制作西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基時(shí)，瓊脂的作用是什么？
小楊 / 2025-09-03 09:30:43
百歐博偉生物：在
西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基的制作中，瓊脂（Agar）的核心作用是作為凝固劑，通過物理狀態(tài)的改變?yōu)槲⑸锷L提供固體支撐環(huán)境，同時(shí)不影響培養(yǎng)基的化學(xué)性質(zhì)和微生物的生理代謝（如碳源、氮源的利用），具體功能可從以下 3 點(diǎn)展開：
1、提供固體生長基質(zhì)，便于觀察菌落形態(tài)與生長狀態(tài)
西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基（需制成斜面使用），而瓊脂是實(shí)現(xiàn)“液體→固體”轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵成分：
瓊脂在常溫下（約 40℃以下）呈凝膠狀，能將培養(yǎng)基固定為固體形態(tài)，使接種的細(xì)菌（如腸道革蘭氏陰性桿菌）在其表面或淺層生長，形成可觀察的菌落（而非在液體中分散生長）；
實(shí)驗(yàn)者可通過觀察斜面上是否有菌落生長（判斷細(xì)菌能否利用檸檬酸鹽作為唯一碳源），以及菌落的大小、形態(tài)、邊緣特征等，輔助判斷細(xì)菌種類，這是液體培養(yǎng)基無法實(shí)現(xiàn)的。
2、維持培養(yǎng)基成分穩(wěn)定，確保試驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確
瓊脂具有化學(xué)惰性，在常規(guī)培養(yǎng)條件（如 36±1℃的培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)基的 pH 6.8±0.2 環(huán)境）下，自身不被細(xì)菌分解利用，也不與培養(yǎng)基中的其他關(guān)鍵成分（如唯一碳源檸檬酸鈉、唯一氮源磷酸二氫銨、pH 指示劑溴麝香草酚藍(lán)等）發(fā)生化學(xué)反應(yīng)：
若使用其他可被分解的凝固劑（如明膠，會被某些細(xì)菌的 gelatinase 分解），可能干擾“細(xì)菌是否利用檸檬酸鹽”的判斷（如明膠被分解可能被誤判為細(xì)菌利用了碳源）；
瓊脂的穩(wěn)定性可確保培養(yǎng)基中“檸檬酸鹽作為唯一碳源”的設(shè)定不被破壞，從而通過后續(xù) pH 變化（溴麝香草酚藍(lán)由綠變藍(lán)）準(zhǔn)確反映細(xì)菌的代謝能力，保證試驗(yàn)結(jié)果的可靠性。
3、便于制作斜面，優(yōu)化細(xì)菌生長環(huán)境與操作便利性
西蒙氏檸檬酸鹽試驗(yàn)需將培養(yǎng)基制成斜面（而非平板），瓊脂的凝固特性使其能穩(wěn)定維持斜面形態(tài)：
瓊脂加熱溶解后（約 95℃以上）呈液體狀態(tài)，分裝到試管后傾斜放置，冷卻凝固后即可形成斜面，增大了細(xì)菌的生長表面積，利于細(xì)菌充分接觸營養(yǎng)成分；
斜面形態(tài)也便于接種操作（用接種環(huán)挑取菌苔劃線接種），且培養(yǎng)過程中不易污染，后續(xù)觀察（如培養(yǎng)基顏色變化、菌落生長情況）也更直觀。
綜上，瓊脂在
西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基中僅發(fā)揮“物理凝固”作用，不參與化學(xué)代謝，是確保該培養(yǎng)基成為固體、可觀察、結(jié)果準(zhǔn)確的核心輔料。
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