(shù)均隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)而增加，培養(yǎng)24h與48h、72h、96h之間差異顯著(P<0．01)；但培養(yǎng)48h與72h、72h與97h組問(wèn)差異無(wú)顯著性。本結(jié)果顯示：雖然培養(yǎng)時(shí)間對(duì)CF’U數(shù)的變化有直接影響，但按“GB4789．2—94微生物部分”方法培養(yǎng)48h報(bào)告結(jié)果，能準(zhǔn)確地檢測(cè)水體樣本的細(xì)菌總數(shù)。
⒉按“GB4789．2-_94微生物部分”的方法，檢測(cè)細(xì)菌總數(shù)采用營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。本實(shí)驗(yàn)采用包括營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基在內(nèi)的4種不同培養(yǎng)基進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明，不同培養(yǎng)基之間CFU均數(shù)差異顯著，且肉浸湯瓊脂培養(yǎng)基>營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基>蛋白胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基>857培養(yǎng)基。值得注意的是肉浸湯瓊脂培養(yǎng)基與營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的CY'U均數(shù)差異顯著，且培養(yǎng)至24h觀察結(jié)果時(shí)，肉浸湯瓊脂培養(yǎng)基表面的菌落較大，易辨認(rèn)，而營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上菌落較小，需培養(yǎng)48h后計(jì)數(shù)。這可能與前者用新鮮牛肉浸液配制，而后者用牛肉膏配制有關(guān)。因肉浸湯瓊脂培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)高于營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，更有利于水體樣本中細(xì)菌總數(shù)的檢測(cè)。
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