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鼠乳桿菌:應(yīng)用于泡菜、果蔬制品、飼料等生產(chǎn)
小楊 / 2023-04-21 08:40:29


鼠乳桿菌是Lactobacillus屬的微生物,原產(chǎn)地為中國(guó)。主要用途為研究;教學(xué);生產(chǎn),具體用途為潛在益生菌。

一、菌種簡(jiǎn)介
平臺(tái)編號(hào):Bio-60196
提供形式:凍干物
拉丁屬名:Lactobacillus Murinus
中文名稱(chēng):鼠乳桿菌
屬名:Lactobacillus
種名加詞:murinus
來(lái)源歷史:←四川省食品發(fā)酵工業(yè)研究設(shè)計(jì)院(1.397)←四川農(nóng)業(yè)大學(xué)微生物系
收藏時(shí)間:2007.12.28
原始編號(hào):C-4
資源歸類(lèi)編碼:15131319101
模式菌株:非模式菌株
主要用途:研究;教學(xué);生產(chǎn)
具體用途:應(yīng)用于泡菜、果蔬制品、飼料等生產(chǎn)。
特征特性:細(xì)胞桿狀、單個(gè)或成對(duì),0.3-0.6×0.4-2.2μm;G+,不運(yùn)動(dòng),無(wú)芽孢,有機(jī)化能,兼性厭氧;不水解酪素和明膠,不還原硝酸鹽,不產(chǎn)吲哚和H2S;接觸酶陰性,無(wú)細(xì)胞色素;最適溫度30~37℃,最適pH為5.5~6.2。發(fā)酵主要產(chǎn)乳酸。    
生物危害程度:四類(lèi)
致病對(duì)象:無(wú)
分離基物:泡菜(青菜,豇豆)
采集地:四川成都青羊區(qū)
培養(yǎng)基:酪蛋白胨 10.0g,牛肉膏 10.0g,酵母粉 5.0g,葡萄糖 5.0g,乙酸鈉 5.0g,檸檬酸二銨 2.0g,Tween 80 1.0g,K2HPO4 2.0g,MgSO4.7H2O 0.2g,MnSO4.H2O 0.05g,CaCO3 20.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH6.8。
培養(yǎng)溫度:37℃
資源保藏類(lèi)型:培養(yǎng)物
保存方法:真空冷凍干燥法
實(shí)物狀態(tài):有實(shí)物
共享方式:公益性共享;資源純交易性共享;合作研究共享;資源交換性共享
源數(shù)據(jù)主鍵:21820
用途:研究;教學(xué);生產(chǎn);應(yīng)用于泡菜、果蔬制品、飼料等生產(chǎn)。
注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn))

二、形態(tài)特征
鼠乳桿菌,發(fā)酵阿拉伯糖、纖維二糖、果糖、半乳糖、乳糖、麥芽糖、甘露糖、蜜二糖、棉籽糖、核糖、蔗糖。不發(fā)酵松三糖、鼠李糖、山梨醇、木糖。革蘭氏陽(yáng)性,菌體呈桿狀,無(wú)芽胞,菌落圓形,接觸酶陰性,兼性厭氧,15℃生長(zhǎng)。 

三、培養(yǎng)方法
1、平板劃線(xiàn)分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過(guò)分區(qū)劃線(xiàn)稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線(xiàn)分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過(guò)程復(fù)雜,對(duì)平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱(chēng)取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無(wú)菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無(wú)菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無(wú)菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無(wú)菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。

四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
1、稱(chēng)量→溶化→調(diào)pH→過(guò)濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無(wú)菌檢查 
2、干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開(kāi)箱取物 
3、高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無(wú)菌檢查 
4、過(guò)濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無(wú)菌檢查→清洗滅菌

五、保存方法
1、傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過(guò)高,營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 。
2、液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長(zhǎng),適用于霉菌、酵母菌、放線(xiàn)菌及需氧細(xì)菌等的保存。
3、懸液保存法:
①蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線(xiàn)菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。
②糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長(zhǎng)達(dá)10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。
4、載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
5、常用的冷凍保存法:
①低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過(guò)多,有些可添加保護(hù)劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來(lái)吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。
②干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。
③液氮保存法(-196℃):是適用范圍最廣的微生物保存法。

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