工作菌株特性穩(wěn)定的核心是什么，具體體現(xiàn)在哪些方面？
小楊 / 2025-12-22 09:25:27
百歐博偉生物：工作菌株的特性穩(wěn)定，是指其核心生物學(xué)性狀、生理生化特征及功能表型與原始標(biāo)準(zhǔn)菌株保持一致，且在規(guī)定傳代次數(shù)內(nèi)無顯著變異。具體體現(xiàn)在以下六個核心維度：
一、形態(tài)學(xué)特征穩(wěn)定
菌落形態(tài)：在特定培養(yǎng)基（如
營養(yǎng)瓊脂、
麥康凱瓊脂）上的大小、形狀、顏色、邊緣、隆起度、透明度、光澤度等保持不變。例如大腸埃希氏菌工作菌株在營養(yǎng)瓊脂上應(yīng)為圓形、濕潤、半透明的灰白色菌落，不會出現(xiàn)粗糙型、皺縮型等變異菌落。
細(xì)胞形態(tài)：經(jīng)革蘭氏染色或特殊染色后，菌體的形狀（球菌、桿菌、弧菌）、大小、排列方式（單生、成對、鏈狀）、染色特性（革蘭氏陽性/陰性）無改變。
特殊結(jié)構(gòu)：有芽孢、鞭毛、莢膜的菌株，其芽孢的大小與位置、鞭毛的數(shù)量與著生方式、莢膜的有無等特征穩(wěn)定。
二、生理生化特性穩(wěn)定
代謝能力：對碳源、氮源的利用能力不變，例如
沙門氏菌工作菌株應(yīng)能發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，不能發(fā)酵乳糖。
酶活性：關(guān)鍵酶的表達(dá)穩(wěn)定，如觸酶試驗、氧化酶試驗、凝固酶試驗等的結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)菌株一致。
生化反應(yīng)譜：在生化鑒定試劑盒或自動化鑒定系統(tǒng)中，反應(yīng)結(jié)果的符合率需達(dá)到 95% 以上，確保鑒定結(jié)果準(zhǔn)確。
三、遺傳特性穩(wěn)定
核心基因序列無突變，尤其是與鑒定、毒力、耐藥相關(guān)的靶基因的序列與原始菌株一致。
質(zhì)粒穩(wěn)定性：攜帶質(zhì)粒的菌株（如耐藥質(zhì)粒、毒力質(zhì)粒），其質(zhì)粒的保有率穩(wěn)定，不會出現(xiàn)質(zhì)粒丟失導(dǎo)致的表型改變。
四、抗原特性穩(wěn)定
對于需要血清學(xué)鑒定的菌株（如
鏈球菌、
沙門氏菌、
志賀氏菌），其表面抗原（O 抗原、H 抗原、K 抗原）的特異性不變，與對應(yīng)診斷血清的凝集反應(yīng)效價符合標(biāo)準(zhǔn)要求，無交叉凝集或不凝集現(xiàn)象。
五、功能表型穩(wěn)定
藥敏特性：對標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌株對應(yīng)的藥敏試驗質(zhì)控范圍保持一致，不會出現(xiàn)耐藥性的漂移或突變。例如
金黃色葡萄球菌 ATCC25923 工作菌株，對青霉素的抑菌圈直徑需符合 CLSI 或 ISO 的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。
毒力表型：致病菌株的毒力相關(guān)表型穩(wěn)定，例如
溶血性鏈球菌工作菌株在血瓊脂上的溶血圈大小和類型（α 溶血、β 溶血）不變。
生長特性：生長曲線、最適生長溫度、pH 耐受范圍、需氧/厭氧特性與原始菌株一致，代時穩(wěn)定，不會出現(xiàn)生長速率顯著變慢或無法生長的情況。
六、特異性與專一性穩(wěn)定
不出現(xiàn)非特異性反應(yīng)，例如在選擇性培養(yǎng)基上的生長特性穩(wěn)定，
大腸埃希氏菌工作菌株在麥康凱瓊脂上應(yīng)為粉紅色菌落，不會出現(xiàn)無色菌落；在顯色培養(yǎng)基上的顯色反應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)菌株一致。
與其他近緣菌株的鑒別特征清晰，無交叉或模糊的表型。
七、穩(wěn)定性驗證的關(guān)鍵手段
實驗室需定期對工作菌株進(jìn)行穩(wěn)定性核驗，常用方法包括：
菌落形態(tài)與細(xì)胞形態(tài)觀察；
關(guān)鍵生化反應(yīng)復(fù)核；
血清學(xué)凝集試驗；
藥敏試驗質(zhì)控范圍比對；
必要時進(jìn)行基因測序驗證。
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