培養(yǎng)基制備時(shí)不同浸粉選擇的類型與邏輯及使用注意事項(xiàng)!
小楊 / 2025-09-29 09:02:02
百歐博偉生物:在微生物培養(yǎng)基制備中,浸粉(Extract Powder)是提供微生物生長(zhǎng)所需氮源、維生素、生長(zhǎng)因子、礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的核心原料,其種類選擇直接決定培養(yǎng)基適用性(如目標(biāo)微生物類型、培養(yǎng)目的、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)等)。不同浸粉的營(yíng)養(yǎng)成分、適用場(chǎng)景差異顯著,需結(jié)合具體需求精準(zhǔn)選擇,以下從核心浸粉類型、選擇邏輯、注意事項(xiàng)三方面詳細(xì)說(shuō)明:
一、常見浸粉類型及核心適用場(chǎng)景
不同浸粉由特定原料(動(dòng)物組織、植物、微生物等)經(jīng)提取、濃縮、干燥制成,營(yíng)養(yǎng)特點(diǎn)與適用微生物高度匹配,以下為實(shí)驗(yàn)室及工業(yè)中最常用的 8 類浸粉:
浸粉類型 原料來(lái)源 核心營(yíng)養(yǎng)成分 適用場(chǎng)景與微生物 典型應(yīng)用培養(yǎng)基
牛肉浸粉 牛肌肉、內(nèi)臟等組織 水溶性氮源、B 族維生素、肌酸、 需基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)的異養(yǎng)微生物,尤其細(xì)菌;不適用于嚴(yán)格厭氧菌或營(yíng)養(yǎng)需求高的真菌 營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA)、LB 培養(yǎng)基
酵母浸粉 釀酒酵母 豐富 B 族維生素、核苷酸、氨基酸、生物素 需生長(zhǎng)因子的微生物:酵母菌、乳酸菌、放線菌,及基因工程菌;促進(jìn)細(xì)胞快速增殖 LB 培養(yǎng)基、MRS 培養(yǎng)基、YPD 培養(yǎng)基
麥芽浸粉 發(fā)芽大麥 碳水化合物、氨基酸、B 族維生素、植物生長(zhǎng)因子 真菌,尤其需碳水化合物的絲狀真菌;不適用于以蛋白質(zhì)為主要碳源的細(xì)菌 麥芽汁瓊脂(MEA)、PDA 培養(yǎng)基
蛋白胨 動(dòng)物蛋白或植物蛋白經(jīng)酶解 小分子肽、游離氨基酸、少量礦物質(zhì) 絕大多數(shù)異養(yǎng)微生物,根據(jù)蛋白來(lái)源細(xì)分適用場(chǎng)景:胰蛋白胨:腸道細(xì)菌;大豆蛋白胨:革蘭氏陰性菌、放線菌,無(wú)動(dòng)物源風(fēng)險(xiǎn);營(yíng)養(yǎng)肉湯(NB)、SS 培養(yǎng)基、TSA 培養(yǎng)基
腦心浸粉 牛腦、牛心組織 高濃度氮源、B 族維生素、輔酶、生長(zhǎng)因子 營(yíng)養(yǎng)需求復(fù)雜的微生物:苛養(yǎng)菌、厭氧菌、真菌;臨床分離菌培養(yǎng) BHI 瓊脂、BHI 肉湯(厭氧菌培養(yǎng))
馬鈴薯浸粉 新鮮馬鈴薯 碳水化合物、維生素 C、植物生長(zhǎng)因子 真菌、光合細(xì)菌;低營(yíng)養(yǎng)需求微生物,避免細(xì)菌過(guò)度生長(zhǎng) PDA 培養(yǎng)基(馬鈴薯葡萄糖瓊脂)、光合細(xì)菌培養(yǎng)基
血清浸粉 牛血清 蛋白質(zhì)、生長(zhǎng)因子、激素、脂質(zhì) 極端苛養(yǎng)菌(如支原體、衣原體)、動(dòng)物細(xì)胞(部分培養(yǎng)基);需模擬體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)環(huán)境 支原體培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)基添加劑
植物浸粉 特定植物種子/組織 植物蛋白、碳水化合物、植物激素、次生代謝物 植物源微生物、素食級(jí)發(fā)酵(如植物乳桿菌) 根瘤菌培養(yǎng)基、植物內(nèi)生菌分離培養(yǎng)基
二、浸粉選擇的核心邏輯(4 步?jīng)Q策法)
1、明確“目標(biāo)微生物類型”—— 最基礎(chǔ)依據(jù)
不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需求差異是選擇浸粉的核心:
細(xì)菌:
普通異養(yǎng)菌(
大腸桿菌、
枯草桿菌):選牛肉浸粉 + 蛋白胨(基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng));
苛養(yǎng)菌(
鏈球菌、
嗜血桿菌):選腦心浸粉、血清浸粉(高營(yíng)養(yǎng) + 生長(zhǎng)因子);
乳酸菌:選酵母浸粉 + 蛋白胨(需 B 族維生素、核苷酸)。
真菌:
酵母菌:選酵母浸粉、麥芽浸粉(碳水 + B 族維生素);
霉菌(
曲霉、
青霉):選麥芽浸粉、馬鈴薯浸粉(高碳水 + 植物生長(zhǎng)因子)。
厭氧菌:
選腦心浸粉、庖肉浸粉(高氮源 + 還原環(huán)境適配,需配合厭氧袋使用)。
特殊微生物:
