一、背景
人腦動脈血管組織提取物來自新鮮或冷凍人腦動脈血管組織可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。人腦動脈血管維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡，合成和分泌細胞因子和介質(zhì)，維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡。
腦血管結(jié)構(gòu)特點：1）腦外動脈屬于肌型動脈，內(nèi)彈力膜較厚，中膜及外膜較薄，彈力纖維較少，動脈搏動幅度較小，增厚的內(nèi)膜可緩沖動脈對管壁的沖擊，對腦起保護作用。腦外血管神經(jīng)豐富，大的血管外膜有神經(jīng)纖維束伴行，與血管收縮及舒張有關(guān)。2）腦動脈可分為中央支與皮質(zhì)支，均垂直進入腦實質(zhì)，二者在腦內(nèi)有廣泛的吻合支。3）血液與腦組織間存在血腦屏障（BBB），它由腦的連續(xù)毛細血管內(nèi)皮及其細胞間緊密連接、完整的基膜、周細胞及星形膠質(zhì)細胞腳板圍成的神經(jīng)膠質(zhì)膜構(gòu)成，內(nèi)皮是BBB的主要結(jié)構(gòu)。4）腦靜脈壁薄，既無平滑肌又無瓣膜，腦靜脈血管缺乏收縮功能。椎動脈、鎖骨下動脈與頸外動脈側(cè)支循環(huán)，包括椎動脈的寰椎動脈與頸外動脈的枕動脈吻合；鎖骨下動脈的頸深動脈與頸外動脈的枕動脈吻合；左右頸深動脈間及左右枕動脈間吻合。各腦動脈終末支吻合，包括大腦前-大腦中動脈終末支間吻合，大腦前-大腦中-大腦后動脈終末支間吻合形成的側(cè)支循環(huán)。
二、應(yīng)用
用于腦動靜脈畸形臨床病理與血管平滑肌細胞的相關(guān)生物學(xué)研究：
腦動靜脈畸形栓塞治療后的組織病理及免疫組化研究目的分析人腦動靜脈畸形（CAVM）栓塞治療后的組織病理變化。方法對11例行血管內(nèi)栓塞治療術(shù)后再作手術(shù)切除的CAVM的病理資料進行分析，并應(yīng)用增殖細胞核抗原（PCNA）、骨橋蛋白（OPN）、α—平滑肌肌動蛋白（α—SMA）、血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）等單克隆抗體進行免疫組織化學(xué)分析。
結(jié)果栓塞治療后，CAVM血管腔內(nèi)出現(xiàn)不同程度的血管內(nèi)、外的炎性反應(yīng)。表現(xiàn)為管壁及管周的淋巴細胞浸潤、管腔內(nèi)的內(nèi)膜增生和異物巨細胞聚集等。部分被栓塞的血管腔內(nèi)出現(xiàn)血管再通；免疫組化分析表明，新生內(nèi)膜中SMA陽性染色，表明血管平滑肌細胞（VSMC）參與新生內(nèi)膜的形成；OPN在新生內(nèi)膜及異物巨細胞中有強陽性表達；畸形血管團周圍組織中發(fā)現(xiàn)異常微血管，其內(nèi)皮細胞PCNA陽性染色率高，并且VEGF呈陽性染色，表明有活躍的血管生成。栓塞治療后，畸形血管周圍組織中血管內(nèi)皮細胞的增殖指數(shù)（19.6±8.4，％）高于作為對照組的出血性CAVM患者（10.1±6.2，％），差異有顯著性意義（P＜0.05）。結(jié)論栓塞材料引起血管不同程度的炎性反應(yīng)，適度的血管反應(yīng)有助于管腔的閉塞；栓塞的血管部分有再通現(xiàn)象；栓塞治療后畸形血管團周邊有微血管增生跡象。
VSMC是血管壁最主要的細胞成分，其生物學(xué)行為與CAVM的病理狀態(tài)關(guān)系密切。本研究旨在建立一個穩(wěn)定的人CAVM血管平滑肌細胞的培養(yǎng)體系，以作為體外研究的細胞學(xué)模型。
1、方法：取手術(shù)切除的人CAVM組織塊用膠原酶消化法接種于鋪有膠原底層的培養(yǎng)瓶中進行原代及傳代培養(yǎng)，并對其進行形態(tài)學(xué)觀察、免疫組化染色及透射電鏡等一系列細胞定性研究。
2、結(jié)果：接種后6-8d后可見即可見少量細胞貼壁，原代培養(yǎng)的細胞呈長梭形，具有“峰”、“谷”樣生長特征；免疫組化顯示95％以上的細胞為SMA陽性染色，而CD34陰性染色；透射電鏡檢查發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)的細胞具有肌絲及密斑等結(jié)構(gòu)。從不同角度鑒定了所獲細胞具有CAVM的特征，而且細胞純度較高。細胞可以連續(xù)傳代。
3、結(jié)論：應(yīng)用酶消化法可獲得純化的血管平滑肌細胞，細胞可以連續(xù)傳代培養(yǎng)。體外CAVM的血管平滑肌細胞可作為細胞學(xué)模型用于深入研究。
不同培養(yǎng)條件對體外腦動靜脈畸形VSMC增殖和遷移的影響目的研究不同培養(yǎng)條件對體外CAVM的血管VSMC增殖、遷移的影響。方法應(yīng)用細胞計數(shù)繪制生長曲線、MTT法檢測堿性成纖維細胞生長因子（bFGF）對體外培養(yǎng)的人CAVM的VSMC增殖的影響，并應(yīng)用用逆轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）及免疫印跡的方法分別檢測它對VSMC表達骨橋蛋白（OPN）基因和蛋白的影響；用細胞遷移模型觀察骨橋蛋白對VSMC遷移能力的影響。結(jié)果：細胞計數(shù)分析表明，bFGF作用于VSMC后，細胞增殖明顯加速。
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