糖發(fā)酵試驗(yàn)培養(yǎng)基的核心組成與作用及應(yīng)用場(chǎng)景與意義！
小楊 / 2025-09-22 09:05:23
糖發(fā)酵試驗(yàn)培養(yǎng)基是微生物生化鑒定中最基礎(chǔ)的培養(yǎng)基之一，核心作用是通過(guò)檢測(cè)微生物能否分解特定糖類（如葡萄糖、乳糖）并產(chǎn)酸產(chǎn)氣，來(lái)區(qū)分不同種類的細(xì)菌，廣泛用于腸道桿菌等微生物的初步鑒定。
一、培養(yǎng)基的核心組成與作用
核心成分 作用說(shuō)明
基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 如蛋白胨、牛肉膏，提供細(xì)菌生長(zhǎng)所需的氮源、維生素和礦物質(zhì)，保證細(xì)菌能正常繁殖。
特定糖類 試驗(yàn)?zāi)繕?biāo)糖（如葡萄糖、乳糖、蔗糖等），是細(xì)菌分解的底物，不同細(xì)菌對(duì)糖類的分解能力不同。
pH 指示劑 常用溴甲酚紫，酸性條件下（細(xì)菌產(chǎn)酸）呈黃色，中性/堿性條件下呈紫色，直觀顯示是否產(chǎn)酸。
水 溶解所有成分，形成液體培養(yǎng)基（也可添加瓊脂制成半固體培養(yǎng)基，用于觀察動(dòng)力，但糖發(fā)酵試驗(yàn)以液體為主）。
二、常用糖類種類與適用場(chǎng)景
不同細(xì)菌對(duì)糖類的分解能力具有特異性，因此需根據(jù)鑒定目標(biāo)選擇對(duì)應(yīng)的“糖發(fā)酵培養(yǎng)基”，常見類型及適用場(chǎng)景如下：
葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基：最通用的基礎(chǔ)配方，幾乎所有能分解糖類的細(xì)菌（如
大腸桿菌、
沙門氏菌）都能分解葡萄糖，主要用于區(qū)分“能分解葡萄糖”和“不能分解葡萄糖”的細(xì)菌（如結(jié)核分枝桿菌不能分解葡萄糖）。
乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基：用于區(qū)分腸道桿菌的關(guān)鍵配方，如
大腸桿菌能分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，而
沙門氏菌、
志賀氏菌不能分解乳糖，是糞便標(biāo)本中“致病菌”與“正常菌群”初步篩選的核心試驗(yàn)。
蔗糖/麥芽糖發(fā)酵培養(yǎng)基：輔助鑒別試驗(yàn)，例如
變形桿菌能分解蔗糖，而痢疾桿菌不能；
鏈球菌對(duì)麥芽糖的分解能力可用于區(qū)分不同鏈球菌種類。
三、試驗(yàn)操作步驟（以液體培養(yǎng)基為例）
1、培養(yǎng)基準(zhǔn)備：
按配方稱取對(duì)應(yīng)成分（如葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基干粉），加入蒸餾水溶解，分裝到含 Durham 管的試管中（每管約 5-10mL，確保 Durham 管內(nèi)無(wú)氣泡）。
121℃高壓蒸汽滅菌 15 分鐘，冷卻后備用（滅菌后培養(yǎng)基呈紫色或紅色，Durham 管內(nèi)充滿培養(yǎng)基）。
2、接種與培養(yǎng)：
用無(wú)菌接種環(huán)挑取純培養(yǎng)的細(xì)菌菌落，接入糖發(fā)酵培養(yǎng)基中，輕輕搖勻（避免 Durham 管移位）。
標(biāo)記試管（注明細(xì)菌名稱、糖類種類、接種日期），放入 37℃恒溫培養(yǎng)箱，培養(yǎng) 18-24 小時(shí)（部分細(xì)菌需延長(zhǎng)至 48 小時(shí)）。
3、結(jié)果觀察與判斷：
觀察培養(yǎng)基顏色變化和 Durham 管內(nèi)是否有氣泡，結(jié)果分為三種類型：
產(chǎn)酸產(chǎn)氣（+⊕）：培養(yǎng)基由紫色變?yōu)辄S色（產(chǎn)酸），Durham 管內(nèi)出現(xiàn)氣泡（產(chǎn)氣），如大腸桿菌分解葡萄糖。
