植物類諾卡氏菌的培養(yǎng)與保藏方法及主要應用！
小楊 / 2024-01-16 08:56:49
植物類諾卡氏菌是Nocardioides屬的微生物，原產(chǎn)地為中國。主要用途為分類；研究；教學。
一、菌種簡介
規(guī)格：凍干物
拉丁屬名：Nocardioides Plantarum
收藏時間：2013/3/1
原始編號：R8-5
原產(chǎn)國：中國
資源歸類編碼：15131514101
模式菌株：非模式菌株
主要用途：分類；研究；教學
特征特性：該菌株為桿狀，不形成芽孢，不能運動，以二分裂方式增殖。菌落形態(tài)為圓形，凸起，濕潤，光滑，呈乳白色。最適生長溫度25℃, 最適pH 為8.0。能微弱地水解淀粉，不能水解七葉靈。能利用龍膽二糖，葡萄糖酸酯等做為唯一碳源進行生長。
寄主名稱：無
致病對象：無
致病名稱：無
傳播途徑：無
分離基物：土壤
采集地：北極
培養(yǎng)基編號：848
培養(yǎng)溫度：20℃
注意事項：僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準）
二、形態(tài)特征
該菌株為桿狀，不形成芽孢，不能運動，以二分裂方式增殖。菌落形態(tài)為圓形，凸起，濕潤，光滑，呈乳白色。最適生長溫度25℃, 最適pH 為8.0。能微弱地水解淀粉，不能水解七葉靈。能利用龍膽二糖，葡萄糖酸酯等做為唯一碳源進行生長。
三、主要應用
本菌主要分布于土壤?，F(xiàn)已報道100余種，能產(chǎn)生30多種抗生素。如可產(chǎn)生對結核分枝桿菌和麻風分枝菌有特效的利福霉素；對引起植物白葉枯病的細菌，以及原蟲、病毒有作用的間型霉素；對革蘭氏陽性細菌有作用的瑞斯托菌素等。另外，有此諾卡氏菌用于石油脫蠟、烴類發(fā)酵以及污水處理中分解腈類化合物。
該菌種施入土壤中后可有效預防多種土傳病害，有效抑制根線蟲的卵塊孵化，驅避成蟲，且對根線蟲病有很好的防效，是未來有機綠色種植的理想菌劑。
四、綜合微生物的培養(yǎng)方法，包括以下步驟：
（1）前期準備：（A）滅菌處理；（B）制備Biolite水；（C）檢查設備和材料；
（2）按比例配制培養(yǎng)材料；
（3）導入曝氣，進行繁殖培養(yǎng)；
（4）取液觀察；（a）取液；（b）稀釋菌液；（c）平板培養(yǎng)；
（5）分離并檢測；
（6）取液儲存；通過該綜合微生物培養(yǎng)方法簡單可操作性強，培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi)，菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變，且繁殖快速。
五、儀器設備與器具
1、恒溫培養(yǎng)箱：36±1℃。
2、1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3、接種針。
4、顯微鏡。
5、超凈工作臺。
6、玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7、天平：感量0.01g。
8、滅菌釜。
9、培養(yǎng)皿（直徑為90mm）、試管，經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10、試管夾、酒精燈、秒表、載玻片。
六、保藏方法
1、傳代培養(yǎng)保藏法
又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等（后者作保藏厭氧細菌用），培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。
2、液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當延長保藏時間，它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟，一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡，另一方面可阻止氧氣進入，以減弱代謝作用。
3、載體保藏法
是將微生物吸附在適當?shù)妮d體，如土壤、沙子、硅膠、濾紙上，而后進行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和濾紙保藏法應用相當廣泛。
4、寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長的微生物，如病毒、立克次氏體、螺旋體等，它們必須在生活的動物、昆蟲、雞胚內(nèi)感染并傳代，此法相當于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進行保藏。
5、冷凍保藏法
可分低溫冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速凍結（約-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。
6、冷凍干燥保藏法
先使微生物在極低溫度（-70℃左右）下快速冷凍，然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分（真空干燥）。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護劑來制備細胞懸液，以防止因冷凍或水分不斷升華對細胞的損害。保護性溶質(zhì)可通過氫和離子鍵對水和細胞所產(chǎn)生的親和力來穩(wěn)定細胞成分的構型。保護劑有牛乳、血清、糖類、甘油、二甲亞砜等。
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