絲狀真菌里氏木霉（Trichodermareesei）是多細(xì)胞的真核微生物，紅褐肉座菌(Hypocrea jecorina)的無性型,隸屬于叢梗孢目（Moniliales）木霉屬（Trichoderma）。其作為工業(yè)菌株用于生產(chǎn)分解不同植物材料的酶類，包括纖維素酶、半纖維素酶、蛋白酶、淀粉酶等，已有多年歷史。
一、菌種簡介
平臺編號：Bio-62587
提供形式：凍干物
拉丁屬名：Trichorderma Reesei
中文名稱：里氏木霉
屬名：Trichorderma
種名加詞：reesei
其它中心編號：=ACCC 30590=DSM 768=ATCC 13631
來源歷史：←中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心←DSMZ
收藏時間：2013.12.20
資源歸類編碼：15151913121
模式菌株：模式菌株
主要用途：分類；研究；分析檢測
具體用途：產(chǎn)纖維素酶；塑料真菌抗性檢測；產(chǎn)內(nèi)切葡聚糖酶；產(chǎn)生葡聚糖1,3-β-葡糖苷酶；β-D-1,3-葡聚糖酶；外切-1,3-β-葡聚糖酶和外切-1,3-β-葡糖苷；產(chǎn)生D-葡萄糖；酶水解纖維素產(chǎn)葡萄糖；細(xì)胞
生物危害程度：四類
致病對象：無
分離基物：棉帆布遮布
培養(yǎng)基：馬鈴薯提取液 1.0L，葡萄糖 20.0g，瓊脂 15.0g，pH自然。[注] 馬鈴薯提取液：取去皮馬鈴薯200g，切成小塊，加水1.0L煮沸30min，濾去馬鈴薯塊，將濾液補(bǔ)足至1.0L。
培養(yǎng)溫度：24℃
資源保藏類型：培養(yǎng)物
保存方法：-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
實(shí)物狀態(tài)：有實(shí)物
共享方式：公益性共享；資源純交易性共享；合作研究共享；資源交換性共享
用途：分類；研究；分析檢測；產(chǎn)纖維素酶；塑料真菌抗性檢測；產(chǎn)內(nèi)切葡聚糖酶；產(chǎn)生葡聚糖1,3-Β-葡糖苷酶；Β-D-1,3-葡聚糖酶；外切-1,3-Β-葡聚糖酶和外切-1,3-Β-葡糖苷；產(chǎn)生D-葡萄糖；酶水解纖維素產(chǎn)葡萄糖；細(xì)胞
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn)）
二、菌落特點(diǎn)
里氏木霉，菌落呈廣鋪的棉絮狀，起初為白色致密的平坦菌絲，而后邊緣出現(xiàn)淺綠的產(chǎn)孢子叢束區(qū)，反面無色。分生孢子梗菌絲的短側(cè)枝，透明，多分枝；小梗瓶形，中部彎曲；分生孢子橢圓形或長形，單細(xì)胞，透明，無色，壁光滑，成堆時綠色。
三、基因表達(dá)與功能分析
里氏木霉所產(chǎn)生的一種主要的纖維酶一纖維二糖水解酶I（cellobiohydrolase1），由單拷貝基因編碼，其產(chǎn)量可達(dá)里氏木霉胞外分泌性蛋白總量的50%[1]。由此可見，cbh1啟動子是很強(qiáng)的啟動子。因此在對里氏木霉的遺傳改造中，常利用cbh1的啟動子與終止子序列構(gòu)建載體，并利用cbh1的前導(dǎo)肽序列引導(dǎo)重組蛋白進(jìn)行分泌性表達(dá)。里氏木霉具有極好的合成蛋白和分泌蛋白的能力；并具有真核的分泌機(jī)制，很可能還具有與哺乳動物系統(tǒng)相似的蛋白修飾性能，如：高甘露糖型和N-糖基化等。由于里氏木霉具有以上優(yōu)良性能，再加之其工業(yè)化規(guī)模發(fā)酵條件已比較成熟，這些都促進(jìn)了對里氏木霉的遺傳改造，為同源或異源分泌性蛋白的產(chǎn)生提供了一條行之有效的途徑。
里氏木霉不僅具有適于蛋白生產(chǎn)的諸多優(yōu)點(diǎn)，且對人沒有毒性，在產(chǎn)酶條件下也不產(chǎn)生真菌毒素和抗生素。近年來的實(shí)踐表明，經(jīng)過基因工程手術(shù)改造的里氏木霉重組菌株是安全無害的。
四、菌種的培養(yǎng)
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。
五、使用范圍
（1）合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分完全是已知的各種化學(xué)物質(zhì)。這種培養(yǎng)基的化學(xué)成分清楚，釀酒酵母菌組成成分精確，重復(fù)性強(qiáng)，而且微生物在這類培養(yǎng)基中生長較慢。如高氏一號合成培養(yǎng)基、察氏（Czapek）培養(yǎng)基等。
（2）天然培養(yǎng)基。由天然物質(zhì)制成，如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯，前者用于培養(yǎng)霉菌，后者用于培養(yǎng)細(xì)菌。這類培養(yǎng)基的化學(xué)成分很不恒定，也難以確定，但配制方便，營養(yǎng)豐富，培養(yǎng)效果好，所以常被采用。
（3）半合成培養(yǎng)基。在天然有機(jī)物的基礎(chǔ)上適當(dāng)加入已知成分的無機(jī)鹽類，或在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分，如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要。
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