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實驗一 實驗目的
學習食用菌菌科的菌種及分級標準;掌握食用菌三級菌種的制備方法。
實驗二、 實驗原理
菌種是食用菌生產的基礎,只有優(yōu)良的菌種才可能由良好的收成。食用菌的菌種制作在生產實踐上通常分3步:將自行分離的純種或從專業(yè)單位購買的試管斜面菌種擴大繁殖而成的試管斜面菌種稱為母種(一級菌種);將母種在以木屑、棉籽殼或谷粒等為主的培養(yǎng)料上擴大繁殖而成的瓶(袋)裝菌種稱為原種(二級菌種);將原種或擴大繁殖而成的直接用于栽培的瓶(袋)裝菌種稱為栽培種或生產種(三級菌種) 栽培種所用的培養(yǎng)基配方和制作方法與原種基本相同。制作原種的目的一是為了擴大種量,滿足生產上的需要;二是讓菌絲對各種秸稈類基質具有適應能力,并在適應的同時產生各種酶類; 三是在培養(yǎng)過程中還可以對菌種的生命力、純度等進行檢驗,存優(yōu)棄劣。若生產規(guī)模較小、用種量不大時,也可直接將原種用于生產。
經(jīng)過三級培養(yǎng),食用菌菌絲體數(shù)量大大增加。一般1支試管母種可以繁殖 4~6 瓶原種,每瓶原種可擴接化60~100瓶(袋)以滿足生產上對菌種的大量需求。
三、實驗材料
1,食用菌母種: 平菇試管菌種5~7支。
2,培養(yǎng)料配方:棉籽殼78%,麩皮(或米糠)20%,蔗糖1%,石膏粉1%,料水比1:1.2。
注:原料一定要新鮮、無霉變、干燥、潔凈。
3,器材:滅菌鍋,超凈工作臺,接種用具,臺秤,盆子,菌種瓶,聚丙烯塑料袋(直徑15 cm,厚度0.004 5 cm),袋口套蓋(套環(huán)+海綿蓋)。
四、實驗方法
(一)培養(yǎng)料的配制
按上述配方取原料,把麩皮、石膏拌勻,灑在棉籽殼上反復拌2-3次進行混合;蔗糖用水溶化,摻到適量水中,撥灑在干料上,充分翻拌均勻,使料的含水量達60%-65%(即用手緊握培養(yǎng)料,手指縫用有水珠滲出但不形成水流)。
(二)培養(yǎng)料的分裝及滅菌
配置好的培養(yǎng)料均勻裝人菌種瓶(用于原種制作)或菌種袋(用于栽培種制作)中。裝料時要求松緊適當,同時振動瓶身,裝至瓶肩或袋肩,壓平料面,再用尖形木棒后,用趕緊的紗布將菌種瓶和菌種袋外壁殘留的培養(yǎng)料擦干凈(一面接種后感染雜菌) , 菌種瓶用聚丙烯塑料膜扎口;菌種袋用配套的套環(huán)和海綿蓋直接封口,0.14MPa濕熱滅菌1.5~2h,冷卻后備
(三)原種的制作
用蛋豆大的母種放于原種培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)料面的孔洞處,包扎瓶口,放到培養(yǎng)架上25℃左右避光培養(yǎng)。注意通風換氣,室內相對濕度65%~70%,每天檢查瓶內發(fā)菌狀況,檢出污染瓶。一般經(jīng)20~ 30d,菌絲可長滿菌種瓶,即可得原種。(質量標準:菌絲體濃白、粗壯、有菇香、無異味,與培養(yǎng)料緊密結合,瓶頸有水珠,不得有干縮現(xiàn)象。菌種菌齡適宜,如果瓶壁有黃水等均為菌齡過長,不得再作菌種使用)。
(四)栽培種的制作
用接種匙取棗粒大小原種一塊放于培養(yǎng)袋中培養(yǎng)料面的孔洞處,套蓋封口,25℃左右發(fā)菌培養(yǎng)。 保持通風、暗光條件;室內相對濕65%~70%,每天檢查袋內發(fā)菌狀況,檢出污染袋。一般經(jīng)20~30 d,菌絲可長滿菌種號即可得到三級種(栽培種)(質量標準:菌絲潔白、密集粗壯,上下部生長均勻,在培養(yǎng)蔓延時齊頭并進,無明顯菌絲束,菌絲頂泌無色透明水珠;后期在培養(yǎng)料表層不結菌皮