葡萄球菌選擇性瓊脂的實驗原理及實驗中的典型現(xiàn)象！
小楊 / 2025-12-27 09:58:26
葡萄球菌選擇性瓊脂（Staphylococcus Selective Agar）是一類用于從復雜樣本中選擇性分離和計數(shù)葡萄球菌（尤其是
金黃色葡萄球菌）的培養(yǎng)基。它的核心作用是在抑制其他雜菌生長的同時，允許葡萄球菌良好生長。下面我將為你詳細解釋其實驗原理和在實驗中觀察到的典型現(xiàn)象。
一、實驗原理
葡萄球菌選擇性瓊脂的設計通常包含以下幾個關鍵成分，它們協(xié)同作用以實現(xiàn)選擇性分離：
營養(yǎng)成分 (Nutrient Components)
提供基礎營養(yǎng)：培養(yǎng)基中含有蛋白胨、牛肉浸粉、葡萄糖等，為微生物的生長提供碳源、氮源、維生素和礦物質(zhì)。
維持滲透壓：氯化鈉（NaCl）的存在有助于維持細菌細胞的滲透壓，并抑制一些不耐鹽的細菌生長。
選擇性抑制劑 (Selective Inhibitors)這是實現(xiàn)“選擇性”的核心。常見的抑制劑包括：
抗生素類：如頭孢西丁 (Cefoxitin) 或頭孢菌素 (Cephaloridine)。它們主要針對革蘭氏陰性菌的細胞壁合成，從而抑制其生長。
染料類：如結(jié)晶紫 (Crystal Violet) 或孔雀綠 (Malachite Green)。它們是陽離子染料，可與細菌細胞膜上的陰離子成分結(jié)合，導致細胞膜通透性增加，細胞死亡。這類染料對革蘭氏陽性菌（包括
葡萄球菌）的毒性較小，對革蘭氏陰性菌則抑制作用強。
膽鹽類：如牛膽鹽 (Bile Salts)。它們能破壞革蘭氏陰性菌的細胞膜，抑制其生長，但對葡萄球菌的影響較小。
鑒別成分 (Differential Components)許多葡萄球菌選擇性瓊脂同時也是鑒別培養(yǎng)基，通過指示劑來區(qū)分不同種類的葡萄球菌。
甘露醇 (Mannitol)：許多致病性葡萄球菌（如
金黃色葡萄球菌）能發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸。
指示劑：常用酚紅 (Phenol Red)。它在酸性環(huán)境下呈黃色，在堿性環(huán)境下呈紅色。
原理：當細菌發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸時，周圍培養(yǎng)基的 pH 值下降，酚紅指示劑會從紅色變?yōu)辄S色。
二、實驗現(xiàn)象
在接種了樣本并經(jīng)過適宜溫度（通常為 35-37°C）和時間（18-24 小時）的培養(yǎng)后，你可以觀察到以下幾種典型現(xiàn)象：
菌落形態(tài)與顏色
葡萄球菌菌落：通常呈圓形、凸起、表面光滑、邊緣整齊、濕潤有光澤的小菌落。
顏色：在未添加鑒別成分的選擇性瓊脂上，菌落顏色多為灰白色或淡黃色。在添加了甘露醇的培養(yǎng)基上，
金黃色葡萄球菌的菌落周圍會出現(xiàn)一圈明顯的黃色暈圈，這是其發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸的直接證據(jù)。
大?。浩咸亚蚓湟话爿^小，直徑約 1-2 毫米。
溶血現(xiàn)象 (Hemolysis)
部分葡萄球菌（如
金黃色葡萄球菌）能夠產(chǎn)生溶血素，破壞紅細胞。
在含有血液成分的葡萄球菌選擇性瓊脂上，菌落周圍會出現(xiàn)一圈透明或半透明的溶血環(huán)。
α- 溶血：菌落周圍出現(xiàn)草綠色溶血環(huán)（部分紅細胞被破壞，釋放出血紅素）。
β- 溶血：菌落周圍出現(xiàn)完全透明的溶血環(huán)（紅細胞被完全破壞）。
金黃色葡萄球菌通常表現(xiàn)為 β- 溶血。
其他雜菌的生長情況
如果雜菌生長，通常表現(xiàn)為菌落形態(tài)、顏色與葡萄球菌有明顯區(qū)別，且周圍沒有黃色暈圈和溶血環(huán)。
總結(jié)
選擇：通過抑制劑篩選出葡萄球菌。
鑒別：通過指示劑區(qū)分致病性的
金黃色葡萄球菌（產(chǎn)酸、可能溶血）和非致病性葡萄球菌。
這種培養(yǎng)基是食品微生物檢驗（如乳制品、肉制品中
金黃色葡萄球菌的檢測）和臨床微生物學中快速篩查葡萄球菌的常用工具。
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