一、概述
神經(jīng)干細胞程序凍存液是神經(jīng)干細胞的無血清細胞冷凍培養(yǎng)基。該產(chǎn)品僅用于實驗室研究,不能用于臨床和家庭用途或其他用途。
質(zhì)量控制:
經(jīng)過了細菌、真菌、支原體檢測;
運輸:
采用冰袋保存運輸;
保存:
保存于2-8°C,有效期維持三年;
為了維持產(chǎn)品穩(wěn)定性,請勿反復(fù)凍融相關(guān)產(chǎn)品。
二、特點
即用型產(chǎn)品,方便快捷;
復(fù)蘇率更高達 90%,遠超普通凍存液的70%的效率;
無需程序凍存,細胞可直接置于- 80°C冰箱,省事省時。
三、凍存步驟
1、選擇處于對數(shù)生長期的細胞,按照常用的方法收集細胞于離心管中,按照培養(yǎng)細 胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數(shù)(參考數(shù)量:5×10 5 至 5×10 6 cells/mL)。
2、取相當于所需細胞數(shù)的細胞懸浮液量,置于離心管中,離心收集培養(yǎng)細胞(參考 離心條件:4℃,250 g,離心3-5 min)。
3、吸去上清液。
4、加入適量程序凍存液于離心管中,混合均勻,制成細胞混合液。
5、將離心管中的細胞混合液分裝于已標示完全的冷凍保存管中。
6、將凍存管直接置于-80℃冰箱中,24 h后移入液氮長期保存。
四、復(fù)蘇
1、從液氮中取出凍存的細胞,立即放入37℃水浴鍋中快速解凍。
2、待凍存管中細胞混合液完全融化后,立即逐滴加入少量細胞完全培養(yǎng)基于該冷凍 管中與細胞混合,再將細胞混合液從凍存管中移入含有8~10 mL該細胞完全培養(yǎng) 基的試管中,輕輕混合均勻。
3、離心收集培養(yǎng)細胞(參考離心條件:4℃,250 g,離心3~5 min),吸去上清液。
4、加入1~2 mL完全培養(yǎng)基重懸細胞。
5、按照合適的接種密度將細胞接種到細胞培養(yǎng)容器中,加入適量的已預(yù)熱的新鮮的 細胞完全培養(yǎng)基。
6、輕輕搖晃培養(yǎng)器皿,使細胞分布均勻。
7、鏡檢后放置于37℃ ,5% CO2,飽和濕度的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
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