藥檢中金黃色葡萄球菌檢測結(jié)果判斷的核心依據(jù)與判斷標(biāo)準(zhǔn)！
小楊 / 2025-09-13 09:57:57
藥檢中
金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）的檢測結(jié)果判斷需嚴(yán)格依據(jù)《中國藥典》（現(xiàn)行版）及相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)合增菌培養(yǎng)、分離鑒別、生化反應(yīng)及對照試驗(yàn)的結(jié)果綜合判定，具體標(biāo)準(zhǔn)如下：
一、結(jié)果判斷的核心依據(jù)
檢測流程需依次通過增菌培養(yǎng)、分離培養(yǎng)、形態(tài)學(xué)觀察、生化試驗(yàn)四個關(guān)鍵環(huán)節(jié)，且陽性對照和陰性對照必須符合要求，否則試驗(yàn)結(jié)果無效。
二、分步結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)
1、增菌培養(yǎng)結(jié)果初篩
增菌培養(yǎng)基：7.5% 氯化鈉肉湯或亞碲酸鈉肉湯（30~35℃培養(yǎng) 18~24 小時，必要時延長至 48 小時）。
判斷：若增菌液出現(xiàn)混濁（提示可能有菌生長），需進(jìn)行下一步分離培養(yǎng)；若增菌液澄清（無明顯生長），需結(jié)合對照試驗(yàn)進(jìn)一步確認(rèn)（如陽性對照生長正常，可初步判定供試品未檢出）。
2、分離培養(yǎng)結(jié)果鑒別
選擇培養(yǎng)基：甘露醇氯化鈉瓊脂（MSA）或血瓊脂培養(yǎng)基（30~35℃培養(yǎng) 18~24 小時）。
典型菌落特征：
MSA 培養(yǎng)基：菌落圓形、凸起、邊緣整齊、表面光滑，直徑 1~2mm，因發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸，菌落周圍培養(yǎng)基呈黃色（與不發(fā)酵甘露醇的
表皮葡萄球菌等區(qū)分）。
血瓊脂培養(yǎng)基：菌落呈金黃色、圓形、凸起，周圍出現(xiàn) β- 溶血環(huán)（完全透明的溶血區(qū)）。
判斷：若出現(xiàn)上述典型菌落，進(jìn)入生化鑒定；若無菌落生長或菌落不符合典型特征，需結(jié)合后續(xù)試驗(yàn)排除。
3、生化試驗(yàn)結(jié)果確認(rèn)（關(guān)鍵判定指標(biāo)）
（1）革蘭染色與鏡檢
結(jié)果：革蘭陽性球菌，呈葡萄串狀排列（無芽胞，無鞭毛）。
排除：若為革蘭陰性菌或鏈狀排列的球菌（如
鏈球菌），可排除。
（2）凝固酶試驗(yàn)（必做，金標(biāo)準(zhǔn)）
方法：取可疑菌落接種于兔血漿中，37℃培養(yǎng) 3~4 小時（最長不超過 24 小時）。
結(jié)果：血漿凝固（呈膠凍狀，倒置試管不流動）為陽性；未凝固為陰性。
（3）觸酶試驗(yàn)
方法：取菌落滴加 3% 過氧化氫溶液。
結(jié)果：產(chǎn)生大量氣泡（陽性）。
意義：區(qū)分葡萄球菌（陽性）與鏈球菌（陰性）。
（4）甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)
結(jié)果：在甘露醇氯化鈉培養(yǎng)基中發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸，使培養(yǎng)基 pH 降低，指示劑變色（如酚紅由紅變黃）。
4、對照試驗(yàn)結(jié)果要求
陽性對照：
金黃色葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株（如
ATCC 25923）在增菌、分離及生化試驗(yàn)中均應(yīng)生長并符合典型特征（如凝固酶陽性），確保試驗(yàn)系統(tǒng)有效。
陰性對照：稀釋劑、培養(yǎng)基空白及陰性對照菌（如
表皮葡萄球菌）應(yīng)無相應(yīng)陽性反應(yīng)（如凝固酶陰性），排除污染或試劑干擾。
三、最終結(jié)果判定
滿足以下全部條件：
增菌液混濁，分離培養(yǎng)出現(xiàn)典型菌落（MSA 黃色菌落或血瓊脂 β- 溶血環(huán)）；
革蘭染色為葡萄串狀革蘭陽性球菌；
凝固酶試驗(yàn)陽性；
觸酶試驗(yàn)陽性；
陽性對照正常生長，陰性對照無干擾。
符合以下任一條件（且對照試驗(yàn)有效）：
增菌液澄清，分離培養(yǎng)無典型菌落；
雖有菌落生長，但革蘭染色、凝固酶試驗(yàn)等關(guān)鍵指標(biāo)不符合（如凝固酶陰性）；
生化試驗(yàn)結(jié)果與典型特征不一致，且經(jīng)進(jìn)一步驗(yàn)證（如耐熱核酸酶試驗(yàn)陰性）確認(rèn)非目標(biāo)菌。
四、注意事項(xiàng)
若出現(xiàn)“非典型菌落 + 部分生化陽性”（如凝固酶弱陽性），需通過補(bǔ)充試驗(yàn)（如耐熱核酸酶試驗(yàn)、SPA 檢測或 PCR 擴(kuò)增 nuc 基因）進(jìn)一步確認(rèn)，避免漏判或誤判。
試驗(yàn)過程需嚴(yán)格無菌操作，防止交叉污染導(dǎo)致假陽性；若對照試驗(yàn)失敗，需重新檢測。
以上標(biāo)準(zhǔn)確保了
金黃色葡萄球菌檢測的特異性和準(zhǔn)確性，符合藥品微生物質(zhì)量控制的嚴(yán)格要求。
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