支原體(無(wú)細(xì)胞壁):選血清浸粉(需脂質(zhì)、生長(zhǎng)因子);
光合細(xì)菌:選馬鈴薯浸粉 + 碳酸氫鹽(低氮 + 碳水)。
2、匹配“培養(yǎng)目的”—— 決定浸粉的“營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)度”
增殖培養(yǎng)(大量擴(kuò)菌):選高營(yíng)養(yǎng)浸粉(如酵母浸粉、腦心浸粉),促進(jìn)細(xì)胞快速分裂;
分離純化(從樣品中挑單菌落):選中等營(yíng)養(yǎng)浸粉(如牛肉浸粉 + 蛋白胨、麥芽浸粉),避免雜菌過(guò)度抑制目標(biāo)菌;
鑒定 / 檢測(cè)(如微生物計(jì)數(shù)、生化試驗(yàn)):選標(biāo)準(zhǔn)化浸粉(如胰蛋白胨、TSA 配套浸粉),確保結(jié)果重復(fù)性;
發(fā)酵生產(chǎn)(如酶、抗生素):選成本低、營(yíng)養(yǎng)穩(wěn)定的浸粉(如大豆蛋白胨、酵母浸粉),兼顧產(chǎn)量與經(jīng)濟(jì)性。
3、規(guī)避“特殊限制條件”—— 避免實(shí)驗(yàn) / 生產(chǎn)失敗
無(wú)動(dòng)物源需求:醫(yī)療、食品領(lǐng)域需避免動(dòng)物源成分,禁用牛肉浸粉、腦心浸粉,選大豆蛋白胨、植物浸粉、酵母浸粉;
低營(yíng)養(yǎng)需求:分離寡營(yíng)養(yǎng)微生物(如海洋寡營(yíng)養(yǎng)菌),禁用高營(yíng)養(yǎng)浸粉,選稀釋的馬鈴薯浸粉、低濃度酵母浸粉;
pH 敏感性:部分浸粉(如牛肉浸粉)pH 偏堿性(7.2-7.4),若目標(biāo)菌喜酸性(如乳酸菌,pH 5.5-6.0),需搭配酸性浸粉(如馬鈴薯浸粉)或調(diào)整 pH。
4、參考“標(biāo)準(zhǔn)方法/文獻(xiàn)”—— 確保科學(xué)性與重復(fù)性
若為標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)(如食品微生物檢測(cè)、臨床菌株鑒定),需嚴(yán)格遵循行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)推薦的浸粉:
例 1:GB 4789.4-2020(沙門氏菌檢測(cè))指定用胰蛋白胨、乳糖、牛肉浸粉配制增菌液;
例 2:乳酸菌計(jì)數(shù)(GB 4789.35-2016)指定用MRS 培養(yǎng)基(含酵母浸粉、蛋白胨、葡萄糖);
例 3:真菌分離常用PDA 培養(yǎng)基(馬鈴薯浸粉 + 葡萄糖 + 瓊脂),為實(shí)驗(yàn)室通用標(biāo)準(zhǔn)配方。
三、選擇與使用的注意事項(xiàng)
1、避免“營(yíng)養(yǎng)過(guò)剩”或“營(yíng)養(yǎng)不足”:
營(yíng)養(yǎng)過(guò)剩(如用腦心浸粉培養(yǎng)普通大腸桿菌):易導(dǎo)致雜菌污染、細(xì)菌黏液過(guò)多,影響單菌落觀察;
營(yíng)養(yǎng)不足(如用牛肉浸粉培養(yǎng)鏈球菌):目標(biāo)菌生長(zhǎng)緩慢或不生長(zhǎng),導(dǎo)致假陰性結(jié)果。
2、關(guān)注浸粉“純度與批次穩(wěn)定性”:
優(yōu)先選擇正規(guī)廠家產(chǎn)品,避免雜質(zhì)(如重金屬、抗生素殘留)影響微生物生長(zhǎng);
不同批次浸粉的營(yíng)養(yǎng)成分可能有差異,大規(guī)模實(shí)驗(yàn)前需做“批次驗(yàn)證”(用同一菌株測(cè)試生長(zhǎng)曲線)。
搭配使用原則:?jiǎn)我唤弁鶡o(wú)法滿足所有營(yíng)養(yǎng)需求,需按“氮源 + 碳源 + 生長(zhǎng)因子”組合:
例:LB 培養(yǎng)基(大腸桿菌培養(yǎng))= 酵母浸粉(生長(zhǎng)因子)+ 胰蛋白胨(氮源)+ 氯化鈉(滲透壓)+ 葡萄糖(碳源);
例:MRS 培養(yǎng)基(乳酸菌)= 酵母浸粉(B 族維生素)+ 蛋白胨(氮源)+ 葡萄糖(碳源)+ 乙酸鈉(pH 緩沖)。
替代方案的合理性:若某浸粉缺貨,需選擇成分相似的替代:
牛肉浸粉缺貨:可用蛋白胨 + 少量酵母浸粉(補(bǔ)充氮源與維生素);
馬鈴薯浸粉缺貨:可用麥芽浸粉(1:1 稀釋)(碳水化合物相似);
禁止用高營(yíng)養(yǎng)浸粉替代低營(yíng)養(yǎng)浸粉(如腦心浸粉替代馬鈴薯浸粉培養(yǎng)霉菌,易污染細(xì)菌)。
四、總結(jié)
浸粉選擇的核心是“微生物需求 - 培養(yǎng)目的 - 限制條件”三者匹配:先明確目標(biāo)微生物的營(yíng)養(yǎng)偏好,再根據(jù)培養(yǎng)是“增殖 / 分離 / 檢測(cè)”確定營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)度,最后規(guī)避無(wú)動(dòng)物源、pH 等限制,必要時(shí)參考標(biāo)準(zhǔn)配方或文獻(xiàn)。合理選擇浸粉可確保微生物高效生長(zhǎng),同時(shí)避免實(shí)驗(yàn)誤差或生產(chǎn)損失。
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