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萎縮芽胞桿菌的培養(yǎng)與保藏方法及實(shí)驗(yàn)內(nèi)容!
小楊 / 2023-04-17 09:13:27


萎縮芽胞桿菌是Bacillus屬的微生物,原產(chǎn)地為中國(guó)。主要用途為分類;研究,具體用途為分類學(xué)研究。

一、菌種簡(jiǎn)介
平臺(tái)編號(hào):Bio-84853
規(guī)格:凍干物
拉丁屬名:Bacillus Atrophaeus
中文名稱:萎縮芽胞桿菌
拉丁名稱:Bacillus atrophaeus
來(lái)源歷史:←中國(guó)某化妝品公司
收藏時(shí)間:2017/3/10
原產(chǎn)國(guó):中國(guó)
資源歸類編碼:15131311101
模式菌株:非模式菌株
主要用途:研究
特征特性:TSA培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)24 h,菌體呈桿狀,0.4-0.6 μm × 1.7-3.5 μm,單個(gè)或成對(duì)排列,革蘭氏陽(yáng)性。菌落黃色,圓形,平伏,光滑,邊緣不整齊。
生物危害程度:四類
培養(yǎng)基編號(hào):CM0847
培養(yǎng)基名稱:胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA)(CAIQ0701)
培養(yǎng)基成分:胰蛋白胨 15.0g,大豆胨 5.0g,氯化鈉 5.0g,瓊脂 13.0 g,蒸餾水 1.0L,pH7.3±0.2。
培養(yǎng)溫度:30℃
需氧類型:好氧
保存方法:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
共享方式:公益性共享;資源純交易性共享;合作研究共享;資源交換性共享
提供形式:凍干物
用途:研究
注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn))

二、綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。

三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
1、稱量→溶化→調(diào)pH→過(guò)濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無(wú)菌檢查 
2、干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開(kāi)箱取物 
3、高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無(wú)菌檢查 
4、過(guò)濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無(wú)菌檢查→清洗滅菌

四、儀器設(shè)備與器具
1、恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2、1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3、接種針。
4、顯微鏡。
5、超凈工作臺(tái)。
6、玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7、天平:感量0.01g。
8、滅菌釜。
9、培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10、試管夾、酒精燈、秒表、載玻片

五、保藏方法
1、傳代培養(yǎng)保藏法
又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧細(xì)菌用),培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。
2、液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進(jìn)入,以減弱代謝作用。
3、載體保藏法
是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進(jìn)行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。
4、寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動(dòng)物、昆蟲(chóng)、雞胚內(nèi)感染并傳代,此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。
5、冷凍保藏法
可分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速凍結(jié)(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6、冷凍干燥保藏法
先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥)。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來(lái)制備細(xì)胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害。保護(hù)性溶質(zhì)可通過(guò)氫和離子鍵對(duì)水和細(xì)胞所產(chǎn)生的親和力來(lái)穩(wěn)定細(xì)胞成分的構(gòu)型。保護(hù)劑有牛乳、血清、糖類、甘油、二甲亞砜等。

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