一、概述
質(zhì)粒中量提取試劑盒用堿裂解法從培養(yǎng)菌中提取質(zhì)粒DNA，1h內(nèi)可完成單個樣本的抽提工作，采用獨特的溶液配方和內(nèi)毒素清除試劑，只需要幾次簡單離心去除蛋白質(zhì)、多糖、內(nèi)毒素、RNA等雜質(zhì)，獲得高質(zhì)量的質(zhì)粒DNA。純化DNA的OD260/280通常在Chemicalbook1.8左右，得到的質(zhì)?？芍苯討?yīng)用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染甚至動物體內(nèi)實驗等對DNA純度要求很高的工作中。純化后期過程均在1.5mL小離心管中操作，方法簡單，不需特殊設(shè)備，無需過柱，不用酚氯仿抽提；基本可完全回收細(xì)菌裂解釋放出的質(zhì)粒，不必?fù)?dān)心質(zhì)粒DNA的丟失。
二、特點
使用質(zhì)粒中量提取試劑盒提取純化質(zhì)粒DNA，對質(zhì)粒損傷小，即使是10kb甚至100kb以上的大型質(zhì)粒或超大型BAC/PAC質(zhì)粒，只Chemicalbook要堿裂解法能夠提取，就可以有效純化。可選擇任意小體積溶解質(zhì)粒，濃度可高達(dá)5μg/μL。超螺旋比例可高達(dá)95%，無內(nèi)毒素，轉(zhuǎn)染效果好。
三、推薦使用量及產(chǎn)量
質(zhì)粒中量提取試劑盒的推薦使用量及產(chǎn)量：高拷貝質(zhì)粒推薦使用量50-70mL，得率可多達(dá)150Chemicalbook-600μg左右；低拷貝質(zhì)?；虼笥?0kb的大質(zhì)粒，應(yīng)適當(dāng)增加菌體量，同時按比例增加P1、P2、PⅢ的用量。
四、質(zhì)粒中量提取試劑盒的使用注意事項
1、首次使用時，將試劑盒所帶的全部RNaseA加入溶液P1后（終濃度100μg/mL）置于4℃保存。如果溶液P1中RNaseA失活，提取的質(zhì)?？赡軙形⒘縍NA殘留，在溶液P1中補加RNaseA即可。
2、環(huán)境溫度低時溶液PChemicalbook2中SDS可能會析出渾濁或者沉淀，可在37℃水浴加熱幫助溶解，不要劇烈搖晃，以免形成過量泡沫。
3、避免試劑長時間暴露于空氣中產(chǎn)生揮發(fā)、氧化、pH值變化，各溶液使用后應(yīng)及時蓋緊瓶蓋。
4、提取大質(zhì)粒時操作動作要輕柔，應(yīng)該使用剪大了開口的吸頭，防止機械剪切對DNA的損壞。
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