指狀青霉：主要用于病原菌及可引起柑桔綠霉病
小楊 / 2024-04-18 09:09:19
指狀青霉是家養(yǎng)/栽培，屬于指狀青霉屬。菌落絨狀，暗黃綠色，后變橄欖灰，有特殊的香味；分生孢子梗短，帚狀枝大而不規(guī)則；產(chǎn)孢瓶體在不同的高度上形成；分生孢子卵形至圓柱形。侵害柑橘果實,引起綠霉病。
一、菌種簡介
提供形式：斜面培養(yǎng)物
英文名稱：Penicillium digitatum
屬名：Penicillium
種名加詞：digitatum
其它保藏中心編號：
來源歷史：←中國農(nóng)科院生防所
原產(chǎn)國：中國
資源歸類編碼：15151913115
模式菌株：非模式菌株
主要用途：a:4:{i:0;s:4:分類;i:1;s:4:研究;i:2;s:4:教學;i:3;s:8:分析檢測;}
具體用途：病原菌，可引起柑桔綠霉病
生物危害程度：四類
致病對象：植物
分離基物：蘆柑
采集地：福建永春
培養(yǎng)基編號1：13或14
資源保藏類型：a:1:{i:0;s:6:培養(yǎng)物;}
保存方法：a:3:{i:0;s:14:真空冷凍干燥法;i:1;s:8:礦物油法;i:2;s:10:定期移植法;}
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用途：病原菌，可引起柑桔綠霉病
注意事項：僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準）
二、培養(yǎng)方法
1、是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（種）、原種（二種）和栽培種（三種）三。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在定條件下，經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時間。所得孢子還需進步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量般在10%～20%。
三、實驗內(nèi)容
1、稱量→溶化→調(diào)pH→過濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無菌檢查
2、干熱滅菌：裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開箱取物
3、高壓蒸汽滅菌：加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無菌檢查
4、過濾除菌：組裝滅菌→連接→壓濾→無菌檢查→清洗滅菌
四、保存方法
1、傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣。
2、液體石蠟覆蓋保存法：該法較種方法保存菌種的時間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。
3、懸液保存法：
①蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。
②糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。
4、載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。
五、注意事項
1) 首次活化，用盡量少的復水液溶解，接種在 5ml 的液體培養(yǎng)基中，靜止培養(yǎng)，如有不明白之處，請務必先咨詢我單位技術人員，避免不必要的損失；二次接種量要多，固體斜面培養(yǎng)基水分要少才能讓菌體長得比較明顯，液體培養(yǎng)要靜止培養(yǎng)；
2）微生物菌種應保藏于低溫、清潔干燥的地方，室溫放置時間過長會導致菌種衰退；
3）菌種操作應在無菌條件下進行；轉(zhuǎn)種完畢，應經(jīng)滅菌再做丟棄處理；
4）應根據(jù)菌種狀況及時轉(zhuǎn)接，凍干菌種保藏時間通常為 2-25 年；
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