微生物實(shí)驗(yàn)室的菌株管理與相關(guān)概念及使用方法！
小楊 / 2024-02-23 09:05:39
百歐博偉生物：菌株是微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)工作中不可缺少的重要生物資源，常用于培養(yǎng)基驗(yàn)收、試驗(yàn)對(duì)照、人員培訓(xùn)考核、方法確認(rèn)等方面的質(zhì)量控制。因此為了確保工作菌株的生物特性和純度、實(shí)現(xiàn)工作菌株方便快捷的使用及溯源，菌種的相關(guān)管理工作在微生物實(shí)驗(yàn)室就顯得尤為重要，按統(tǒng)一操作程序制備的菌株是微生物試驗(yàn)結(jié)果一致性的重要保證。今天小編就“微生物實(shí)驗(yàn)室菌株管理及使用”主題和大家做一個(gè)交流分享。
菌株管理及相關(guān)概念
1、幾個(gè)概念
標(biāo)準(zhǔn)菌株：即0代菌種，是指從官方菌種保藏機(jī)構(gòu)獲得并至少定義到屬或種的水平的菌株。實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)菌株應(yīng)有明確來(lái)源。
標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株：從國(guó)內(nèi)或國(guó)外菌種保藏機(jī)構(gòu)獲得的標(biāo)準(zhǔn)菌株經(jīng)過(guò)復(fù)活并在適宜的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)后，即為標(biāo)準(zhǔn)貯備菌株。
儲(chǔ)存菌株：儲(chǔ)存菌株通常從凍干或超低溫保存的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)存菌株進(jìn)行制備。
工作菌株：標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株或儲(chǔ)存菌株經(jīng)繼代培養(yǎng)后得到的菌株。工作菌株不可替代標(biāo)準(zhǔn)菌株。
標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物：標(biāo)準(zhǔn)菌株、標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株、工作菌株的統(tǒng)稱。
商業(yè)派生菌株：即用型與標(biāo)準(zhǔn)菌株所有相關(guān)特性等效的可以溯源的商業(yè)衍生物。常見(jiàn)的有定量工作菌株。
2、標(biāo)準(zhǔn)菌株的獲取
藥品微生物檢驗(yàn)用的試驗(yàn)菌應(yīng)為有明確來(lái)源的標(biāo)準(zhǔn)菌株，或使用與標(biāo)準(zhǔn)菌株所有相關(guān)特性等效的可以溯源的商業(yè)派生菌株。
標(biāo)準(zhǔn)菌株應(yīng)來(lái)自認(rèn)可的國(guó)內(nèi)或國(guó)外菌種保藏機(jī)構(gòu)。中國(guó)藥典2020版以及國(guó)標(biāo)中涉及的菌株主要來(lái)自于兩大菌種保藏中心：中國(guó)醫(yī)學(xué)細(xì)菌保藏管理中心（CMCC）、美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)菌種保藏中心（ATCC）。
菌株購(gòu)買(mǎi)前需根據(jù)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)需求制定采購(gòu)計(jì)劃，經(jīng)審批后，向認(rèn)可的國(guó)內(nèi)或國(guó)外的菌種保藏機(jī)構(gòu)購(gòu)買(mǎi)標(biāo)準(zhǔn)菌株。標(biāo)準(zhǔn)菌株到達(dá)實(shí)驗(yàn)室后，菌種管理人應(yīng)檢查其名稱、數(shù)量以及每一支的完整性，同時(shí)將菌種的所有信息填寫(xiě)記錄（包括菌種名稱、編號(hào)、數(shù)量、代數(shù)、來(lái)源、接收日期、接收人等），并將其貯存在規(guī)定溫度的冰箱里。
3、標(biāo)準(zhǔn)菌株的復(fù)蘇、復(fù)壯和保存
標(biāo)準(zhǔn)菌株的復(fù)蘇、復(fù)壯或培養(yǎng)物的制備應(yīng)按供應(yīng)商提供的說(shuō)明或按已驗(yàn)證的方法進(jìn)行。復(fù)蘇、復(fù)壯應(yīng)選擇營(yíng)養(yǎng)成分豐富且全面的培養(yǎng)基（例如：TSA/TSB/NA/NB/SDB/SDA等），一般不使用選擇性較強(qiáng)的培養(yǎng)基；特殊的一些菌株在普通的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)不好，可能還需添加生長(zhǎng)因子。
標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株應(yīng)進(jìn)行純度和特性確認(rèn)。純度確認(rèn)包括：平板劃線查看菌落形態(tài)、革蘭氏染色、顯微鏡觀察菌體形態(tài)等；關(guān)鍵特性確認(rèn)可選擇：特征生化反應(yīng)確認(rèn)、試劑盒鑒定、菌種鑒定儀鑒定等。需要注意的是，從開(kāi)啟、復(fù)蘇、復(fù)壯到純度和特性的確認(rèn)，都應(yīng)做好實(shí)驗(yàn)記錄。
標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株保存時(shí)，可將培養(yǎng)物等份懸浮于抗冷凍的培養(yǎng)基中，并分裝于小瓶中，藥典建議采用低溫冷凍干燥、液氮貯存、超低溫冷凍（低于-30℃）等方法保存。低于-70℃或低溫冷凍干燥方法可以延長(zhǎng)菌種保存時(shí)間。菌種應(yīng)設(shè)專人管理，菌種保藏的地點(diǎn)應(yīng)采取一定的措施使非管理者不能輕易獲取，例如加鎖保管，雙人保管等。
標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株可用于制備每月或每周1次轉(zhuǎn)種的工作菌株。冷凍菌種一旦解凍轉(zhuǎn)種制備工作菌株后，不得重新冷凍和再次使用。
從保藏機(jī)構(gòu)獲取的凍干菌種為0代菌種，每轉(zhuǎn)接一次增加一代（1代是指將活的培養(yǎng)物接種到微生物生長(zhǎng)的新鮮培養(yǎng)基中培養(yǎng)，任何形式的轉(zhuǎn)種均被認(rèn)為傳代一次），工作菌株的傳代次數(shù)應(yīng)嚴(yán)格控制，不得超過(guò)5代，以防止過(guò)度的傳代增加菌株變異的風(fēng)險(xiǎn)。
微生物菌種查詢網(wǎng)在滿足的不同企業(yè)的需要方面，站在了專業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的前沿，有技術(shù)的支撐，有專業(yè)品質(zhì)保證的可靠性標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)在整體的信息權(quán)威與市場(chǎng)相關(guān)服務(wù)配套方面，滿足不同需求的客戶，放心進(jìn)行選擇的需要。ATCC菌種有資源的界定，在工業(yè)企業(yè)中應(yīng)用，對(duì)于相關(guān)的管理標(biāo)準(zhǔn)與技術(shù)性要求，也同樣有較高專業(yè)的特色，所以從根本上來(lái)說(shuō)，要保證有更可靠的實(shí)用意義，還必須要考慮的重點(diǎn)，就在于擁有專業(yè)權(quán)威的基礎(chǔ)，可以帶給實(shí)踐菌種服務(wù)于生產(chǎn)很好的基礎(chǔ)。
下載附件
上一篇：微生物殺蟲(chóng)劑的特點(diǎn)與分類(lèi)及其他殺蟲(chóng)細(xì)菌！
下一篇：微生物基本知識(shí)：環(huán)境監(jiān)測(cè)常見(jiàn)問(wèn)題及解答！