DSM 12475 脫氮硫桿菌的特性與分布及培養(yǎng)方法！
小楊 / 2023-06-08 08:54:22
脫氮硫桿菌（Thiobacillus denitrificans）是專性無機(jī)化能自養(yǎng)型細(xì)菌，在氧化硫化物的過程獲得能量，并以硝酸鹽為電子受體生成氮?dú)?，故此，這是一類在廢水同步脫硫反硝化處理工藝中的主要功能微生物。
一、菌種簡介
平臺編號：Bio-82442
規(guī)格：培養(yǎng)物
拉丁屬名：Thiobacillus Denitrificans
菌株名稱：脫氮硫桿菌
用途：DSM原裝進(jìn)口
注意事項(xiàng)：僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準(zhǔn)）
二、詳細(xì)信息
Name:Thiobacillus denitrificans (ex Beijerinck 1904) Kelly and Harrison 1989 emend. Kelly and Wood 2000
DSM No.:12475, Type strain
Strain designation:AB7
Other collection no.
or WDCM no.:ATCC 23644,JCM 3870,NCIMB 9548
Isolated from:domestic sewage lagoon
Country:United Kingdom of Great Britain and Northern Ireland Sheffield Sewage Work
Date of sampling:before 1965
Nagoya Protocol Restrictions:There are NO known Nagoya Protocol restrictions for this strain.
History:<- NCIMB <- D. White, AB7 <- M. Hutchinson
Genbank accession numbers:16S rRNA gene: AJ243144
Cultivation conditions:Medium 113 , anaerobic, 30°C
Medium/media recipe(s) required for preparing 113:- Medium 14
Please follow special instructions: 'Cultivation of Anaerobes'
Complete DSMZ Media List
Summary and
additional information:<- NCIMB <- D. White, AB7 <- M. Hutchinson. Domestic sewage lagoon; United Kingdom, Sheffield Sewage Work (7270). Type strain. Taxonomy/description (3868, 5427, 7270). Sequence accession no. 16S rRNA gene: AJ243144. This strain was wrongly quoted as NCIB 8327 in Bergey's Manual of Systematic Bacteriology, vol. 3., p. 1855, 1989. (Medium 113, 30°C, anaerobic).
Literature:3868, 5427, 7270
Risk group:1 (classification according to German TRBA)
Supplied as:Delivery form Prices
Price Category for this culture: 1
Freight and handling charges will be added. See price list.
Other cultures:All DSMZ cultures of the species
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三、菌株分布
脫氮硫桿菌分布很廣，可在10～37℃，pH為4.0～9.5的條件下生長，最適生長溫度為28～30℃，最適pH 6.5～7.0。脫氮硫桿菌對高鹽度環(huán)境的適應(yīng)性不強(qiáng)，如當(dāng)硫酸根離子濃度超過250mM時(shí)，由于總離子強(qiáng)度的升高其生長將受到抑制。
四、菌株特性
脫氮硫桿菌是嚴(yán)格自養(yǎng)菌，只能利用無機(jī)碳源（如碳酸根離子、碳酸氫根離子）進(jìn)行生長代謝。有研究表明，脫氮硫桿菌是通過卡爾文循環(huán)途徑固定二氧化碳，其胞內(nèi)含有卡爾文循環(huán)的兩種關(guān)鍵酶——1,5-二磷酸核酮糖羧化酶和5-磷酸核酮糖激酶。
脫氮硫桿菌能夠利用的氮源范圍很廣，可以是氨鹽、硝酸鹽、亞硝酸鹽以及氨基酸等，在厭氧條件下，硝酸鹽又被作為電子受體而被還原。
在硫循環(huán)體系中，好氧條件下，脫氮硫桿菌以氧為電子受體氧化還原硫化合物而獲得能量。
厭氧條件下，脫氮硫桿菌以反硝化反應(yīng)的方式同時(shí)參與硫、氮循環(huán),以硝酸鹽中的氧來氧化硫化合物。
五、微生物培養(yǎng)方法
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。
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