未用完的培養(yǎng)基應(yīng)如何保存？具體的操作方法有哪些？
小楊 / 2025-08-18 09:37:31
百歐博偉生物：未用完的培養(yǎng)基（包括滅菌后未倒平板的液體培養(yǎng)基、已倒平板但未使用的固體培養(yǎng)基）需根據(jù)狀態(tài)和類型，采取針對性的保存措施，以避免污染、營養(yǎng)成分降解或物理性狀改變，具體方法如下：
一、液體培養(yǎng)基（未分裝、未倒平板）的保存
1、滅菌后立即處理
滅菌后的液體培養(yǎng)基需在室溫下冷卻至 40-50℃（避免高溫導(dǎo)致容器內(nèi)壓力變化），立即密封（如三角瓶用滅菌的硅膠塞或封口膜密封），防止冷卻過程中吸入空氣中的微生物。
若暫時不使用，需冷藏保存：4℃冰箱中存放，避免冷凍（冷凍會破壞培養(yǎng)基膠體結(jié)構(gòu)，解凍后可能分層或凝固）。
2、保存期限與注意事項
普通營養(yǎng)培養(yǎng)基（如
LB、
營養(yǎng)肉湯）：4℃下密封保存不超過 1 周，富含碳水化合物、蛋白質(zhì)的培養(yǎng)基（如
TCBS、
庖肉培養(yǎng)基）需縮短至 3-5 天，避免營養(yǎng)成分降解或滋生污染菌（即使未開封，低溫下仍可能有嗜冷菌繁殖）。
再次使用前：觀察培養(yǎng)基是否有渾濁、沉淀、顏色變化（如 pH 改變導(dǎo)致變色），若出現(xiàn)異常需廢棄；使用時需重新加熱熔化（固體培養(yǎng)基）或直接取用（液體），加熱時避免反復(fù)煮沸（防止?fàn)I養(yǎng)成分破壞）。
二、固體培養(yǎng)基（已倒平板，未使用）的保存
1、凝固后及時倒置
倒平板后待培養(yǎng)基完全凝固（約 30-60 分鐘，室溫下），立即倒置存放（培養(yǎng)基面朝下），避免蓋子內(nèi)側(cè)的冷凝水滴落污染培養(yǎng)基表面。
2、密封與避光
單皿保存：用 parafilm 封口膜纏繞培養(yǎng)皿邊緣（僅纏繞 1-2 圈，留微小縫隙平衡氣壓），防止水分過度蒸發(fā)導(dǎo)致培養(yǎng)基干裂。
批量保存：將多個平板放入無菌保鮮盒或密封袋中，盒內(nèi)可放 1-2 張濕潤濾紙（避免過度干燥），但需確保濾紙不接觸培養(yǎng)基表面。
避光：對光敏感的培養(yǎng)基（如含維生素、指示劑的培養(yǎng)基，如 SS 瓊脂、麥康凱瓊脂）需用不透光容器或黑布包裹，避免光照導(dǎo)致成分分解（如維生素 B 族易被光破壞）。
3、儲存條件與期限
溫度：4℃冰箱冷藏（避免冷凍，否則解凍后培養(yǎng)基易碎裂）。
期限：普通固體培養(yǎng)基（如
營養(yǎng)瓊脂）保存不超過 1 周；選擇性培養(yǎng)基因含抑菌劑，可延長至 2 周，但需提前檢查是否有抑菌效果下降（如對照菌生長異常）。
復(fù)用時：取出后室溫平衡 30 分鐘，觀察培養(yǎng)基表面是否干燥、污染（如有菌落或霉斑需廢棄），干燥的平板可滴加 1-2 滴無菌水（沿邊緣），避免接種時樣品脫水。
三、特殊類型培養(yǎng)基的保存
1、選擇性 / 鑒別培養(yǎng)基
含抗生素的培養(yǎng)基（如氨芐青霉素 LB 平板）：抗生素需在培養(yǎng)基滅菌后冷卻至 50-60℃時加入（避免高溫破壞抗生素），保存時需更嚴(yán)格密封，4℃下不超過 1 周（抗生素易降解失效）。
含血液、血清的培養(yǎng)基（如血瓊脂）：需在無菌條件下添加脫纖維羊血（5-10%），保存不超過 3 天，且避免反復(fù)凍融（血液成分易變性）。
2、微量培養(yǎng)基（如 96 孔板）
密封后用鋁箔包裹（防潮、避光），4℃保存，期限不超過 1 周；若需長期保存（1 個月內(nèi)），可 - 20℃冷凍，但需避免反復(fù)凍融（建議分裝為單次用量）。
四、通用注意事項
標(biāo)記清晰：在容器或平板上標(biāo)注培養(yǎng)基名稱、滅菌 / 制備日期、保存人，便于追溯和優(yōu)先使用舊批次（“先進(jìn)先出”原則）。
定期檢查：每周查看保存的培養(yǎng)基，剔除污染、變質(zhì)（如渾濁、變色、干裂）的批次，避免誤用。
避免反復(fù)開蓋：液體培養(yǎng)基取用后立即蓋緊，固體平板盡量整盒取出，減少單皿暴露在空氣中的時間。
通過以上方法，可最大限度保持未用完培養(yǎng)基的無菌性和營養(yǎng)活性，降低實驗成本并減少污染風(fēng)險。
北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司擁有對菌種、細(xì)胞、培養(yǎng)基、配套試劑等產(chǎn)品需求者的極優(yōu)質(zhì)服務(wù)，對購買項目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到最終售后的確保項目準(zhǔn)確到位，都有相關(guān)人士進(jìn)行維護(hù),確保您在
微生物菌種查詢網(wǎng)中獲得最優(yōu)質(zhì)服務(wù)！也正因為此，北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司與國內(nèi)外多家研制單位、生物制藥、第三方檢測機(jī)構(gòu)和科研院所院校、化工企業(yè)有著良好、長期和穩(wěn)定的合作關(guān)系！
下載附件
上一篇：布氏乳桿菌的分離方法和鑒定方法及操作流程總結(jié)！
下一篇：耐熱大腸菌群數(shù)的檢測方法之傳統(tǒng)培養(yǎng)法和快速檢測法！