產(chǎn)酸不產(chǎn)氣（+）：培養(yǎng)基變黃色（產(chǎn)酸），Durham 管內(nèi)無(wú)氣泡（不產(chǎn)氣），如傷寒沙門氏菌分解葡萄糖。
不產(chǎn)酸不產(chǎn)氣（-）：培養(yǎng)基仍為紫色（不產(chǎn)酸），Durham 管內(nèi)無(wú)氣泡（不產(chǎn)氣），如痢疾桿菌分解乳糖。
四、關(guān)鍵注意事項(xiàng)
1、培養(yǎng)基質(zhì)量控制：
滅菌后需檢查培養(yǎng)基是否澄清（無(wú)沉淀、無(wú)渾濁），Durham 管是否完好；每批次需做空白對(duì)照（不接種細(xì)菌），確保培養(yǎng)后顏色不變，排除培養(yǎng)基自身污染。
糖類易受熱破壞，若單獨(dú)添加糖類（如蔗糖），需先將基礎(chǔ)培養(yǎng)基滅菌，冷卻至 50℃左右再加入無(wú)菌糖類溶液，避免高溫導(dǎo)致糖類分解。
2、操作無(wú)菌性：
接種過(guò)程需在無(wú)菌操作臺(tái)進(jìn)行，避免雜菌污染導(dǎo)致結(jié)果誤判；接種環(huán)需徹底滅菌（灼燒至紅熱，冷卻后使用）。
3、結(jié)果解讀要點(diǎn)：
若培養(yǎng)時(shí)間不足，可能出現(xiàn)“假陰性”（細(xì)菌未充分分解糖類）；若培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)菌可能分解培養(yǎng)基中的蛋白胨產(chǎn)堿，導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色回升（需結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)時(shí)間判斷）。
不同細(xì)菌對(duì)糖類的分解能力存在差異，需結(jié)合細(xì)菌的分類學(xué)特征綜合判斷（如革蘭氏陰性桿菌與革蘭氏陽(yáng)性球菌的糖發(fā)酵模式不同）。
五、應(yīng)用場(chǎng)景與意義
糖發(fā)酵試驗(yàn)是微生物鑒定的“基礎(chǔ)試驗(yàn)”，主要用于：
臨床微生物檢測(cè)：區(qū)分腸道致病菌（如
沙門氏菌、
志賀氏菌）與非致病菌（如
大腸桿菌），為感染性疾病診斷提供依據(jù)。
食品微生物檢測(cè)：檢測(cè)食品中是否存在致病性細(xì)菌（如通過(guò)乳糖發(fā)酵試驗(yàn)篩選食品中的大腸桿菌群）。
環(huán)境微生物檢測(cè)：分析環(huán)境樣品（如水、土壤）中的微生物群落結(jié)構(gòu)，判斷微生物的代謝特征。
北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司擁有對(duì)菌種、細(xì)胞、培養(yǎng)基、配套試劑等產(chǎn)品需求者的極優(yōu)質(zhì)服務(wù)，對(duì)購(gòu)買項(xiàng)目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到最終售后的確保項(xiàng)目準(zhǔn)確到位，都有相關(guān)人士進(jìn)行維護(hù),確保您在
微生物菌種查詢網(wǎng)中獲得最優(yōu)質(zhì)服務(wù)！也正因?yàn)榇?，北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司與國(guó)內(nèi)外多家研制單位、生物制藥、第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)和科研院所院校、化工企業(yè)有著良好、長(zhǎng)期和穩(wěn)定的合作關(guān)系！
下載附件
上一篇：弧菌分離培養(yǎng)基的使用注意事項(xiàng)有哪些？體現(xiàn)在哪些方面？
下一篇：實(shí)驗(yàn)中如何保證小鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性？