細(xì)胞培養(yǎng)常用耗材的分類與使用注意事項及延伸建議！
小楊 / 2025-08-18 10:04:26
百歐博偉生物：細(xì)胞培養(yǎng)是生命科學(xué)研究和生物技術(shù)領(lǐng)域的基礎(chǔ)技術(shù)，其常用耗材種類繁多，不同耗材適用于不同的培養(yǎng)需求和操作場景。以下從分類及使用兩方面詳細(xì)介紹：
一、細(xì)胞培養(yǎng)常用耗材分類
根據(jù)用途和形態(tài)，可分為容器類、工具類、輔助材料類三大類，每類下又有具體細(xì)分：
（一）容器類耗材（用于細(xì)胞生長、儲存或反應(yīng)）
1、培養(yǎng)皿（Petri Dish）
按規(guī)格：常見直徑有 35mm、60mm、100mm、150mm 等，也有小規(guī)格如 10mm（用于少量細(xì)胞培養(yǎng)）。
按用途：分為普通培養(yǎng)皿（通用細(xì)胞培養(yǎng)）、共聚焦培養(yǎng)皿（底部為玻璃，適合熒光顯微鏡觀察）、低吸附培養(yǎng)皿（用于懸浮細(xì)胞或類器官培養(yǎng)，減少細(xì)胞貼壁）。
2、培養(yǎng)板（Culture Plate）
按孔數(shù)：6 孔、12 孔、24 孔、48 孔、96 孔（最常用，96 孔板適合高通量篩選），還有 384 孔（超高通量）。
按底部類型：平底（常規(guī)培養(yǎng)）、圓底（懸浮細(xì)胞如
淋巴細(xì)胞）、V 底（用于細(xì)胞計數(shù)或融合實(shí)驗(yàn)）。
特殊類型：酶標(biāo)板（用于 ELISA 等檢測，與 96 孔板類似但材質(zhì)更適合光學(xué)檢測）、Transwell 板（帶通透性膜，用于細(xì)胞遷移、侵襲實(shí)驗(yàn)）。
3、培養(yǎng)瓶（Culture Flask）
按規(guī)格：25cm²（小容量，傳代或初期培養(yǎng)）、75cm²（常規(guī)培養(yǎng)）、175cm²（大量培養(yǎng)）、225cm²（大規(guī)模擴(kuò)增）。
按形狀：直頸、斜頸（方便操作）；按瓶蓋：密封蓋（需配合 CO?培養(yǎng)箱）、透氣蓋（可直接交換氣體）。
特殊類型：旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（用于懸浮細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)，需配套旋轉(zhuǎn)設(shè)備）。
4、儲存容器
凍存管：1.5mL、2mL 為主，用于細(xì)胞凍存，材質(zhì)需耐低溫（如 PP 材質(zhì)），有外旋蓋和內(nèi)旋蓋（防漏性更好）。
離心管：15mL、50mL（用于細(xì)胞離心、洗滌），1.5mL、2mL（小體積反應(yīng)或試劑儲存）。
（二）工具類耗材（用于細(xì)胞操作）
1、移液相關(guān)耗材
移液槍頭（Tip）：按規(guī)格分 10μL、200μL、1000μL 等，有無菌無酶（細(xì)胞培養(yǎng)專用）、帶濾芯（防止交叉污染）、低吸附（減少液體殘留）。
移液管：玻璃或塑料材質(zhì)，塑料移液管為一次性使用，規(guī)格有 1mL、2mL、5mL、10mL、25mL 等，用于大量液體轉(zhuǎn)移。
2、其他操作工具
細(xì)胞刮：用于貼壁細(xì)胞的消化后刮取，頭部材質(zhì)柔軟（如橡膠或塑料），避免損傷細(xì)胞。
過濾膜 / 過濾器：針頭式過濾器（0.22μm 孔徑，用于培養(yǎng)基或試劑除菌）、真空過濾器（大體積溶液除菌，如培養(yǎng)基批量過濾）。
載玻片 / 蓋玻片：用于細(xì)胞爬片（貼壁細(xì)胞在玻片上生長，便于固定染色后觀察），需無菌處理。
（三）輔助材料類（支持細(xì)胞生長或?qū)嶒?yàn)）
培養(yǎng)基瓶：儲存配制好的培養(yǎng)基，通常為 500mL、100mL，材質(zhì)為 PET 或玻璃，帶刻度。
血清瓶：儲存胎牛血清等，需避光（棕色瓶）或配合鋁箔包裹，防止血清成分降解。
封口膜：用于密封培養(yǎng)板、離心管等，防止污染或液體蒸發(fā)。
無菌手套、口罩、生物安全袋：不屬于直接培養(yǎng)耗材，但為無菌操作必備。
二、細(xì)胞培養(yǎng)耗材的使用注意事項
1、無菌操作原則
所有耗材需確保無菌：優(yōu)先選擇預(yù)滅菌產(chǎn)品（包裝標(biāo)注“無菌”），未滅菌的需經(jīng)高壓蒸汽滅菌（如玻璃移液管）或射線滅菌（塑料耗材）。
操作前：超凈工作臺紫外消毒 30 分鐘，耗材開封后避免接觸非無菌表面（如瓶口、皿蓋內(nèi)側(cè)）。
2、根據(jù)細(xì)胞類型選擇
貼壁細(xì)胞：需使用帶表面處理（如包被膠原蛋白、多聚賴氨酸）的培養(yǎng)皿 / 板 / 瓶，促進(jìn)細(xì)胞貼附；懸浮細(xì)胞：選擇普通或低吸附容器，避免細(xì)胞貼壁死亡。
敏感細(xì)胞（如
原代細(xì)胞）：優(yōu)先使用低內(nèi)毒素、無酶的耗材，減少對細(xì)胞的刺激。
3、規(guī)格匹配實(shí)驗(yàn)需求
小規(guī)模實(shí)驗(yàn)（如藥物篩選）：用 96 孔板；大量擴(kuò)增細(xì)胞：用 175cm² 培養(yǎng)瓶。
觀察細(xì)胞形態(tài)：選擇共聚焦培養(yǎng)皿或玻璃底培養(yǎng)板，便于顯微鏡觀察。
4、儲存與處理
耗材需在干燥、無菌環(huán)境下儲存，避免陽光直射（尤其塑料耗材，防止老化）。
凍存管使用前需檢查密封性，凍存時需梯度降溫（如 - 80℃過夜后移至液氮），避免細(xì)胞損傷。
5、污染防控
一次性耗材不可重復(fù)使用；多次使用的玻璃器皿需徹底清洗并滅菌。
操作中若發(fā)現(xiàn)耗材污染（如渾濁、菌落），需立即丟棄并消毒環(huán)境，避免交叉污染。
三、延伸建議
選擇知名品牌耗材，保證質(zhì)量穩(wěn)定性，尤其對敏感細(xì)胞實(shí)驗(yàn)至關(guān)重要。
根據(jù)實(shí)驗(yàn)預(yù)算合理搭配：常規(guī)實(shí)驗(yàn)用普通耗材，精密實(shí)驗(yàn)（如熒光檢測）用光學(xué)級耗材（減少背景干擾）。
注意耗材兼容性：如某些有機(jī)溶劑會腐蝕塑料，需使用玻璃容器。
掌握細(xì)胞培養(yǎng)耗材的分類和使用要點(diǎn)，是保證細(xì)胞培養(yǎng)成功率和實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性的基礎(chǔ)。
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